人心肌成纖(xiān)維(wéi)細胞

人(rén)心肌成纖(xiān)維細胞分(fēn)離自心髒組(zǔ)織(zhī)；心(xīn)髒由心肌(jī)細胞和非心肌(jī)細(xì)胞(bāo)組成，非心(xīn)肌細(xì)胞(bāo)占細胞總(zǒng)數(shù)量(liáng)的約70%，其(qí)中約90%以上(shàng)的非心(xīn)肌(jī)細(xì)胞(bāo)由(yóu)心肌成纖(xiān)維細(xì)胞組(zǔ)成，在(zài)不(bù)同物種（如小鼠，大鼠和(hé)人(rén)類(lèi)）中可能(néng)略有差異(yì)。“成纖維細胞(bāo)” 指一類存(cún)在於(yú)間質(zhì)中的異(yì)質性(xìng)高(gāo)遷移(yí)基質細(xì)胞(bāo)，其(qí)功能和表(biǎo)型具有組(zǔ)織(zhī)特異(yì)性。在心髒(zàng)中(zhōng)，心髒成纖(xiān)維細胞負責維持組織穩(wěn)態(tài)並(bìng)調(tiáo)控細(xì)胞(bāo)外(wài)基質（ECM）的(dí)更新。目前尚無完(wán)全(quán)特(tè)異(yì)性的(dí)心髒成纖維細胞分(fēn)子標(biāo)誌物(wù)，但這(zhè)類細胞通(tōng)常表達轉錄因(yīn)子(zǐ) 21（TCF21），波(bō)形蛋白（vimentin）及 CD90（或 Thy-1）。心肌(jī)成(chéng)纖維細(xì)胞(bāo)在生(shēng)物學特(tè)性(xìng)上與肝星(xīng)狀(zhuàng)細(xì)胞存(cún)在顯著(zhù)共性，二者(zhě)均以“靜息-激活”的功能(néng)狀(zhuàng)態(tài)轉換為(wéi)核(hé)心特征(zhēng)，且(qiě)狀態轉(zhuǎn)換(huàn)緊(jǐn)密關聯(lián)細胞的增殖活性與功能實現。當受到應(yīng)激或(huò)損傷(shāng)時，成纖(xiān)維細(xì)胞會(huì)失去正常(cháng)表型並活(huó)化(huà)成(chéng)為肌(jī)成(chéng)纖(xiān)維細胞。靜(jìng)息(xī)心(xīn)肌成纖維(wéi)細(xì)胞的細胞骨架中(zhōng)不含(hán) α- 平滑肌肌(jī)動蛋白(bái)（α-SMA）。與靜息成纖維(wéi)細(xì)胞(bāo)不同(tóng)，肌成(chéng)纖維細(xì)胞收縮(suō)能(néng)力強，其細胞(bāo)骨架(jià)排列(liè)特(tè)殊，含有α-SMA陽(yáng)性應(yīng)力(lì)纖維(wéi) ，成熟黏著(zhuó)斑，並(bìng)會增加骨(gǔ)膜蛋白（periostin）和(hé)纖維狀膠(jiāo)原(yuán)蛋(dàn)白的合(hé)成。有研究表明，在(zài)模(mó)擬天然(rán)組織(zhī)特(tè)性的(dí)彈性(xìng)表(biǎo)麵培養原代(dài)成纖維(wéi)細(xì)胞有助(zhù)於(yú)減輕(qīng)肌成纖維(wéi)細胞(bāo)的活化。對於(yú)心肌(jī)組(zǔ)織(zhī)而言，彈性模量(liáng)（E）約(yuē)為(wéi)7 kPa的(dí)培養表麵(miàn)模擬健康(kāng)組(zǔ)織(zhī)，而E>10 kPa的表(biǎo)麵則(zé)被(bèi)視為(wéi)纖(xiān)維化(huà)組織(zhī)。這構成(chéng)了(liǎo)一(yī)個(gè)顯(xiǎn)著(zhù)挑(tiāo)戰(zhàn)，因為傳統聚苯乙(yǐ)烯(xī)組織(zhī)培養板的硬(yìng)度要高得多(duō)，通常(cháng)可(kě)達E=3 GPa。此(cǐ)外(wài)，雖然(rán)傳(chuán)代原(yuán)代細胞(bāo)以提(tí)高培(péi)養群體均一(yī)性(xìng)是常規(guī)操作，但傳(chuán)代(dài)會(huì)進(jìn)一步驅動(dòng)肌成纖(xiān)維細(xì)胞活化。原代(dài)心(xīn)肌成纖維細胞(bāo)在(zài)傳統(tǒng)細胞(bāo)培(péi)養中接(jiē)種(zhǒng)數(shù)小(xiǎo)時(shí)內(nèi)就會(huì)自發呈現(xiàn)促纖維(wéi)化的(dí)活(huó)化(huà)肌成纖維細胞表(biǎo)型。有研(yán)究(jiū)表(biǎo)明，在低營養，低血(xiě)清，細胞(bāo)接種在低生(shēng)物力(lì)學(xué)刺激的彈性基質（而非(fēi)堅(jiān)硬(yìng)塑(sù)料(liào)）上(shàng)，可使(shǐ)未(wèi)傳(chuán)代(dài)（P0）原(yuán)代(dài)心(xīn)肌成(chéng)纖維(wéi)細胞(bāo)在體外維持(chí)超(chāo)過72小(xiǎo)時，且(qiě)不會顯(xiǎn)著(zhù)活(huó)化肌(jī)成纖維(wéi)細(xì)胞(bāo)表型，但其(qí)維持(chí)效果仍然有(yǒu)限。實驗室分(fēn)離(lí)的心肌(jī)成纖維(wéi)細胞(bāo)，經實(shí)驗測試，剛(gāng)分離後即(jí)立刻接種(zhǒng)在(zài)培(péi)養板(bǎn)/爬片，培養24 h約70-90%占(zhān)比(bǐ)細(xì)胞表達(dá)Vimentin處(chǔ)於(yú)靜息(xī)態(tài)（其他處(chǔ)於激(jī)活(huó)態），培養48 h約>70%轉變為激活(huó)態，α-SMA表(biǎo)達(dá)上(shàng)升。傳代(dài)操(cāo)作後大(dà)部分(fēn)處於激活(huó)態(tài)。該細(xì)胞鑒定(dìng)為接(jiē)種(zhǒng)24 h內靜息(xī)態時刻(kè)鑒定（Vimentin/α-SMA），細(xì)胞(bāo)經培(péi)養(yǎng)，運輸後(hòu)已處(chǔ)於激活態。

