兔(tù)頸動脈(mài)成纖維細胞(bāo)

兔(tù)頸(jǐng)動(dòng)脈(mài)成纖維(wéi)細胞分(fēn)離自兔頸動(dòng)脈血管壁(bì)外膜組織(zhī)，是構成頸動脈外(wài)膜(mó)的(dí)主要(yào)功能(néng)細胞。核(hé)心功(gōng)能為(wéi)合成(chéng)和(hé)分(fēn)泌(mì)膠原(yuán)蛋(dàn)白，彈性(xìng)纖維等細胞(bāo)外基質，構建(jiàn)頸(jǐng)動脈(mài)外膜的結構支架，維持頸(jǐng)動脈(mài)血管(guǎn)壁的完(wán)整性(xìng)和彈性(xìng)；分(fēn)泌(mì)多種(zhǒng)細胞因子(zǐ)和(hé)生長(cháng)因子，參與(yǔ)頸動(dòng)脈(mài)的(dí)修復，重塑(sù)過程(chéng)，調控血(xiě)管(guǎn)壁的穩態；作為血管壁(bì)的屏(píng)障(zhàng)，抵(dǐ)御(yù)外界(jiè)刺激對(duì)血管(guǎn)的損傷。功(gōng)能(néng)異常與頸動(dòng)脈粥樣硬化(huà)，頸動脈狹窄，頸動脈瘤(liú)等心(xīn)血(xiě)管疾(jí)病密切(qiē)相關。原(yuán)代培養2-3天後(hòu)開始(shǐ)貼(tiē)壁，初(chū)始形態呈(chéng)短(duǎn)梭(suō)形或不(bù)規則形(xíng)；傳代後細(xì)胞生長旺盛(shèng)，可穩(wěn)定維持成纖(xiān)維細胞的典型形(xíng)態(tài)及功(gōng)能。是研(yán)究頸(jǐng)動脈(mài)生理(lǐ)功能(néng)，心血管疾病(bìng)發病機(jī)製及血(xiě)管(guǎn)修(xiū)復材料篩選的重(zhòng)要實驗材料(liào)。

自備試劑：0.25%胰(yí)蛋(dàn)白(bái)酶(méi)，膠(jiāo)原酶Ⅰ型，PBS緩(huǎn)衝(chōng)液，完全培養(yǎng)基(jī)

培養基：兔頸動(dòng)脈成(chéng)纖(xiān)維細胞完全培養基（含FBS，成(chéng)纖(xiān)維(wéi)細胞生長因(yīn)子(zǐ)，維生(shēng)素C，Penicillin，Streptomycin等）

換(huàn)液(yè)頻率(shuài)：每2-3天換(huàn)液(yè)一次

生長特性：貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)：短(duǎn)梭形，長梭形

傳(chuán)代比例：1:2-1:3

傳(chuán)代(dài)特性(xìng)：可(kě)傳(chuán)6-8代(dài)；3-5代以內(nèi)細胞狀(zhuàng)態最(zuì)佳，功能最(zuì)穩定

消(xiāo)化(huà)液：0.25%胰蛋白酶(méi)

兔頸(jǐng)動脈(mài)成(chéng)纖(xiān)維(wéi)細胞(bāo)體外培(péi)養(yǎng)周期(qī)有限(xiàn)；建(jiàn)議使用配套的專用生長(cháng)培(péi)養基(jī)及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此(cǐ)保證該細胞的(dí)最佳培(péi)養狀態。

方法簡(jiǎn)介(jiè)：實(shí)驗(yàn)室采(cǎi)用(yòng)胰蛋白酶(méi)-膠原(yuán)酶聯合消化(huà)法(fǎ)結(jié)合差速貼壁(bì)法(fǎ)製(zhì)備(bèi)該細(xì)胞(bāo)，通過特定消化(huà)體係(xì)溫(wēn)和分解兔頸動(dòng)脈(mài)血(xiě)管(guǎn)壁外(wài)膜組織(zhī)，分(fēn)離(lí)獲(huò)得(dé)單個核(hé)細胞(bāo)後(hòu)，利用(yòng)成(chéng)纖維細胞與其他細(xì)胞貼(tiē)壁速度的差異進(jìn)行(háng)純化，最終獲得(dé)高純度的兔頸動脈成(chéng)纖(xiān)維細(xì)胞，細胞總量約為5×10⁵ cells/瓶(píng)。

質量檢測：經成纖(xiān)維細(xì)胞(bāo)特異(yì)性標(biāo)誌物（波形(xíng)蛋白(bái)Vimentin，FSP1，α-SMA）免疫(yì)熒光鑒(jiàn)定(dìng)，本細胞純度可(kě)達90%以(yǐ)上；經細胞(bāo)外(wài)基質(zhì)分泌檢(jiǎn)測驗證細(xì)胞(bāo)功(gōng)能正(zhèng)常；經檢測不含(hán)有(yǒu)支(zhī)原體，細(xì)菌，酵(jiào)母(mǔ)和(hé)真(zhēn)菌(jūn)等外源(yuán)汙(wū)染物(wù)，細胞活性達標(biāo)。