大鼠表(biǎo)皮成纖維細(xì)胞(bāo)

大(dà)鼠(shǔ)表(biǎo)皮成纖維細胞分(fēn)離自大鼠(shǔ)表(biǎo)皮(pí)真皮層(céng)組織
。表皮(pí)成纖維(wéi)細胞是(shì)真皮層的(dí)主(zhǔ)要功能細胞，具有合(hé)成和(hé)分(fēn)泌(mì)膠原蛋白(bái)，彈性(xìng)纖(xiān)維及細胞外(wài)基質的(dí)核(hé)心(xīn)功能(néng)，在(zài)維持皮(pí)膚(fū)結構完整(zhěng)性(xìng)，彈(dàn)性(xìng)與韌性(xìng)，以(yǐ)及(jí)皮膚損傷(shāng)修(xiū)復，創麵(miàn)愈(yù)合(hé)過程中(zhōng)發揮關(guān)鍵作用
。其通過(guò)調(tiáo)節(jié)細胞外(wài)基(jī)質(zhì)的合成(chéng)與重(zhòng)塑(sù)，參(cān)與皮(pí)膚的(dí)生理更新(xīn)與病理修(xiū)復(fù)，功能異常可(kě)能導致皮膚(fū)老化(huà)，瘢(bān)痕增生(shēng)，慢(màn)性(xìng)創麵(miàn)不愈等問題
。大(dà)鼠(shǔ)表(biǎo)皮成(chéng)纖維細(xì)胞(bāo)原(yuán)代培(péi)養2-3天後(hòu)開(kāi)始貼壁，初始形(xíng)態呈短(duǎn)梭形(xíng)或不規(guī)則(zé)形(xíng)；培(péi)養(yǎng)5-7天細胞逐(zhú)漸(jiàn)匯(huì)合，呈長(cháng)梭(suō)形(xíng)，螺旋狀或(huò)放射狀排(pái)列(liè)，細胞(bāo)形(xíng)態均一，胞漿豐(fēng)富；傳代後細胞(bāo)生(shēng)長(cháng)旺盛，3-4天即可匯(huì)合(hé)，且能穩(wěn)定維持(chí)成(chéng)纖維(wéi)細胞的典型(xíng)形(xíng)態學特(tè)征和生(shēng)理(lǐ)功能
。該細胞是(shì)研究皮膚生(shēng)理(lǐ)機製，皮(pí)膚損傷修復，瘢痕形成機(jī)製(zhì)及相關(guān)皮(pí)膚病發(fā)病(bìng)機製(zhì)的(dí)理(lǐ)想實驗(yàn)材(cái)料(liào)
。

自備(bèi)試劑：0.25%胰蛋白(bái)酶(méi)，膠原(yuán)酶(méi)Ⅰ型，PBS緩(huǎn)衝(chōng)液(yè)，完(wán)全(quán)培(péi)養(yǎng)基

培(péi)養(yǎng)基：大鼠表皮成纖(xiān)維(wéi)細(xì)胞(bāo)完(wán)全(quán)培(péi)養基（含FBS，成(chéng)纖維(wéi)細(xì)胞(bāo)生長因子，維生(shēng)素C，Penicillin，Streptomycin等(děng)）

換液(yè)頻(pín)率(shuài)：每2-3天換液(yè)一次(cì)

生(shēng)長特(tè)性：貼(tiē)壁生長

細胞形態(tài)：長梭(suō)形，短(duǎn)梭(suō)形

傳代比例(lì)：1:2-1:3

傳代特性：可(kě)穩定傳代8-10代；3-6代以內(nèi)細(xì)胞(bāo)狀態最(zuì)佳(jiā)，功能最穩定(dìng)

消化(huà)液：0.25%胰蛋白(bái)酶(méi)

大鼠表(biǎo)皮(pí)成纖維(wéi)細胞(bāo)體外培(péi)養周(zhōu)期有限(xiàn)；建議使(shǐ)用配(pèi)套(tào)的(dí)專用生(shēng)長培(péi)養(yǎng)基(jī)及(jí)正確的操(cāo)作方法來培養，以(yǐ)此保(bǎo)證(zhèng)該(gāi)細胞(bāo)的最佳(jiā)培(péi)養狀態(tài)
。

方(fāng)法(fǎ)簡(jiǎn)介(jiè)：實驗室(shì)采用胰蛋(dàn)白酶-膠原酶(méi)聯(lián)合(hé)消化(huà)法結合差速貼壁法製(zhì)備(bèi)該細胞，細(xì)胞(bāo)總量約為5×10⁵ cells/瓶(píng)
。

質量檢測：經成纖維細(xì)胞特(tè)異性標(biāo)誌(zhì)物（波(bō)形(xíng)蛋(dàn)白Vimentin）免疫熒光鑒定(dìng)，本(běn)細(xì)胞純(chún)度(dù)可(kě)達90%以上；經(jīng)檢(jiǎn)測不(bù)含有(yǒu)HIV-1，HBV，HCV，支原體，細菌，酵(jiào)母(mǔ)和真菌等外(wài)源汙染物，細(xì)胞活(huó)性(xìng)良好
。