人食(shí)管(guǎn)平滑肌(jī)細(xì)胞(bāo)

人(rén)食(shí)管平(píng)滑(huá)肌(jī)細(xì)胞分(fēn)離(lí)自(zì)食(shí)管(guǎn)組織(zhī)；食管(guǎn)可分(fēn)為(wéi)頸段
，胸段(duàn)和腹(fù)段，脊(jǐ)椎(zhuī)動物食(shí)管(guǎn)的頸段位(wèi)於氣管背後(hòu)和(hé)脊柱前(qián)端，胸段(duàn)位於左
，右肺之(zhī)間(jiān)的(dí)縱膈內，胸段通過膈孔(kǒng)與腹(fù)腔內腹相(xiāng)連，腹(fù)段很短與(yǔ)胃相(xiāng)連。哺乳動(dòng)物的食管(guǎn)結(jié)構上由內向外分(fēn)四(sì)層黏(nián)膜層
，黏膜(mó)下層
，肌層和外膜(mó)。其(qí)中，肌(jī)層上(shàng)1/3段(duàn)為骨骼(gé)肌(jī)，下1/3為(wéi)平(píng)滑肌，中(zhōng)段(duàn)為骨骼肌(jī)和(hé)平滑肌混合組成。其(qí)中，肌纖維的排列(liè)方式分為內環(huán)形和外(wài)縱形兩(liǎng)層。食(shí)管的(dí)蠕(rú)動(dòng)是(shì)由食(shí)管平滑(huá)肌收縮嚴格控(kòng)製，食管還有括約肌，位於(yú)環狀(zhuàng)軟骨水平(píng)的，稱為(wéi)食管上(shàng)括約(yuē)肌；位於(yú)食管(guǎn)下端，一部分(fēn)在膈上，穿過膈孔，另一部分(fēn)在(zài)膈下的高(gāo)壓(yā)帶，稱為食管(guǎn)下括(kuò)約肌。食(shí)管平(píng)滑肌細(xì)胞(bāo)原代(dài)分離(lí)培養3天後，可見(jiàn)細(xì)胞(bāo)貼(tiē)壁伸(shēn)展(zhǎn)，細胞形態(tài)大(dà)小不(bù)一，呈梭形(xíng)
，不(bù)規則形(xíng)
，三(sān)角(jiǎo)形或(huò)扇形(xíng)，核(hé)卵圓(yuán)形(xíng)
，居中；2周(zhōu)後(hòu)細胞匯(huì)合(hé)，多(duō)數細(xì)胞(bāo)伸(shēn)展(zhǎn)呈長梭(suō)形，胞漿(jiāng)豐(fēng)富，有分枝狀突(tū)起，細胞平行排列(liè)成單層(céng)或部(bù)分區域多層重疊生長(cháng)，高低(dī)起伏；細胞(bāo)密(mì)度(dù)低(dī)時(shí)，常(cháng)交織(zhī)成網狀(zhuàng)；密度(dù)高(gāo)時，則排列為(wéi)旋(xuán)渦(wō)狀(zhuàng)或柵欄(lán)狀。傳代(dài)後細胞生長(cháng)較(jiào)快，4-6天即可匯合，並保(bǎo)持(chí)上(shàng)述形(xíng)態學特(tè)征(zhēng)和生(shēng)長(cháng)特(tè)點。

自(zì)備(bèi)試(shì)劑： 0.25%胰蛋白酶(méi)  
，PBS  
，完全培養(yǎng)基(jī)

培養基(jī)： 人(rén)食管平(píng)滑肌細胞完全培(péi)養(yǎng)基(含FBS
，生長(cháng)添(tiān)加劑
，Penicillin
，Streptomycin等(děng))

換液(yè)頻率： 每(měi)2-3天換液一次(cì)

生(shēng)長特(tè)性(xìng)： 貼(tiē)壁

細(xì)胞形(xíng)態： 成(chéng)纖維細胞樣

傳代比例： 1:2

傳(chuán)代(dài)特性： 可(kě)傳5代(dài)左(zuǒ)右；3代以內(nèi)狀態(tài)最(zuì)佳(jiā)

消(xiāo)化(huà)液： 0.25%胰(yí)蛋白(bái)酶(méi)

人食(shí)管(guǎn)平滑(huá)肌細(xì)胞體(tǐ)外培養周(zhōu)期有限；建(jiàn)議(yì)使用(yòng)配套(tào)的專用(yòng)生長(cháng)培養基及正確的操(cāo)作(zuò)方(fāng)法來培養(yǎng)，以此(cǐ)保(bǎo)證(zhèng)該細胞(bāo)的最佳(jiā)培養狀態。

方法簡(jiǎn)介(jiè) 實驗(yàn)室分(fēn)離(lí)的人食管平滑肌(jī)細胞(bāo)采用胰蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合(hé)差(chà)速貼壁(bì)法製備而來(lái)，細(xì)胞總(zǒng)量約(yuē)為(wéi)5×10⁵ cells/瓶。

質量檢測 實驗室(shì)分離(lí)的(dí)人(rén)食管平(píng)滑(huá)肌細(xì)胞(bāo)經α-SMA免疫(yì)熒光(guāng)鑒定，純(chún)度(dù)可達90%以(yǐ)上，且不(bù)含有(yǒu)HIV-1
，HBV
，HCV
，支原(yuán)體
，細菌(jūn)
，酵母和(hé)真菌等(děng)。