大(dà)鼠(shǔ)口腔(qiāng)黏膜成(chéng)纖(xiān)維(wéi)細胞

大鼠(shǔ)口(kǒu)腔黏膜(mó)成(chéng)纖維細胞分離(lí)自口(kǒu)腔黏膜(mó)組(zǔ)織；口腔（oral cavity）是(shì)消化道的起始(shǐ)部分(fēn)。前(qián)借(jiè)口(kǒu)裂與(yǔ)外(wài)界(jiè)相通，後(hòu)經(jīng)咽峽與咽(yān)相(xiāng)續。口腔內(nèi)有牙，舌(shé)等(děng)器(qì)官(guān)。口(kǒu)腔的前壁為唇(chún)，側壁(bì)為頰(jiá)，頂為齶，口腔底(dǐ)為黏膜和肌等結構。口(kǒu)腔借上，下牙(yá)弓(gōng)分為前外(wài)側(cè)部的(dí)口腔前庭（oral vestibule）和(hé)後內側部(bù)的固(gù)有(yǒu)口腔（oral cavity proper）；當上，下(xià)頜牙咬合時，口腔前庭與(yǔ)固有(yǒu)口腔之間可(kě)借第三(sān)磨牙後方的間(jiān)隙相通。成(chéng)纖維細胞（Fibroblast）是疏(shū)鬆(sōng)結締組織的(dí)主要細(xì)胞成分，由胚(pēi)胎時期(qī)的間(jiān)充(chōng)質(zhì)細(xì)胞分化而(ér)來。成纖(xiān)維細胞(bāo)較(jiào)大，輪廓(kuò)清楚(chǔ)，多(duō)為(wéi)突起(qǐ)的(dí)紡錘(chuí)形(xíng)或(huò)星(xīng)形的(dí)扁平(píng)狀(zhuàng)結構，其(qí)細胞核呈規則(zé)的卵(luǎn)圓形(xíng)，核(hé)仁大而(ér)明顯。成(chéng)纖維細胞(bāo)功(gōng)能(néng)活動旺盛(shèng)，細胞(bāo)質(zhì)嗜(shì)弱鹼性，具(jù)明顯(xiǎn)的蛋(dàn)白質(zhì)合成(chéng)和(hé)分泌活(huó)動(dòng)，在(zài)一定條(tiáo)件下(xià)，它(tā)可以實現跟(gēn)纖(xiān)維(wéi)細胞(bāo)的(dí)互相(xiāng)轉化；成纖(xiān)維(wéi)細胞對不(bù)同(tóng)程(chéng)度的細胞(bāo)變(biàn)性，壞死(sǐ)和組(zǔ)織(zhī)缺損(sǔn)的(dí)修復有(yǒu)著(zhuó)十分重要的(dí)作(zuò)用。剛分(fēn)離的(dí)表皮成纖(xiān)維(wéi)細胞呈圓形，折光性(xìng)良(liáng)好，懸(xuán)浮於培(péi)養(yǎng)基中(zhōng)。30 min細(xì)胞貼壁(bì)，其(qí)中(zhōng)部分開(kāi)始伸出(chū)偽(wěi)足(zú)，表(biǎo)現為小的突起；6 h後細胞基(jī)本貼壁完(wán)全(quán)，伸展成梭形，胞核(hé)清(qīng)晰，分布(bù)較均匀，散(sàn)在生長，不(bù)聚(jù)集成團；細胞生長(cháng)迅(xùn)速(sù)，5-7天(tiān)即呈融(róng)合狀態，細胞(bāo)排(pái)列緊密(mì)，有的(dí)交叉重疊生長，平坦，胞體較(jiào)大(dà)，細胞(bāo)質透明，細胞(bāo)核(hé)較(jiào)大，呈橢(tuǒ)圓形，顏(yán)色淡。細胞融(róng)合(hé)，並(bìng)彼此連接成網狀；細胞呈突起(qǐ)的紡錘(chuí)形或(huò)星(xīng)形的扁平分布。

自備(bèi)試劑(jì)： 0.25%胰(yí)蛋(dàn)白酶  ，PBS  ，完全培養基

培養基(jī)： 大鼠口腔黏(nián)膜成纖維細(xì)胞(bāo)完全(quán)培(péi)養基(含FBS，生(shēng)長(cháng)添(tiān)加劑(jì)，Penicillin，Streptomycin等(děng))

換液(yè)頻率： 每(měi)2-3天(tiān)換液一次

生(shēng)長特性(xìng)： 貼(tiē)壁

細(xì)胞形態： 成纖維(wéi)細(xì)胞(bāo)樣

傳(chuán)代(dài)比(bǐ)例(lì)： 1:2

傳代特性(xìng)： 可傳3代左(zuǒ)右

消(xiāo)化液： 0.25%胰蛋(dàn)白酶

大鼠口(kǒu)腔黏膜(mó)成纖維細(xì)胞(bāo)體(tǐ)外(wài)培養周期(qī)有(yǒu)限(xiàn)；建議使用(yòng)配套(tào)的(dí)專用(yòng)生長培養(yǎng)基及(jí)正確(què)的操(cāo)作(zuò)方(fāng)法來培養，以(yǐ)此保證(zhèng)該細胞(bāo)的最佳培(péi)養(yǎng)狀(zhuàng)態。

方(fāng)法簡介 實(shí)驗室(shì)分離的(dí)大(dà)鼠口腔黏(nián)膜(mó)成纖維(wéi)細(xì)胞(bāo)采用胰(yí)蛋白酶-膠原酶(méi)混(hùn)合酶(méi)消化後(hòu)差速貼壁製(zhì)備而(ér)來，細(xì)胞(bāo)總(zǒng)量約為(wéi)5×10⁵ cells/瓶。

質(zhì)量檢(jiǎn)測 實(shí)驗(yàn)室(shì)分離的(dí)大鼠口(kǒu)腔黏膜成(chéng)纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免(miǎn)疫熒光(guāng)鑒(jiàn)定，純(chún)度可(kě)達90%以上(shàng)，且不含有HIV-1，HBV，HCV，支原(yuán)體，細菌，酵(jiào)母(mǔ)和真菌(jūn)等(děng)。