大鼠膀(bǎng)胱平滑(huá)肌細胞

大(dà)鼠(shǔ)膀(bǎng)胱平滑肌(jī)細(xì)胞(bāo)分離自(zì)膀胱(guāng)組(zǔ)織
；膀(bǎng)胱是(shì)主(zhǔ)要(yào)由(yóu)平滑肌細(xì)胞組(zǔ)成的中空器(qì)官(guān)，膀(bǎng)胱(guāng)平(píng)滑肌(jī)的(dí)舒(shū)張和(hé)收(shōu)縮使得(dé)膀胱(guāng)分(fēn)別(bié)儲存和(hé)排(pái)出尿液。膀胱(guāng)平(píng)滑肌細胞表(biǎo)型(xíng)的(dí)調控和(hé)可誘(yòu)導(dǎo)一(yī)氧(yǎng)化氮合(hé)酶的(dí)表達(dá)與(yǔ)多種病(bìng)理(lǐ)狀況(kuàng)有關，包(bāo)括膀(bǎng)胱功(gōng)能障礙。研(yán)究表明(míng)，組織缺(quē)氧(yǎng)抑製膀胱平滑(huá)肌細胞(bāo)的增殖(zhí)，膀(bǎng)胱平滑肌細胞的分化依賴(lài)於膀胱上皮(pí)細胞(bāo)釋(shì)放的因子。膀胱(guāng)平(píng)滑肌細胞(bāo)外基質(zhì)的(dí)分(fēn)泌(mì)表(biǎo)型可通過(guò)細胞所(suǒ)經歷的機械(xiè)變形頻(pín)率而(ér)改(gǎi)變(biàn)。平(píng)滑肌(jī)是許多疾(jí)病中(zhōng)的(dí)共(gòng)同(tóng)路徑(jìng)，因(yīn)此，了解在疾(jí)病(bìng)發生(shēng)及持續(xù)過程中(zhōng)平滑肌怎樣變化，這(zhè)是(shì)治療(liáo)方(fāng)法取得進展(zhǎn)的重(zhòng)要一步(bù)。膀胱壁(bì)由(yóu)三層組(zǔ)織組成(chéng)，由內向外(wài)為粘(nián)膜層，肌層和外膜(mó)。逼尿肌(jī)為膀(bǎng)胱(guāng)壁(bì)層(céng)肌(jī)肉的總稱(chēng)，由平滑肌(jī)構成(chéng)。分為三層，內，外層(céng)為縱(zòng)行(háng)肌(jī)，中層為環形肌。環狀(zhuàng)肌最(zuì)厚，堅強(qiáng)有(yǒu)力。逼尿肌(jī)收縮，可使(shǐ)膀胱內(nèi)壓(yā)升高，壓迫(pò)尿液由尿(niào)道排(pái)出。在膀胱與尿道交(jiāo)界處有較(jiào)厚(hòu)的環形(xíng)肌，形成(chéng)尿(niào)道內括約(yuē)肌。在(zài)括約肌(jī)收縮(suō)能關閉尿道內口，防止(zhǐ)尿(niào)液(yè)自(zì)膀胱(guāng)漏(lòu)出。膀(bǎng)胱(guāng)平滑肌細(xì)胞原(yuán)代分(fēn)離培養3天後(hòu)，可(kě)見細胞(bāo)貼壁(bì)伸(shēn)展(zhǎn)，細胞形(xíng)態大小不一(yī)，呈梭形，不(bù)規(guī)則形，三角形或(huò)扇形(xíng)，核卵圓(yuán)形，居中
；2周(zhōu)後(hòu)細胞(bāo)匯合(hé)，多數細(xì)胞(bāo)伸展呈(chéng)長(cháng)梭形，胞(bāo)漿(jiāng)豐富(fù)，有分枝狀突起，細(xì)胞平行(háng)排列(liè)成單(dān)層(céng)或部(bù)分區(qū)域多層(céng)重(zhòng)疊生長(cháng)，高低起(qǐ)伏
；細(xì)胞密(mì)度低時(shí)，常交織成(chéng)網狀
；密度高(gāo)時(shí)，則排(pái)列(liè)為旋(xuán)渦(wō)狀或(huò)柵欄狀。傳代後細胞(bāo)生(shēng)長較(jiào)快，4-6天即可匯合，並保持(chí)上述(shù)形(xíng)態學特征和生長特點(diǎn)。體外培養(yǎng)膀胱平滑(huá)肌(jī)細胞不(bù)僅(jǐn)為組(zǔ)織工程膀(bǎng)胱(guāng)，尿道(dào)提供種(zhǒng)植細胞的(dí)必要手(shǒu)段(duàn)，也是研(yán)究(jiū)平滑肌瘤的基(jī)礎(chǔ)與前提(tí)。

自備(bèi)試劑： 0.25%胰(yí)蛋白酶  ，PBS  ，完全培養基(jī)

培養(yǎng)基： 大(dà)鼠(shǔ)膀胱平滑肌細(xì)胞完全培(péi)養基(jī)(含FBS，生長(cháng)添加(jiā)劑(jì)，Penicillin，Streptomycin等(děng))

換液頻率： 每(měi)2-3天換液(yè)一(yī)次

生長(cháng)特性： 貼壁(bì)

細胞形態： 成(chéng)纖維細胞樣

傳代比例(lì)： 1:2

傳代(dài)特(tè)性： 可傳5代左右
；3代以內狀態最佳

消化液(yè)： 0.25%胰蛋白酶

大鼠膀(bǎng)胱(guāng)平(píng)滑(huá)肌細(xì)胞(bāo)體外(wài)培養周(zhōu)期有(yǒu)限(xiàn)
；建議(yì)使(shǐ)用(yòng)配套的(dí)專(zhuān)用生長培(péi)養基及(jí)正確的(dí)操作方法來培(péi)養，以此(cǐ)保證該細胞(bāo)的(dí)最(zuì)佳培養狀態。

方法(fǎ)簡介 實(shí)驗室(shì)分離的大鼠膀胱(guāng)平滑(huá)肌(jī)細胞(bāo)采(cǎi)用胰(yí)蛋白(bái)酶(méi)-膠原酶聯合(hé)消(xiāo)化法結(jié)合(hé)差速貼壁法(fǎ)製(zhì)備(bèi)而(ér)來，細(xì)胞總(zǒng)量(liáng)約為5×10⁵ cells/瓶。

質量檢測(cè) 實驗(yàn)室(shì)分離的(dí)大(dà)鼠膀胱(guāng)平滑肌細胞(bāo)經(jīng)α-SMA免(miǎn)疫熒光(guāng)鑒定，純(chún)度可達90%以上，且不含有(yǒu)HIV-1，HBV，HCV，支原(yuán)體，細菌，酵母和真菌等(děng)。