兔頜骨成纖維細(xì)胞

兔(tù)頜(hé)骨(gǔ)成纖維細胞(bāo)分離自頜骨(gǔ)組(zǔ)織(zhī)；頜骨(gǔ)，是(shì)指(zhǐ)頜部的(dí)骨(gǔ)頭，分為上(shàng)頜骨和(hé)下(xià)頜骨。構成口(kǒu)腔上下部(bù)的骨(gǔ)頭(tóu)和肌(jī)肉組(zǔ)織(zhī)，上(shàng)部(bù)叫(jiào)上(shàng)頜，下(xià)部叫下頜。成纖維細胞（Fibroblast）是(shì)疏鬆結締組織的主(zhǔ)要細胞成(chéng)分，由(yóu)胚(pēi)胎時(shí)期的間(jiān)充(chōng)質細(xì)胞分化而來。成(chéng)纖(xiān)維細(xì)胞較大，輪廓清楚(chǔ)，多為突起的紡錘形(xíng)或(huò)星(xīng)形的扁平狀(zhuàng)結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈(chéng)規則的卵(luǎn)圓(yuán)形(xíng)，核(hé)仁大而明(míng)顯。成纖維(wéi)細(xì)胞功能(néng)活動(dòng)旺盛，細胞質嗜弱(ruò)鹼性，具(jù)明(míng)顯(xiǎn)的蛋(dàn)白質(zhì)合成(chéng)和分泌活動，在一(yī)定條件下，它(tā)可以(yǐ)實現(xiàn)跟纖(xiān)維(wéi)細胞(bāo)的互(hù)相(xiāng)轉(zhuǎn)化；成纖維細胞對不同程(chéng)度(dù)的細胞(bāo)變性(xìng)，壞死(sǐ)和組織缺(quē)損的修(xiū)復有著十(shí)分(fēn)重(zhòng)要(yào)的(dí)作(zuò)用。剛分離的成纖維細(xì)胞(bāo)呈(chéng)圓形，折光性(xìng)良(liáng)好(hǎo)，懸浮於培(péi)養基中。30 min細胞(bāo)貼壁，其(qí)中(zhōng)部(bù)分(fēn)開始伸(shēn)出偽(wěi)足，表現(xiàn)為小的(dí)突起；6 h後(hòu)細胞基本(běn)貼壁完(wán)全，伸展(zhǎn)成梭形，胞核清(qīng)晰(xī)，分布較均匀，散(sàn)在(zài)生(shēng)長，不(bù)聚集(jí)成(chéng)團；細胞(bāo)生長(cháng)迅(xùn)速(sù)，5-7天即(jí)呈融合(hé)狀(zhuàng)態，細(xì)胞排(pái)列緊(jǐn)密，有(yǒu)的交叉(chā)重疊生(shēng)長(cháng)，平坦，胞(bāo)體較大(dà)，細(xì)胞質(zhì)透明(míng)，細胞核(hé)較(jiào)大，呈橢(tuǒ)圓(yuán)形(xíng)，顏(yán)色淡(dàn)。細(xì)胞(bāo)融合(hé)，並彼(bǐ)此連接(jiē)成網(wǎng)狀(zhuàng)；細(xì)胞呈(chéng)突起(qǐ)的(dí)紡錘(chuí)形(xíng)或(huò)星(xīng)形(xíng)的(dí)扁平(píng)分(fēn)布。

自備試(shì)劑(jì)
： 0.25%胰蛋(dàn)白酶  ，PBS  ，完(wán)全培養基(jī)

培養基(jī)
： 兔頜骨(gǔ)成(chéng)纖(xiān)維細胞(bāo)完(wán)全培(péi)養基(jī)(基礎培養基，含FBS，bFGF，Insulin，Penicillin，Streptomycin等)

換液(yè)頻(pín)率
： 每2-3天換(huàn)液(yè)一(yī)次

生(shēng)長(cháng)特性
： 貼(tiē)壁

細胞形態(tài)
： 成(chéng)纖維細(xì)胞樣(yàng)

傳代比(bǐ)例
： 1:2

傳(chuán)代(dài)特(tè)性(xìng)
： 可(kě)傳(chuán)5代(dài)左右；3代(dài)以(yǐ)內狀(zhuàng)態(tài)最佳(jiā)

消化(huà)液(yè)
： 0.25%胰蛋白(bái)酶

兔頜骨(gǔ)成(chéng)纖維(wéi)細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有(yǒu)限(xiàn)；建議使用配套(tào)的專用(yòng)生(shēng)長(cháng)培養基及(jí)正(zhèng)確(què)的操作(zuò)方法來(lái)培養，以(yǐ)此保(bǎo)證該細(xì)胞(bāo)的(dí)最(zuì)佳培(péi)養狀(zhuàng)態。

方法簡(jiǎn)介 實驗(yàn)室(shì)分離的兔(tù)頜骨成(chéng)纖維細(xì)胞采用(yòng)胰蛋(dàn)白酶(méi)-膠原酶(méi)混合(hé)酶消(xiāo)化(huà)後差(chà)速貼(tiē)壁製備而來，細胞總(zǒng)量(liáng)約(yuē)為5×10⁵ cells/瓶。

質量檢(jiǎn)測 實(shí)驗室分離的兔頜骨(gǔ)成纖維(wéi)細胞(bāo)經(jīng)Vimentin免(miǎn)疫熒光(guāng)鑒定，純度(dù)可(kě)達(dá)90%以(yǐ)上(shàng)，且(qiě)不含(hán)有(yǒu)HIV-1，HBV，HCV，支原(yuán)體，細菌(jūn)，酵母(mǔ)和(hé)真(zhēn)菌等。