產品(pǐn)名稱	人心肌(jī)成纖(xiān)維(wéi)細(xì)胞(bāo)	英文名稱(chēng)	Human Cardiac Fibroblasts
組織來源(yuán)	心髒(zàng)組織(zhī)	產品(pǐn)規格	5×10^5Cells/T25
種(zhǒng)屬(shǔ)	人	生(shēng)長特(tè)性	貼(tiē)壁
細(xì)胞(bāo)形態	成纖維細(xì)胞(bāo)樣(yàng)	貨號	YS-01X7280

自(zì)備(bèi)試劑： 0.25%胰蛋(dàn)白酶  ，PBS  ，完全培(péi)養基

培養(yǎng)基(jī)： 人(rén)心肌(jī)成(chéng)纖維細胞(bāo)完(wán)全培(péi)養(yǎng)基(含FBS，生長添(tiān)加劑，Penicillin，Streptomycin等)

換(huàn)液頻率： 每2-3天(tiān)換(huàn)液(yè)一次

生長(cháng)特(tè)性(xìng)： 貼壁

細(xì)胞(bāo)形態(tài)： 成纖(xiān)維(wéi)細胞(bāo)樣

傳(chuán)代(dài)比(bǐ)例： 1:2

傳(chuán)代(dài)特性： 可傳(chuán)3-5代左右；3代以(yǐ)內(nèi)狀態最佳(jiā)

消化(huà)液： 0.25%胰(yí)蛋白酶

人(rén)心(xīn)肌成(chéng)纖維細胞(bāo)體(tǐ)外(wài)培養周(zhōu)期(qī)有(yǒu)限；建議(yì)使用(yòng)配套(tào)的(dí)專(zhuān)用生(shēng)長(cháng)培養基(jī)及(jí)正確的操(cāo)作方(fāng)法來培養，以此保證(zhèng)該(gāi)細胞(bāo)的(dí)最佳(jiā)培養狀(zhuàng)態。

方法簡(jiǎn)介(jiè) 實驗(yàn)室分離(lí)的(dí)人(rén)心肌(jī)成纖(xiān)維細胞采(cǎi)用膠原酶(méi)-胰蛋(dàn)白酶聯合(hé)消(xiāo)化結(jié)合差(chà)速貼壁(bì)法製備(bèi)而來(lái)，細(xì)胞總量約(yuē)為5×10⁵ cells/瓶(píng)。

質(zhì)量檢測(cè) 實驗(yàn)室(shì)分離的人(rén)心肌成(chéng)纖(xiān)維(wéi)細胞經Vimentin/α-SMA免疫(yì)熒光鑒(jiàn)定，純(chún)度可達(dá)90%以(yǐ)上(shàng)，且不含有HIV-1，HBV，HCV，支原(yuán)體(tǐ)，細(xì)菌，酵母(mǔ)和真菌等。