人(rén)主(zhǔ)動脈(mài)平滑肌(jī)細胞(bāo)

人(rén)主(zhǔ)動脈平滑肌(jī)細胞分離(lí)自(zì)主動脈組(zǔ)織；主動(dòng)脈(mài)是(shì)體循環(huán)的動(dòng)脈主幹(gān)。其運行(háng)路徑為升主動脈起(qǐ)於(yú)左(zuǒ)心室(shì)，至右側第(dì)2胸肋關節(jié)高度移行為主動脈弓，弓(gōng)行(háng)向左(zuǒ)後至第4胸椎(zhuī)體(tǐ)下(xià)緣移(yí)行為降主(zhǔ)動脈(mài)；在(zài)第(dì)12胸椎體高度穿(chuān)膈(gé)的(dí)主動(dòng)脈裂孔移行為腹(fù)主動(dòng)脈，以(yǐ)上為胸(xiōng)主動脈，至(zhì)第4腰椎(zhuī)體下緣分(fēn)為左(zuǒ)，右髂總動(dòng)脈(mài)；髂總動(dòng)脈在(zài)骶髂關節(jié)高(gāo)度(dù)分(fēn)為髂內(nèi)，外(wài)動(dòng)脈(mài)。主動脈平滑(huá)肌細胞原代分(fēn)離培養(yǎng)3天(tiān)後(hòu)，可(kě)見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸(shēn)展，細(xì)胞(bāo)形(xíng)態大小(xiǎo)不一，呈(chéng)梭形，不(bù)規則形，三角形(xíng)或(huò)扇(shàn)形(xíng)，核(hé)卵圓形(xíng)，居中；2周後細(xì)胞(bāo)匯合(hé)，多(duō)數細胞伸(shēn)展呈(chéng)長梭形，胞(bāo)漿豐富(fù)，有分枝狀(zhuàng)突起，細胞(bāo)平(píng)行排列成單層或部(bù)分(fēn)區(qū)域多層(céng)重疊生(shēng)長(cháng)，高低起(qǐ)伏；細胞(bāo)密度(dù)低時，常交織成(chéng)網(wǎng)狀(zhuàng)；密(mì)度(dù)高時(shí)，則(zé)排列(liè)為旋渦狀或(huò)柵(zhà)欄(lán)狀。傳(chuán)代(dài)後細(xì)胞(bāo)生(shēng)長(cháng)較快，4-6天即可(kě)匯(huì)合，並保持上述(shù)形態學(xué)特(tè)征和生(shēng)長特(tè)點。主動脈平滑肌細(xì)胞在(zài)心血管疾病(bìng)發(fā)生(shēng)，發展(zhǎn)中具有重要(yào)作用(yòng)，以主(zhǔ)動脈平(píng)滑(huá)肌(jī)細胞(bāo)為實驗研究對象，探討(tǎo)心(xīn)血(xiě)管疾(jí)病相關(guān)發(fā)病機製(zhì)是目(mù)前研(yán)究的熱點(diǎn)；體外培養的主動脈平(píng)滑肌(jī)細胞對於研究(jiū)其生(shēng)理(lǐ)功能，藥(yào)物作用(yòng)以及各種(zhǒng)致(zhì)病因素作(zuò)用(yòng)下的病(bìng)理生(shēng)理(lǐ)改變(biàn)具重(zhòng)要意義。

自備試(shì)劑： 0.25%胰蛋(dàn)白酶(méi)  ，PBS  ，完全培養(yǎng)基(jī)

培養基： 人主動脈平滑肌(jī)細胞完全培養(yǎng)基(含FBS，生(shēng)長添(tiān)加(jiā)劑，Penicillin，Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換(huàn)液一次(cì)

生長特性： 貼壁(bì)

細(xì)胞(bāo)形態(tài)： 成纖(xiān)維細胞樣(yàng)

傳代比(bǐ)例： 1:2

傳(chuán)代特性： 可(kě)傳5代左右(yòu)；3代(dài)以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化(huà)液： 0.25%胰(yí)蛋(dàn)白酶(méi)

人(rén)主(zhǔ)動脈(mài)平(píng)滑(huá)肌細胞體外培(péi)養周(zhōu)期(qī)有限(xiàn)；建議(yì)使(shǐ)用配(pèi)套(tào)的專(zhuān)用生長(cháng)培養(yǎng)基(jī)及正(zhèng)確(què)的操作(zuò)方(fāng)法來培養，以(yǐ)此(cǐ)保證該(gāi)細(xì)胞的最佳(jiā)培養(yǎng)狀態。

方法簡(jiǎn)介(jiè) 實驗室(shì)分(fēn)離的(dí)人(rén)主動脈平滑肌細(xì)胞采(cǎi)用(yòng)胰蛋(dàn)白(bái)酶-膠(jiāo)原酶聯合消化法結合(hé)差速(sù)貼(tiē)壁法製(zhì)備(bèi)而來(lái)，細胞總(zǒng)量約為5×10⁵ cells/瓶(píng)。

質(zhì)量(liáng)檢(jiǎn)測(cè) 實驗(yàn)室分離的人(rén)主動脈(mài)平(píng)滑肌細胞(bāo)經α-SMA免疫熒(yíng)光(guāng)鑒定(dìng)，純度可(kě)達(dá)90%以上，且(qiě)不(bù)含(hán)有(yǒu)HIV-1，HBV，HCV，支原體，細菌，酵母(mǔ)和(hé)真菌等。