測定(dìng)意(yì)義

TH位於綫粒體的內膜上，又稱為呼(hū)吸電(diàn)子(zǐ)傳遞鏈(liàn)復(fù)合(hé)體六，催(cuī)化NADH+NADP+和(hé) NAD++NADPH相互(hù)轉化(huà)。催化正向(xiàng)反應稱為(wéi)TH-1。綫(xiàn)粒體NADH含(hán)量增(zēng)加時會(huì)導致綫粒體膜(mó)的H+電化(huà)學(xué)梯(tī)度(dù)升(shēng)高(gāo)，因而(ér)促(cù)進了(liǎo)電子(zǐ)傳遞鏈(liàn)上ROS的產生。TH-1促進NADH轉換為NADPH，從(cóng)而提(tí)高綫粒體(tǐ)的(dí)抗(kàng)氧(yǎng)化能(néng)力(lì)。

NADH和NADPH均(jūn)在340nm有特(tè)征吸(xī)收，因此(cǐ)TH催(cuī)化的(dí)轉(zhuǎn)氫反應不能導(dǎo)致(zhì)340nm吸光度發生變化(huà)。用人(rén)工合(hé)成底物(wù)3-乙(yǐ)酰吡(pǐ)啶(dìng)腺(xiàn)嘌呤二核苷酸(suān)磷酸(suān)（APADP+）替代NADP+，TH-1催(cuī)化 APADP+還原(yuán)生成(chéng)的APADPH在(zài)375nm有特(tè)征(zhēng)光(guāng)吸(xī)收(shōu)，因此通過(guò)測定375nm光吸收增(zēng)加速率(shuài)，來(lái)計算TH-1活(huó)性(xìng)。

可(kě)見分(fēn)光(guāng)光(guāng)度(dù)計/酶標儀，台(tái)式離(lí)心機(jī)，水浴鍋(guō)，可(kě)調(tiáo)式移(yí)液(yè)器，微(wēi)量石英(yīng)比(bǐ)色皿/96孔板，研(yán)缽，冰(bīng)和(hé)蒸(zhēng)餾水。