人呼吸道上皮細胞

人呼(hū)吸道(dào)上(shàng)皮細(xì)胞分離自呼(hū)吸道；呼吸(xī)道(dào)是(shì)肺呼吸(xī)時氣(qì)流(liú)所(suǒ)經過的通(tōng)道，有肺(fèi)脊(jǐ)椎(zhuī)動(dòng)物(wù)的呼吸(xī)道(dào)分(fēn)上(shàng)，下(xià)兩(liǎng)部(bù)鼻，咽和喉合稱上(shàng)呼吸道(dào)。氣(qì)管及(jí)其(qí)以後一分再(zài)分的(dí)管道(dào)，合稱為(wéi)下(xià)呼(hū)吸道(dào)，或稱為(wéi)氣管(guǎn)樹。氣管樹是(shì)隨著動物的(dí)進(jìn)化逐漸復雜(zá)化(huà)的(dí)。整個(gè)呼吸道內表麵(miàn)都(dū)分(fēn)布有分(fēn)泌液和纖毛(máo)（鼻孔(kǒng)，咽後壁和(hé)聲帶(dài)黏(nián)膜(mó)除外），它(tā)能溫暖(nuǎn)（或冷卻(què)），濕(shī)潤(rùn)和(hé)淨(jìng)化吸入的(dí)空(kōng)氣，對(duì)於呼吸器官(guān)和機體(tǐ)有(yǒu)著保護作用(yòng)。呼吸(xī)道以(yǐ)骨或軟骨(gǔ)做(zuò)支(zhī)架，其內表麵(miàn)覆蓋(gài)著黏膜，黏膜內(nèi)分布(bù)著(zhuó)豐(fēng)富(fù)的(dí)毛(máo)細血管。呼(hū)吸道上(shàng)皮(pí)細胞屬於(yú)假(jiǎ)復(fù)層(céng)纖(xiān)毛柱(zhù)狀上(shàng)皮，分布(bù)於(yú)呼(hū)吸道的內(nèi)表(biǎo)麵，主要由柱狀(zhuàng)，杯形，梭形和錐(zhuī)形(xíng)等不同形(xíng)狀(zhuàng)細胞組成(chéng)。看上去像復層上皮，但實際上所有細(xì)胞底(dǐ)部(bù)均附(fù)於基膜上，屬(shǔ)單(dān)層(céng)上皮，故(gù)稱假(jiǎ)復(fù)層柱狀上皮(pí)，上皮(pí)表(biǎo)麵(miàn)有纖(xiān)毛，杯(bēi)狀細(xì)胞(bāo)可分(fēn)泌粘液，包裹著大量(liáng)細(xì)菌(jūn)，借助(zhù)纖(xiān)毛不斷(duàn)擺(bǎi)動將其(qí)慢(màn)慢移動(dòng)至(zhì)出(chū)消(xiāo)化道。

自(zì)備試(shì)劑(jì)： 0.25%胰蛋(dàn)白酶  ，鼠尾膠原蛋(dàn)白Ⅰ型(xíng)（1×）或鼠(shǔ)尾膠(jiāo)原蛋白Ⅰ型(xíng)（1 mg/mL）  ，PBS  ，完全培(péi)養基

包被條件： 鼠尾膠(jiāo)原(yuán)Ⅰ（2-5 μg/cm²）

培養(yǎng)基： 人(rén)呼(hū)吸(xī)道(dào)上(shàng)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基(含FBS，生長添加劑(jì)，Penicillin，Streptomycin等)

換液(yè)頻(pín)率： 每2-3天換液一次

生長(cháng)特性： 貼壁

細胞形態： 上皮細胞樣

傳(chuán)代比例(lì)： 1:2

傳代特(tè)性： 可傳2-3代(dài)

消化液： 0.25%胰蛋白酶(méi)

人(rén)呼吸(xī)道上皮(pí)細(xì)胞(bāo)體外(wài)培(péi)養周(zhōu)期(qī)有限(xiàn)；建議使用配(pèi)套(tào)的專用生長(cháng)培養基及(jí)正確(què)的(dí)操作(zuò)方(fāng)法(fǎ)來培養，以此保證該(gāi)細(xì)胞(bāo)的(dí)最(zuì)佳(jiā)培養狀(zhuàng)態(tài)。

方(fāng)法(fǎ)簡(jiǎn)介 實驗室分(fēn)離的(dí)人呼(hū)吸(xī)道(dào)上皮(pí)細胞采(cǎi)用胰蛋白(bái)酶(méi)-膠(jiāo)原(yuán)酶混(hùn)合(hé)消(xiāo)化(huà)法(fǎ)結合差速(sù)貼(tiē)壁法(fǎ)，並(bìng)通過上皮(pí)細胞(bāo)專(zhuān)用培(péi)養基(jī)培養篩選製備(bèi)而(ér)來(lái)，細胞(bāo)總量約(yuē)為5×10⁵ cells/瓶(píng)。

質(zhì)量(liáng)檢(jiǎn)測(cè) 實驗室分(fēn)離的人呼吸(xī)道上皮細胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒(jiàn)定，純(chún)度(dù)可(kě)達(dá)90%以上，且(qiě)不含有(yǒu)HIV-1，HBV，HCV，支原(yuán)體，細(xì)菌，酵母(mǔ)和(hé)真菌等。