兔(tù)小(xiǎo)腸(cháng)成(chéng)纖維細胞

兔小腸(cháng)成(chéng)纖(xiān)維細(xì)胞(bāo)分(fēn)離自(zì)兔(tù)小腸壁(bì)結締(dì)組(zǔ)織(zhī)，是構(gòu)成小腸壁(bì)的(dí)主要功能細胞之一。核心(xīn)功(gōng)能為(wéi)合(hé)成(chéng)和分泌膠(jiāo)原蛋(dàn)白(bái)，彈(dàn)性纖維(wéi)等細(xì)胞(bāo)外基(jī)質(zhì)，構(gòu)建(jiàn)小(xiǎo)腸壁的結構支架，維(wéi)持小(xiǎo)腸的形態穩定和彈(dàn)性；分泌多(duō)種(zhǒng)細(xì)胞(bāo)因(yīn)子(zǐ)，參(cān)與小(xiǎo)腸(cháng)壁的(dí)修(xiū)復(fù)與(yǔ)重(zhòng)塑過(guò)程，在小(xiǎo)腸(cháng)黏(nián)膜損傷後(hòu)促進創(chuàng)麵愈(yù)合(hé)；輔助調(tiáo)節小腸(cháng)平滑肌的(dí)收縮功能，保障(zhàng)小腸(cháng)的正常(cháng)蠕動和消(xiāo)化吸(xī)收功能。功能異常與(yǔ)腸(cháng)炎，腸(cháng)潰瘍(yáng)，腸梗(gěng)阻，腸(cháng)纖(xiān)維化(huà)等(děng)腸道疾病密切相關。原(yuán)代培(péi)養(yǎng)2-3天(tiān)後(hòu)開(kāi)始貼(tiē)壁，初始形態呈(chéng)短梭形或不規則(zé)形(xíng)；傳代後細(xì)胞生長旺(wàng)盛，可(kě)穩(wěn)定維(wéi)持成纖維(wéi)細(xì)胞(bāo)的典(diǎn)型形態及功(gōng)能(néng)。是研究小(xiǎo)腸(cháng)生(shēng)理功能，腸道(dào)疾病發病機(jī)製及(jí)腸道(dào)修復(fù)材料篩選的重要(yào)實驗(yàn)材(cái)料(liào)。

自(zì)備(bèi)試a劑：0.25%胰(yí)蛋白酶，膠(jiāo)原(yuán)酶Ⅰ型(xíng)，PBS緩衝(chōng)液，完全(quán)培養(yǎng)基

培(péi)養基(jī)：兔小(xiǎo)腸成(chéng)纖(xiān)維(wéi)細胞完全培養基(jī)（含FBS，成纖維細(xì)胞生長(cháng)因子，維生(shēng)素(sù)C，Penicillin，Streptomycin等(děng)）

換(huàn)液頻(pín)率(shuài)：每(měi)2-3天(tiān)換(huàn)液一次(cì)

生長特性：貼壁(bì)生長

細(xì)胞(bāo)形態：短梭形(xíng)，長梭形

傳(chuán)代(dài)比例：1:2-1:3

傳代特性(xìng)：可傳6-8代(dài)；3-5代以內細胞(bāo)狀態最(zuì)佳(jiā)，功(gōng)能最穩定

消化液：0.25%胰蛋白酶

兔(tù)小(xiǎo)腸(cháng)成纖維(wéi)細胞(bāo)體(tǐ)外(wài)培養(yǎng)周(zhōu)期有限；建議使(shǐ)用配(pèi)套(tào)的(dí)專用(yòng)生長(cháng)培養基及正確(què)的(dí)操作方法來培養，以此(cǐ)保(bǎo)證該(gāi)細胞的最佳培養(yǎng)狀態。

方法(fǎ)簡介：實(shí)驗室(shì)采用胰(yí)蛋(dàn)白酶-膠原(yuán)酶聯(lián)合消化法(fǎ)結合差速(sù)貼壁(bì)法(fǎ)製備(bèi)該細(xì)胞，通(tōng)過特定(dìng)消(xiāo)化(huà)體(tǐ)係溫和(hé)分(fēn)解兔小腸壁結締組織(zhī)，分離獲得單(dān)個核(hé)細胞後(hòu)，利(lì)用(yòng)成纖(xiān)維細(xì)胞與(yǔ)其(qí)他細胞(bāo)貼(tiē)壁速度(dù)的差(chà)異(yì)進(jìn)行純(chún)化，最(zuì)終(zhōng)獲(huò)得(dé)高(gāo)純度的(dí)兔(tù)小腸成纖維(wéi)細胞(bāo)，細胞總量約(yuē)為5×10⁵ cells/瓶(píng)。

質量檢測：經(jīng)成(chéng)纖(xiān)維(wéi)細胞(bāo)特(tè)異(yì)性標(biāo)誌(zhì)物(wù)（波形蛋白(bái)Vimentin，FSP1，α-SMA）免(miǎn)疫(yì)熒(yíng)光鑒(jiàn)定(dìng)，本細(xì)胞純(chún)度可達(dá)90%以上；經細胞(bāo)外(wài)基質分泌(mì)檢測(cè)驗證細(xì)胞功(gōng)能正常(cháng)；經(jīng)檢測不(bù)含有支原體，細菌，酵(jiào)母和(hé)真菌等(děng)外源(yuán)汙染物，細(xì)胞活(huó)性達標(biāo)。