大(dà)鼠肺動脈(mài)成(chéng)纖維細(xì)胞

大鼠(shǔ)肺(fèi)動脈成(chéng)纖維(wéi)細胞(bāo)分(fēn)離自肺動(dòng)脈(mài)組織；肺動脈(mài)亦稱肺(fèi)動脈幹(gān)。在呼吸(xī)空氣的脊(jǐ)椎(zhuī)動(dòng)物中，把靜(jìng)脈血由心髒導向(xiàng)肺(fèi)髒的動(dòng)脈。肺大動脈起於(yú)右心室(shì)，在主動脈之前向(xiàng)左上後(hòu)方(fāng)斜(xié)行，在主動脈(mài)弓下方分為左，右肺動(dòng)脈，經肺門入肺。肺(fèi)動脈幹位於心(xīn)包內(nèi)，為一粗(cū)短的動(dòng)脈幹。起(qǐ)自(zì)右心(xīn)室(shì)，在升主(zhǔ)動脈前方(fāng)向左(zuǒ)後上方斜(xié)行(háng)，至主動脈弓(gōng)下(xià)方分為左，右(yòu)肺動脈(mài)。左肺動脈(mài)較(jiào)短(duǎn)，在(zài)左主支氣管前方橫行，分二支進(jìn)入左肺上，下葉。右(yòu)肺(fèi)動(dòng)脈較長而粗(cū)，經(jīng)升主(zhǔ)動(dòng)脈(mài)和上腔(qiāng)靜脈後方(fāng)向右橫行(háng)，至(zhì)右(yòu)肺門處分為(wéi)三支進(jìn)入(rù)右肺上，中(zhōng)，下(xià)葉。成纖維細胞（Fibroblast）是(shì)疏(shū)鬆(sōng)結締(dì)組織(zhī)的主要(yào)細胞成(chéng)分，由胚(pēi)胎(tāi)時期(qī)的間充(chōng)質細(xì)胞分(fēn)化(huà)而(ér)來(lái)；成(chéng)纖(xiān)維(wéi)細胞較大(dà)，輪廓清楚(chǔ)，多(duō)為突起的(dí)紡(fǎng)錘形或星(xīng)形的(dí)扁平(píng)狀結(jié)構(gòu)，其細胞(bāo)核(hé)呈(chéng)規則的(dí)卵(luǎn)圓(yuán)形，核仁大(dà)而明(míng)顯。成(chéng)纖(xiān)維(wéi)細胞(bāo)功能(néng)活動(dòng)旺盛(shèng)，細胞質嗜弱鹼性，具(jù)明顯(xiǎn)的蛋(dàn)白質(zhì)合成(chéng)和分泌活動，在一定條件下，它可以(yǐ)實(shí)現跟(gēn)纖維細胞的(dí)互(hù)相轉(zhuǎn)化；成(chéng)纖(xiān)維細胞對(duì)不同(tóng)程(chéng)度的細(xì)胞(bāo)變性，壞死和組織缺損的修(xiū)復有著十分重(zhòng)要的(dí)作(zuò)用。剛(gāng)分(fēn)離的肺動脈成纖維細(xì)胞(bāo)呈(chéng)圓(yuán)形，折(zhē)光(guāng)性(xìng)良好，懸(xuán)浮於培(péi)養基中(zhōng)。30 min細胞貼(tiē)壁，其(qí)中(zhōng)部分開始伸出(chū)偽(wěi)足(zú)，表(biǎo)現為(wéi)小(xiǎo)的(dí)突起；6 h後細(xì)胞基(jī)本貼(tiē)壁完(wán)全，伸(shēn)展成(chéng)梭形，胞核清(qīng)晰，分布較(jiào)均匀，散(sàn)在(zài)生(shēng)長(cháng)，不聚集成(chéng)團(tuán)；細胞生長(cháng)迅(xùn)速，5-7天即(jí)呈(chéng)融合狀(zhuàng)態(tài)，細(xì)胞排(pái)列(liè)緊(jǐn)密，有的(dí)交叉重疊生長，平坦(tǎn)，胞(bāo)體較大，細(xì)胞(bāo)質透明(míng)，細(xì)胞核(hé)較大，呈(chéng)橢(tuǒ)圓形(xíng)，顏色淡。細胞(bāo)融合，並(bìng)彼此連(lián)接成(chéng)網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡(fǎng)錘(chuí)形(xíng)或星形(xíng)的(dí)扁平分布。肺動脈(mài)成(chéng)纖(xiān)維細(xì)胞(bāo)在(zài)生理條(tiáo)件(jiàn)下的主要(yào)功能包括(kuò)構造和維持肺動脈的正(zhèng)常(cháng)形態(tài)；合成和(hé)釋(shì)放細胞外基(jī)質；組(zǔ)織(zhī)損傷(shāng)後及時(shí)大量(liáng)聚(jù)集(jí)修(xiū)復(fù)損傷組(zǔ)織(zhī)。

培(péi)養基： 大鼠肺動(dòng)脈成纖(xiān)維細胞完全(quán)培養(yǎng)基(含FBS，生長添(tiān)加(jiā)劑(jì)，Penicillin，Streptomycin等)

換(huàn)液(yè)頻(pín)率： 每(měi)2-3天(tiān)換液一次(cì)

生長特性： 貼(tiē)壁

細胞形態(tài)： 成纖(xiān)維細胞樣(yàng)

傳代(dài)比例： 1:2

傳代特性(xìng)： 可(kě)傳5代左(zuǒ)右(yòu)；3代以(yǐ)內狀(zhuàng)態最佳

消(xiāo)化(huà)液： 0.25%胰(yí)蛋白酶(méi)

大(dà)鼠(shǔ)肺(fèi)動(dòng)脈(mài)成纖維細胞(bāo)體外培(péi)養(yǎng)周(zhōu)期有限(xiàn)；建議(yì)使(shǐ)用(yòng)配(pèi)套的專(zhuān)用(yòng)生長培(péi)養基及正確(què)的(dí)操作(zuò)方法(fǎ)來培養(yǎng)，以此(cǐ)保(bǎo)證(zhèng)該(gāi)細胞的(dí)最(zuì)佳培(péi)養狀(zhuàng)態(tài)。

方法(fǎ)簡介(jiè) 實驗室(shì)分離的大鼠肺動(dòng)脈成纖(xiān)維(wéi)細胞(bāo)采用胰蛋白酶-膠(jiāo)原(yuán)酶(méi)混合消(xiāo)化法結(jié)合(hé)差速貼壁法(fǎ)製備(bèi)而來，細(xì)胞總(zǒng)量約為5×10⁵ cells/瓶(píng)。

質量檢測 實驗室(shì)分(fēn)離的大鼠(shǔ)肺(fèi)動(dòng)脈(mài)成纖維細胞經(jīng)Vimentin免(miǎn)疫熒光鑒定，純(chún)度(dù)可(kě)達90%以上，且不含(hán)有(yǒu)HIV-1，HBV，HCV，支(zhī)原(yuán)體(tǐ)，細菌，酵(jiào)母(mǔ)和(hé)真(zhēn)菌等。