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源性檢測(cè)PCR
轉基(jī)因玉米品(pǐn)係(xì)DBT418核酸(suān)檢測試劑盒（PCR-熒(yíng)光(guāng)探(tàn)針(zhēn)法(fǎ)）
商品屬(shǔ)性：
貨(huò)號
YS-YP3286
規格
48T
方法
PCR-熒光探針法(fǎ)
有效(xiào)期
一年(nián)
保存
低溫(wēn)運輸(shū)，-20℃保存(cún)
用途(tú)
僅供(gōng)科(kē)研(yán)實(shí)驗(yàn)
儲存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：低溫運輸，-20℃保存，保存期限(xiàn)為一年。陽性(xìng)對照(zhào)需要(yào)單(dān)獨(dú)放(fàng)置(zhì)，不(bù)要(yào)汙染(rǎn)其他(tā)試劑(jì)。
適用(yòng)儀(yí)器
Dhelix-1610，Dhelix-3210，ESE Tube Scanner，Genie II，Deaou-308c 等(děng)恒(héng)溫熒(yíng)光(guāng)檢(jiǎn)測儀，ABI 7500，LightCycler480，CFX 96 等(děng)熒(yíng)光(guāng) PCR 儀。
自備(bèi)耗材(cái)和(hé)儀器:
①滅(miè)菌(jūn) 1.5mL 或 2.0mL 離(lí)心管；②滅(miè)菌 0.2mL PCR 管(guǎn)或八(bā)聯管(guǎn)；③冰(bīng)盒；④移(yí)液器(qì)（0.5-10μL，10-100μL，100-1000μL）及(jí)配套滅菌吸頭(tóu)；⑤離心機；⑥渦旋混(hùn)匀器(qì)；⑦金(jīn)屬浴(yù)；⑧均質機(jī)，攪拌(bàn)機(jī)或(huò)研缽(bō)等(děng)研(yán)磨器具；⑨電子天平(píng)。
注(zhù)意(yì)事項(xiàng)：
1．本(běn)試劑(jì)檢測靈敏度(dù)高。為了(liǎo)防(fáng)止(zhǐ)汙染，實(shí)驗要分區(qū)操(cāo)作(zuò)。
1）第(dì)一區(qū)：試劑(jì)準(zhǔn)備區。
2）第(dì)二區：樣本(běn)製(zhì)備區。
3）第(dì)三區(qū)：模板(bǎn)添加區。
4）第(dì)四區：擴增及產物分(fēn)析(xī)區。
分區之(zhī)間最好進(jìn)行(háng)物(wù)理性隔(gé)離，避(bì)免(miǎn)人為(wéi)因(yīn)素(sù)造(zào)成的(dí)汙(wū)染(rǎn)。
2．實驗(yàn)過程(chéng)中(zhōng)穿(chuān)戴工作服和乳膠(jiāo)手(shǒu)套(tào)，不同區(qū)域(yù)獨立(lì)使用工具，需更換手(shǒu)套和(hé)實驗服。
3．嚴格按(àn)照操作(zuò)步(bù)驟操作，試(shì)劑配製和加樣(yàng)等步(bù)驟請嚴格(gé)按照(zhào)說明書要(yào)求(qiú)在(zài)冰盒(hé)上(shàng)操(cāo)作。
4．反應(yīng)液中(zhōng)的成分(fēn)對(duì)光敏感，應避(bì)光(guāng)保存。試(shì)劑(jì)使用前要完全解(jiě)凍(dòng)，但應避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融，推薦(jiàn)使(shǐ)用前(qián)離心 30秒，並按檢(jiǎn)測頻次(cì)將反應(yīng)液(yè)以適當(dāng)體積分(fēn)管保(bǎo)存(cún)。
5．反(fǎn)應(yīng)結束(shù)後，擴增(zēng)管(guǎn)請置(zhì)於(yú)密封袋(dài)內丟(diū)棄，當(dāng)日(rì)清(qīng)理(lǐ)，開蓋易(yì)造成氣溶膠汙(wū)染，禁止(zhǐ)開蓋。
6．不同(tóng)批號(hào)試劑請勿(wù)混合使(shǐ)用(yòng)，在有效(xiào)期內使(shǐ)用。
結果判定：
①轉基因(yīn)玉米品係DBT418核(hé)酸(suān)檢測試劑盒(hé)（PCR-熒光(guāng)探針(zhēn)法(fǎ)）儀器(qì)自動(dòng)判定(dìng)結(jié)果，若顯示(shì)“陽性”，則(zé)樣(yàng)品中(zhōng)含有(yǒu) NOS 基(jī)因(yīn)；若(ruò)顯示“陰性”，則(zé)樣品(pǐn)中(zhōng)不(bù)含有 NOS 基因或含量低於檢測限。
②在(zài)熒光(guāng)定(dìng)量 PCR 儀上，根(gēn)據有無(wú)“S”型擴(kuò)增曲綫(xiàn)判定結(jié)果。若(ruò)有(yǒu)“S”型擴(kuò)增曲綫，則樣(yàng)品(pǐn)中(zhōng)含有 NOS 基因；若(ruò)無“S”型擴增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)，則樣(yàng)品中(zhōng)不含(hán)有 NOS 基因或含(hán)量(liáng)低於檢(jiǎn)測(cè)限(xiàn)。
NG 反應(yīng)管結果顯示“陰(yīn)性(xìng)”，PG 反(fǎn)應管結果顯示(shì)“陽(yáng)性”，此次(cì)檢(jiǎn)測結果有(yǒu)效，否(fǒu)則(zé)無效。如(rú)重(zhòng)復(fù)檢(jiǎn)測結果仍為(wéi)無效，請與技術支持人員聯(lián)係。
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