人甲(jiǎ)狀腺(xiàn)成纖維(wéi)細胞(bāo)

人甲(jiǎ)狀腺成纖(xiān)維細(xì)胞(bāo)分離(lí)自(zì)人(rén)甲狀(zhuàng)腺(xiàn)間質組織(zhī)，是甲狀(zhuàng)腺間質(zhì)的主要功能(néng)細胞。核心功能為合(hé)成和分泌膠(jiāo)原(yuán)蛋白(bái)，彈性纖(xiān)維(wéi)等細胞外(wài)基質(zhì)，構建(jiàn)甲狀(zhuàng)腺的(dí)結構支架，維(wéi)持甲狀腺(xiàn)的(dí)形(xíng)態穩定；同時(shí)分(fēn)泌多種(zhǒng)細胞因(yīn)子(zǐ)和生(shēng)長因子，調(tiáo)控甲狀腺濾泡上皮(pí)細(xì)胞的生(shēng)長，分(fēn)化，參與(yǔ)甲(jiǎ)狀(zhuàng)腺局(jú)部(bù)微(wēi)環境的穩態維持(chí)，對甲狀腺激素(sù)合(hé)成(chéng)與分(fēn)泌的調控具有(yǒu)輔助(zhù)作用(yòng)。功(gōng)能(néng)異(yì)常與甲狀(zhuàng)腺炎，甲狀腺纖(xiān)維(wéi)化(huà)，甲狀(zhuàng)腺腫瘤等(děng)甲狀腺疾病(bìng)的(dí)發(fā)生(shēng)發展密切相(xiāng)關。原(yuán)代培(péi)養2-3天後開始(shǐ)貼壁(bì)，初始形態(tài)呈(chéng)短梭形(xíng)或不(bù)規(guī)則(zé)形；培(péi)養5-7天逐漸(jiàn)匯(huì)合，呈長梭(suō)形(xíng)，排(pái)列成(chéng)旋(xuán)渦(wō)狀(zhuàng)；傳代(dài)後細(xì)胞(bāo)生(shēng)長(cháng)旺(wàng)盛(shèng)，可(kě)穩定(dìng)維持成纖(xiān)維(wéi)細(xì)胞的典型形態(tài)及功能(néng)。是(shì)研究甲(jiǎ)狀(zhuàng)腺生理(lǐ)功能，甲(jiǎ)狀(zhuàng)腺疾病(bìng)發(fā)病機製的(dí)重要實(shí)驗材料(liào)。

自(zì)備(bèi)試劑：0.25%胰(yí)蛋(dàn)白(bái)酶，膠(jiāo)原酶(méi)Ⅰ型，PBS緩衝液，完全(quán)培(péi)養(yǎng)基(jī)

培養基：人甲狀(zhuàng)腺成(chéng)纖(xiān)維細胞完(wán)全培養基(jī)（含FBS，成(chéng)纖維(wéi)細胞生長因(yīn)子(zǐ)，維(wéi)生素C，促甲狀腺激素(sù)，Penicillin，Streptomycin等）

換(huàn)液頻(pín)率：每2-3天(tiān)換液一次(cì)

生長(cháng)特(tè)性：貼壁生(shēng)長(cháng)

細胞形(xíng)態(tài)：短梭(suō)形(xíng)，長(cháng)梭形(xíng)，匯(huì)合(hé)後(hòu)呈旋渦(wō)狀排(pái)列(liè)

傳代(dài)比(bǐ)例：1:2-1:3

傳代(dài)特(tè)性：可傳(chuán)6-8代；3-5代以(yǐ)內(nèi)細(xì)胞狀態(tài)最佳，功能最(zuì)穩(wěn)定

消化(huà)液：0.25%胰蛋白酶(méi)

人(rén)甲狀腺成纖維細胞體外培養(yǎng)周期有限(xiàn)；建(jiàn)議(yì)使用(yòng)配套(tào)的專用生長培養基及(jí)正(zhèng)確(què)的(dí)操作方法來培養，以此(cǐ)保(bǎo)證(zhèng)該(gāi)細(xì)胞的最(zuì)佳(jiā)培養(yǎng)狀態。

方法簡(jiǎn)介：實驗室采用(yòng)胰(yí)蛋白酶-膠(jiāo)原酶(méi)聯合消化(huà)法結(jié)合差(chà)速貼壁法製備(bèi)該細(xì)胞(bāo)，細胞總(zǒng)量(liáng)約為5×10⁵ cells/瓶。

質量(liáng)檢(jiǎn)測(cè)：經(jīng)成纖(xiān)維細(xì)胞特異(yì)性(xìng)標(biāo)誌物（波形蛋(dàn)白Vimentin，FSP1，α-SMA）免疫熒光(guāng)鑒定，本細胞純(chún)度(dù)可達90%以(yǐ)上(shàng)；經(jīng)細(xì)胞外基質(zhì)分泌檢測驗(yàn)證(zhèng)細胞(bāo)功(gōng)能(néng)正(zhèng)常；經(jīng)檢測不含(hán)有(yǒu)HIV-1，HBV，HCV，支(zhī)原體(tǐ)，細(xì)菌(jūn)，酵母和真(zhēn)菌(jūn)等(děng)外源汙染物，細胞(bāo)活(huó)性(xìng)達(dá)標。