大鼠肝竇(dòu)內皮細(xì)胞

大鼠(shǔ)肝(gān)竇(dòu)內(nèi)皮細(xì)胞細胞分離(lí)自肝髒組織
；肝(gān)髒(zàng)是(shì)身(shēn)體(tǐ)內以(yǐ)代謝功(gōng)能(néng)為(wéi)主(zhǔ)的(dí)一個(gè)器官(guān)，並在身體(tǐ)裏(lǐ)麵起著去(qù)氧(yǎng)化，儲存肝(gān)糖，分泌性蛋白質的合成(chéng)等作用(yòng)
；肝(gān)髒也(yě)製造消(xiāo)化係統中之膽(dǎn)汁。肝(gān)髒是(shì)機體(tǐ)內髒(zàng)裏最大的器官，位於(yú)機(jī)體中的腹部位(wèi)置(zhì)，在(zài)右(yòu)側橫隔(gé)膜(mó)之下，位於膽囊之(zhī)前端且於(yú)右邊腎髒的前方(fāng)，胃(wèi)的(dí)上方(fāng)。肝髒是機(jī)體消化係統(tǒng)中最(zuì)大的消化腺，為一(yī)紅(hóng)棕(zōng)色的(dí)V字(zì)形器(qì)官。肝髒是(shì)尿素合(hé)成的主要(yào)器官(guān)，又(yòu)是新(xīn)陳(chén)代謝的重(zhòng)要(yào)器(qì)官(guān)。肝(gān)髒在(zài)機(jī)體(tǐ)位(wèi)置和(hé)形(xíng)態結(jié)構肝髒(zàng)位(wèi)於(yú)右(yòu)上腹(fù)，隱藏在右側膈下(xià)和(hé)肋骨深(shēn)麵(miàn)，大(dà)部(bù)分肝為(wéi)肋弓(gōng)所(suǒ)復蓋(gài)，僅在腹(fù)上(shàng)區(qū)，右(yòu)肋(lèi)弓(gōng)間露出(chū)並直(zhí)接(jiē)接(jiē)觸腹前壁，肝上(shàng)麵(miàn)則與(yǔ)膈及(jí)腹(fù)前壁相(xiāng)接。肝(gān)竇內皮細胞（SEC）是(shì)肝髒(zàng)內(nèi)所(suǒ)占比(bǐ)例(lì)最(zuì)高(gāo)的非(fēi)實質細胞，位於(yú)肝竇(dòu)腔與肝(gān)細胞之間，具有物(wù)質轉運，吞噬(shì)，抗原提呈，免(miǎn)疫耐受(shòu)等(děng)功能(néng)。SEC由於擁有一般細(xì)胞所沒有的窗孔結構，細胞間連結鬆(sōng)散(sàn)，內皮下缺(quē)少基底膜而(ér)使其(qí)具有高(gāo)度通透性，從而達(dá)到(dào)快速(sù)交換各種大小分(fēn)子的(dí)目的。肝(gān)在遭(zāo)到多種病原侵襲時，肝竇(dòu)內皮細(xì)胞窗(chuāng)孔(kǒng)逐(zhú)漸減(jiǎn)少或消失，內皮下基膜形成，產(chǎn)生(shēng)類似於連續型(xíng)毛(máo)細血管(guǎn)的結(jié)構(gòu)，這一過(guò)程(chéng)稱為肝(gān)竇毛細(xì)血管(guǎn)化。它由多種因素(sù)引(yǐn)起，其過程(chéng)極復雜(zá)，在(zài)多(duō)種肝(gān)病的發(fā)病(bìng)前期階段均(jūn)有(yǒu)出現，近年(nián)來受到廣泛關注(zhù)。

自(zì)備試(shì)劑(jì)： 0.25%胰蛋(dàn)白酶  ，多聚-L-賴(lài)氨酸溶(róng)液（1×）或多聚-L-賴氨酸(suān)溶(róng)液(yè)（10×）或(huò)明(míng)膠(jiāo)包(bāo)被液（1 mg/mL）  ，PBS  ，完全培養(yǎng)基

包被條件： PLL（0.1 mg/mL）或明膠(jiāo)（0.1%）

培(péi)養基： 大鼠(shǔ)肝竇(dòu)內皮細(xì)胞完全(quán)培(péi)養(yǎng)基(含FBS，生長添加(jiā)劑，Penicillin，Streptomycin等)

換(huàn)液頻率： 每(měi)2-3天換(huàn)液一(yī)次

生(shēng)長特(tè)性： 貼(tiē)壁生長

細胞形(xíng)態： 內皮(pí)細(xì)胞樣(yàng)

傳代(dài)比例： 1:2

傳代特(tè)性(xìng)： 可傳(chuán)1-2代

消(xiāo)化液： 0.25%胰(yí)蛋白酶(méi)

大鼠肝(gān)竇內皮(pí)細胞體外培養周期有限(xiàn)
；建議使用配套(tào)的(dí)專(zhuān)用(yòng)生長(cháng)培(péi)養(yǎng)基(jī)及正(zhèng)確(què)的(dí)操(cāo)作方(fāng)法來培養(yǎng)，以(yǐ)此(cǐ)保(bǎo)證該細(xì)胞(bāo)的最佳(jiā)培(péi)養狀態(tài)。

方法簡介(jiè) 實驗室分離(lí)的(dí)大鼠肝竇內皮細(xì)胞(bāo)采(cǎi)用(yòng)混(hùn)合酶(méi)灌(guàn)流消(xiāo)化(huà)，反復(fù)低速離(lí)心(xīn)，密度梯(tī)度離心(xīn)法，並通過內皮細胞專用(yòng)培養基(jī)培養篩選製(zhì)備而來，細胞(bāo)總(zǒng)量約為5×10⁵ cells/瓶(píng)。

質量檢(jiǎn)測 實驗室分(fēn)離的(dí)大(dà)鼠肝(gān)竇內皮(pí)細(xì)胞經CD31或CD14免疫熒(yíng)光鑒定，純(chún)度可(kě)達90%以上(shàng)，且不含(hán)有HIV-1，HBV，HCV，支原體，細菌，酵母(mǔ)和真菌(jūn)等。