人(rén)少突(tū)膠質(zhì)細胞(bāo)

人少突膠質細(xì)胞分(fēn)離(lí)自(zì)人腦組織，是中(zhōng)樞(shū)神經係統的(dí)主(zhǔ)要(yào)膠質(zhì)細(xì)胞之一(yī)。核心功能(néng)為包裹(guǒ)神經元軸(zhóu)突(tū)形成(chéng)髓鞘(qiào)，絕(jué)緣並保護軸(zhóu)突，提(tí)高(gāo)神經信號傳導速度(dù)；同時分泌神經營(yíng)養因子(zǐ)，支持(chí)神經元的生長(cháng)和存活，維持中樞神經(jīng)係統(tǒng)的穩(wěn)態(tài)。功能(néng)異(yì)常(cháng)與多(duō)發(fā)性硬(yìng)化症，腦(nǎo)白(bái)質營養(yǎng)不(bù)良(liáng)，腦梗死等(děng)神(shén)經係統(tǒng)疾病密(mì)切相(xiāng)關。原代(dài)培養4-5天(tiān)後(hòu)開始(shǐ)貼(tiē)壁，初始(shǐ)形態(tài)呈(chéng)圓(yuán)形(xíng)或橢(tuǒ)圓形(xíng)；培(péi)養(yǎng)1-2周逐漸(jiàn)分(fēn)化成(chéng)熟，形態呈分枝狀(zhuàng)，可包(bāo)裹(guǒ)軸突(tū)；傳(chuán)代後(hòu)細(xì)胞可(kě)穩(wěn)定維持(chí)少(shǎo)突膠質細胞(bāo)的典(diǎn)型(xíng)形(xíng)態及(jí)髓(suǐ)鞘形成功(gōng)能(néng)。是(shì)研(yán)究中樞神經(jīng)係統(tǒng)髓(suǐ)鞘形成機(jī)製(zhì)，脫髓鞘(qiào)疾病(bìng)發病機製及神經修復藥物篩選的(dí)重要實驗材料。

自(zì)備試(shì)劑：0.25%胰蛋白酶(méi)-EDTA消(xiāo)化液，PBS緩衝液，完全培養(yǎng)基，Percoll分(fēn)離液，免(miǎn)疫磁(cí)珠分(fēn)選(xuǎn)試劑(jì)
培養(yǎng)基：人(rén)少突(tū)膠質細胞完(wán)全培(péi)養(yǎng)基(jī)（含FBS，神經(jīng)營(yíng)養因子，甲(jiǎ)狀腺(xiàn)激(jī)素，Penicillin，Streptomycin等）
換液頻(pín)率：每2-3天(tiān)換液(yè)一(yī)次
生長(cháng)特性：貼(tiē)壁生(shēng)長(cháng)，可與神(shén)經元(yuán)共培養
細(xì)胞(bāo)形態：圓形(xíng)，橢圓(yuán)形(xíng)，成(chéng)熟後呈分枝狀(zhuàng)
傳代比例：1:2（溫和傳代）
傳(chuán)代特性：可傳(chuán)2-3代；1-2代(dài)以(yǐ)內細胞功(gōng)能(néng)最(zuì)穩(wěn)定
消化(huà)液：0.25%胰蛋(dàn)白酶(méi)-EDTA消(xiāo)化液（低(dī)溫(wēn)溫和(hé)消(xiāo)化(huà)）
人(rén)少突(tū)膠質細(xì)胞體(tǐ)外培養周期有(yǒu)限(xiàn)；建(jiàn)議(yì)使用配套(tào)的專用生長培養(yǎng)基(jī)及正(zhèng)確的(dí)操作(zuò)方(fāng)法(fǎ)來(lái)培養，以(yǐ)此保(bǎo)證(zhèng)該(gāi)細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡介：實(shí)驗室(shì)采用(yòng)胰(yí)蛋(dàn)白(bái)酶(méi)-EDTA聯(lián)合消化(huà)法結合(hé)密度(dù)梯(tī)度離心法(fǎ)及免疫磁珠(zhū)分選(xuǎn)法（基(jī)於(yú)O4標誌(zhì)物）製備該(gāi)細胞(bāo)，細(xì)胞(bāo)總(zǒng)量(liáng)約為5×10⁵ cells/瓶。

質(zhì)量(liáng)檢(jiǎn)測：經少(shǎo)突膠(jiāo)質細胞特異性(xìng)標誌(zhì)物(wù)（O4，O1，MBP，PLP）免(miǎn)疫熒(yíng)光鑒(jiàn)定，本(běn)細胞(bāo)純度可(kě)達90%以(yǐ)上；經(jīng)髓鞘形成(chéng)實驗驗證細(xì)胞(bāo)功(gōng)能正常(cháng)；經檢(jiǎn)測不含有HIV-1，HBV，HCV，支原(yuán)體(tǐ)，細菌，酵(jiào)母和真(zhēn)菌(jūn)等外源(yuán)汙染物，細(xì)胞活(huó)性(xìng)達(dá)標。