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PCR檢測試劑盒(hé)
商品(pǐn)屬性
| 產品名(míng)稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨(huò)號(hào) |
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胎兒(ér)彎曲菌PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé) |
50T |
YS-P015261 |
儲存條件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存(cún)，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫，避光。
有效(xiào)期：一(yī)年
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試劑盒(hé)的有效(xiào)期一(yī)般(bān)為1年，這是(shì)指在(zài)適(shì)當的儲存(cún)溫度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的(dí)試劑(jì)一般要貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產物(wù)檢測部分試(shì)劑(jì)則貯存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避免反復(fù)凍(dòng)融。
【結(jié)果(guǒ)分析(xī)條件設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾(yù)值綫(xiàn)設定在剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常陰(yīn)性(xìng)質控品擴(kuò)增曲綫的(dí)最高(gāo)點。
【質(zhì)控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的檢(jiǎn)測結果(guǒ)應(yīng)為陽性，有明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需在一次實驗(yàn)中同時滿足，否則(zé)該(gāi)次實驗視為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結果判斷】
2.可疑(yí)：有明顯的指數擴增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本(běn)為(wéi)可疑(yí)樣本；對於(yú)可疑樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復(fù)核(hé)一(yī)次，若復(fù)核結果Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，則判定為(wéi)陽性，否則判定為陰性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數擴增期，Ct=40或(huò)無Ct值均判定(dìng)為陰性樣(yàng)本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結(jié)果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙染，試劑(jì)汙(wū)染，樣(yàng)品交叉汙(wū)染(rǎn)會出(chū)現假(jiǎ)陽性(xìng)結(jié)果；
2. 試劑(jì)運輸，保存不(bù)當或(huò)試(shì)劑(jì)配(pèi)製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的(dí)試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下降，可能會導致出現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性結果。
PCR反應(yīng)的特異性(xìng)：
②鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基因的特異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守性。
胎兒彎(wān)曲菌(jūn)PCR檢測(cè)試(shì)劑盒其中引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確(què)結(jié)合是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引物與模板的結(jié)合及(jí)引物(wù)鏈的延(yán)伸(shēn)是(shì)遵循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配對原(yuán)則的(dí)。聚合酶合成反應的忠實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫性，使(shǐ)反應(yīng)中模板與(yǔ)引(yǐn)物的(dí)結合(復性(xìng))可(kě)以在(zài)較高(gāo)的(dí)溫(wēn)度(dù)下進行(háng)，結合(hé)的特(tè)異性大大(dà)增加，被擴(kuò)增(zēng)的靶基因片段(duàn)也就能保(bǎo)持很(hěn)高的正確度(dù)。再(zài)通(tōng)過選擇特(tè)異性(xìng)和保守性(xìng)高的靶基因(yīn)區，其特異性程度就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的生(shēng)成量是以指數方式增加的，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起(qǐ)始待(dài)測(cè)模(mó)板擴增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬(wàn)個細胞(bāo)中檢(jiǎn)出一(yī)個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞；在(zài)病(bìng)毒的(dí)檢測(cè)中(zhōng)，PCR的靈敏度(dù)可達3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單位)；在(zài)細菌(jūn)學(xué)中zui小檢出(chū)率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速(sù)
PCR反應(yīng)用耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性地(dì)將反應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴增液和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋上進行變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火-延伸(shēn)反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般(bān)在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增(zēng)反應。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用(yòng)電泳分(fēn)析，不(bù)一定(dìng)要(yào)用同位(wèi)素(sù)，無(wú)放射(shè)性(xìng)汙染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的純度(dù)要求低
不需要分(fēn)離病毒或(huò)細(xì)菌(jūn)及(jí)培養細胞(bāo)，DNA 粗製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均(jūn)可作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨床(chuáng)標本如(rú)血液，體腔液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發，細(xì)胞(bāo)，活PCR技術(shù)概論。
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