兔甲狀腺上(shàng)皮細胞

兔(tù)甲狀腺上皮細胞分離自(zì)兔甲(jiǎ)狀(zhuàng)腺濾泡上(shàng)皮組(zǔ)織，是(shì)構成甲(jiǎ)狀腺濾泡的核(hé)心功(gōng)能(néng)細胞。核心功能(néng)為合成和(hé)分(fēn)泌甲狀腺激(jī)素(sù)（T3，T4），參(cān)與(yǔ)機(jī)體(tǐ)的新(xīn)陳代謝，生長(cháng)發育(yù)及能量(liáng)代謝調節；攝取碘(diǎn)離子並進行(háng)碘(diǎn)化，偶聯反(fǎn)應(yīng)，完(wán)成(chéng)甲狀(zhuàng)腺激素的合成過(guò)程(chéng)；形成甲狀腺(xiàn)濾(lǜ)泡屏(píng)障(zhàng)，維持甲(jiǎ)狀腺內環境穩態。功能異常與(yǔ)甲狀腺功能亢進，甲狀腺功能減退(tuì)，甲狀腺炎，甲(jiǎ)狀(zhuàng)腺腫瘤(liú)等(děng)甲(jiǎ)狀(zhuàng)腺(xiàn)疾(jí)病密切(qiē)相(xiāng)關。原代培養(yǎng)3-4天(tiān)後開(kāi)始貼(tiē)壁，初始形(xíng)態(tài)呈(chéng)多邊(biān)形或(huò)立方形；傳代後(hòu)細(xì)胞生長(cháng)平穩，可(kě)穩(wěn)定維(wéi)持(chí)甲狀腺(xiàn)上(shàng)皮細胞的典(diǎn)型(xíng)形(xíng)態(tài)及(jí)激(jī)素分(fēn)泌功(gōng)能。是研究甲(jiǎ)狀(zhuàng)腺(xiàn)生理(lǐ)功(gōng)能(néng)，甲狀腺疾病發病(bìng)機製及(jí)相關藥物篩選(xuǎn)的重(zhòng)要實驗材料。

自(zì)備(bèi)試劑：0.25%胰蛋(dàn)白(bái)酶-EDTA消化(huà)液(yè)，PBS緩衝液，完(wán)全(quán)培(péi)養(yǎng)基(jī)

培養基(jī)：兔甲(jiǎ)狀腺上皮細(xì)胞完(wán)全培(péi)養(yǎng)基(jī)（含(hán)FBS，促(cù)甲狀腺激(jī)素，表皮生長因(yīn)子，Penicillin，Streptomycin等(děng)）

換液(yè)頻率(shuài)：每2-3天換液一(yī)次(cì)

生長特性：貼壁(bì)生長，可(kě)形(xíng)成(chéng)濾(lǜ)泡樣(yàng)結(jié)構

細(xì)胞形(xíng)態：多(duō)邊(biān)形(xíng)，立方(fāng)形(xíng)

傳代(dài)比(bǐ)例(lì)：1:2

傳(chuán)代(dài)特性(xìng)：可(kě)傳4-6代；2-4代以(yǐ)內細胞(bāo)狀態(tài)最(zuì)佳(jiā)，功能最(zuì)穩(wěn)定

消化液：0.25%胰蛋(dàn)白酶-EDTA消(xiāo)化(huà)液(yè)

兔(tù)甲狀(zhuàng)腺上皮(pí)細(xì)胞(bāo)體(tǐ)外(wài)培養(yǎng)周期有限(xiàn)；建(jiàn)議(yì)使用(yòng)配(pèi)套的(dí)專(zhuān)用生(shēng)長培(péi)養基及正確(què)的操作(zuò)方法來培(péi)養(yǎng)，以此保證該(gāi)細胞(bāo)的(dí)最佳培養狀(zhuàng)態(tài)。

方(fāng)法(fǎ)簡介：實(shí)驗室采用胰(yí)蛋白(bái)酶-EDTA聯(lián)合消化法(fǎ)結(jié)合(hé)差速(sù)貼壁(bì)法製備(bèi)該(gāi)細(xì)胞，通過特定消(xiāo)化體係溫和(hé)分解(jiě)兔(tù)甲(jiǎ)狀腺(xiàn)濾泡上(shàng)皮(pí)組織(zhī)，分離獲得單個(gè)核(hé)細胞後，利用上(shàng)皮細(xì)胞與其他細胞(bāo)貼壁(bì)速度的差異進(jìn)行(háng)純化，最終獲得(dé)高(gāo)純度(dù)的兔甲狀腺(xiàn)上(shàng)皮細胞(bāo)，細(xì)胞(bāo)總量(liáng)約(yuē)為(wéi)5×10⁵ cells/瓶。

質(zhì)量(liáng)檢測：經(jīng)甲狀腺(xiàn)上(shàng)皮細(xì)胞(bāo)特異(yì)性(xìng)標(biāo)誌物(wù)（TTF-1，Tg，NIS）免疫(yì)熒(yíng)光鑒定(dìng)，本細胞純(chún)度(dù)可達(dá)90%以(yǐ)上(shàng)；經甲狀(zhuàng)腺激(jī)素(sù)分(fēn)泌(mì)檢測驗(yàn)證細(xì)胞功能正常；經檢測(cè)不含(hán)有(yǒu)支原體(tǐ)，細菌，酵(jiào)母和(hé)真菌等外(wài)源汙(wū)染(rǎn)物，細胞活(huó)性(xìng)達標。