兔成(chéng)骨細胞(bāo)

兔(tù)成骨細(xì)胞分(fēn)離(lí)自(zì)顱(lú)骨(gǔ)組織
；顱(lú)骨(gǔ)位於(yú)脊柱(zhù)上(shàng)方(fāng)，由23塊形(xíng)狀和大(dà)小不同(tóng)的(dí)扁(biǎn)骨(gǔ)和不(bù)規則骨組成。除(chú)下(xià)頜(hé)骨及舌(shé)骨(gǔ)外，其(qí)餘(yú)各骨彼(bǐ)此借縫(féng)或(huò)軟骨(gǔ)牢固連(lián)結，起(qǐ)著(zhuó)保護(hù)和支(zhī)持(chí)腦，感覺器官以及消化(huà)器(qì)和(hé)呼(hū)吸(xī)器的(dí)起始部分(fēn)的作用。顱分腦(nǎo)顱(lú)和(hé)麵顱兩(liǎng)部(bù)分(fēn)。腦(nǎo)顱位(wèi)於顱的(dí)後上部，內有顱(lú)腔(qiāng)，容(róng)納腦，共8塊。麵顱(lú)為(wéi)顱的前下(xià)部(bù)分(fēn)，包含(hán)眶(kuàng)，鼻(bí)腔，口腔(qiāng)等(děng)結(jié)構，構成(chéng)麵(miàn)部(bù)的支(zhī)架(jià)，共(gòng)15塊。成(chéng)骨細(xì)胞是骨形成的主(zhǔ)要(yào)功(gōng)能細胞，負責(zé)骨基(jī)質(zhì)的合(hé)成，分泌(mì)和礦化。骨不斷(duàn)地(dì)進行著重(zhòng)建(jiàn)，骨重(zhòng)建過程(chéng)包括破(pò)骨(gǔ)細(xì)胞(bāo)貼(tiē)附(fù)在(zài)舊骨(gǔ)區(qū)域，分泌酸(suān)性物質(zhì)溶(róng)解(jiě)礦物(wù)質(zhì)，分(fēn)泌蛋(dàn)白酶消(xiāo)化(huà)骨基(jī)質，形成骨(gǔ)吸收陷窩
；其後，成(chéng)骨細胞移(yí)行至被(bèi)吸(xī)收(shōu)部位(wèi)，分泌骨(gǔ)基質(zhì)，骨(gǔ)基質礦化而形(xíng)成新骨
；破骨(gǔ)與成(chéng)骨(gǔ)過程(chéng)的(dí)平(píng)衡(héng)是(shì)維(wéi)持(chí)正(zhèng)常(cháng)骨量的關鍵。成骨細胞(bāo)培(péi)養(yǎng)不僅有(yǒu)助於(yú)了解骨形成(chéng)機(jī)製，骨骼(gé)係(xì)統(tǒng)疾病的(dí)分(fēn)子和(hé)細胞學基礎，也(yě)是藥物篩選(xuǎn)，生(shēng)物材料開發(fā)和(hé)生(shēng)物工(gōng)程(chéng)研(yán)究的重要(yào)手(shǒu)段。

自(zì)備(bèi)試(shì)劑(jì)： 0.25%胰蛋(dàn)白酶(méi)  ，PBS  ，完(wán)全培(péi)養基

培養基： 兔成骨細胞完全培(péi)養基(jī)(含(hán)FBS，生長添加(jiā)劑，Penicillin，Streptomycin等)

換(huàn)液(yè)頻率： 每(měi)2-3天換(huàn)液一次(cì)

生(shēng)長(cháng)特(tè)性(xìng)： 貼壁

細(xì)胞形態： 梭形，多角(jiǎo)形(xíng)

傳代(dài)比例： 1:2

傳(chuán)代(dài)特(tè)性： 可傳(chuán)3-5代左(zuǒ)右
；3代以內(nèi)狀(zhuàng)態最(zuì)佳(jiā)

消化液： 0.25%胰蛋白酶

兔成(chéng)骨細胞體外培(péi)養(yǎng)周(zhōu)期有限
；建議使(shǐ)用(yòng)配(pèi)套的專(zhuān)用(yòng)生長培養基及正確(què)的操作(zuò)方法來(lái)培養，以此(cǐ)保(bǎo)證(zhèng)該細胞的(dí)最佳培養狀(zhuàng)態。

方法(fǎ)簡(jiǎn)介 實驗(yàn)室分離的(dí)兔(tù)成骨細(xì)胞(bāo)采用(yòng)先用胰(yí)蛋(dàn)白酶(méi)短時(shí)間消(xiāo)化(huà)，後(hòu)用(yòng)膠(jiāo)原酶(méi)反(fǎn)復消(xiāo)化(huà)製備而(ér)來(lái)，細胞(bāo)總(zǒng)量(liáng)約(yuē)為(wéi)5×10⁵ cells/瓶。

質量(liáng)檢測(cè) 實(shí)驗室(shì)分(fēn)離的兔(tù)成骨細(xì)胞(bāo)經(jīng)ALP染(rǎn)色檢(jiǎn)測，純(chún)度可(kě)達90%以上(shàng)，且(qiě)不含(hán)有(yǒu)HIV-1，HBV，HCV，支原(yuán)體(tǐ)，細(xì)菌，酵(jiào)母和(hé)真(zhēn)菌等。