兔(tù)棕色脂肪細胞(bāo)

兔棕色(sè)脂(zhī)肪細(xì)胞(bāo)分(fēn)離自(zì)棕色脂肪組織(zhī)；動(dòng)物(wù)體內(nèi)存在(zài)棕色(sè)和(hé)白(bái)色兩種脂(zhī)肪(fáng)，白(bái)色(sè)脂肪(fáng)堆積(jī)在(zài)皮下，負(fù)責儲(chǔ)存多餘(yú)熱(rè)量；棕(zōng)色脂肪負責分解引(yǐn)發(fā)肥胖的白(bái)色(sè)脂肪，將後者轉(zhuǎn)化(huà)成二氧化(huà)碳，水(shuǐ)和熱量，本身(shēn)不儲(chǔ)存(cún)熱量
。棕(zōng)色脂(zhī)肪組織(zhī)呈棕色，其(qí)特點是組織中有豐富(fù)的毛細血管，脂肪(fáng)細(xì)胞(bāo)內(nèi)散(sàn)著許(xǔ)多小(xiǎo)脂(zhī)滴，綫粒(lì)體大而豐(fēng)富，核(hé)圓(yuán)形(xíng)，位於(yú)細胞中(zhōng)央，這種(zhǒng)脂(zhī)肪細胞也稱為多泡(pào)脂(zhī)肪細(xì)胞
。棕色脂肪(fáng)組織在(zài)成年動(dòng)物極少，新(xīn)生兒及(jí)冬眠動(dòng)物(wù)較多(duō)，在新生(shēng)兒主要(yào)分(fēn)布在肩(jiān)胛(jiǎ)間區，腋(yè)窩(wō)及(jí)頸(jǐng)後部(bù)等處
。棕色脂肪組織僅(jǐn)在(zài)嬰(yīng)兒(ér)時(shí)期發(fā)揮作(zuò)用(yòng)，它們(mén)堆(duī)積在(zài)新生兒(ér)肩胛處(chǔ)，幫(bāng)助(zhù)維持體(tǐ)溫
。隨(suí)著年齡增(zēng)長，棕色(sè)脂(zhī)肪(fáng)會逐漸消(xiāo)失(shī)
。最終(zhōng)，動物體內隻殘(cán)存少量棕色(sè)脂(zhī)肪細(xì)胞，分布於(yú)頸部和鎖骨
。脂(zhī)肪細(xì)胞(bāo)分(fēn)為白(bái)色脂肪(fáng)細(xì)胞(bāo)和(hé)褐(hè)色(sè)（棕(zōng)色）脂肪細胞(bāo)，常呈白色(sè)，在(zài)嬰幼(yòu)兒期(qī)大量(liáng)增殖，到青春期數(shù)量達到巔(diān)峰，此後數量(liáng)一(yī)般(bān)不再增加
。細(xì)胞(bāo)內(nèi)含有大量(liáng)富含脂肪(fáng)的小泡(pào)，稱(chēng)為(wéi)脂(zhī)質泡，富(fù)含(hán)光麵內質網
。此外，還有(yǒu)一(yī)種褐色脂(zhī)肪(fáng)細胞，在(zài)動(dòng)物體內主要存在於(yú)肩胛骨間(jiān)，頸(jǐng)背部(bù)，腋窩，縱(zòng)隔及(jí)腎髒周圍，含有高(gāo)度(dù)團(tuán)縮的(dí)褐色(sè)脂(zhī)肪，作(zuò)用是(shì)將脂質(zhì)分解產熱(rè)，調(tiáo)節(jié)體(tǐ)內脂質(zhì)比例
。

自(zì)備試劑： 0.25%胰(yí)蛋(dàn)白酶(méi)  ， 多(duō)聚-L-賴氨(ān)酸(suān)溶液（1×）或多(duō)聚-L-賴(lài)氨(ān)酸溶液（10×）  ，PBS  ，完全培養(yǎng)基(jī)

包被條(tiáo)件(jiàn)： PLL（0.1 mg/mL）

培(péi)養基(jī)： 兔(tù)棕色脂肪細胞(bāo)完(wán)全培養基(jī)(基(jī)礎(chǔ)培(péi)養(yǎng)基，含FBS，EGF，Insulin，Penicillin，Streptomycin等(děng))

換液頻率： 每2-3天換液一(yī)次(cì)

生長(cháng)特性： 貼壁

細胞形態(tài)： 梭(suō)形(xíng)，多(duō)角(jiǎo)形(xíng)

傳代(dài)比例(lì)： 不(bù)傳(chuán)代

傳代(dài)特性： 屬(shǔ)於終末分(fēn)化(huà)細胞；屬(shǔ)於(yú)不(bù)增(zēng)殖(zhí)細胞群(qún)

消化(huà)液： 0.25%胰蛋(dàn)白酶

兔棕色(sè)脂肪細胞體外培養周(zhōu)期(qī)有(yǒu)限(xiàn)；建(jiàn)議使(shǐ)用配套的(dí)專用生(shēng)長培(péi)養(yǎng)基(jī)及正(zhèng)確的操(cāo)作方法來培養(yǎng)，以此(cǐ)保(bǎo)證該細胞(bāo)的(dí)最佳培養狀態
。

方法(fǎ)簡介 實(shí)驗(yàn)室分離(lí)的(dí)兔棕(zōng)色(sè)脂肪(fáng)細(xì)胞采(cǎi)用(yòng)膠(jiāo)原酶(méi)-胰酶(méi)聯(lián)合消(xiāo)化(huà)法(fǎ)獲得前(qián)脂(zhī)肪(fáng)細胞(bāo)，經(jīng)成(chéng)脂誘導培養(yǎng)基(jī)誘導培(péi)養(yǎng)製備而(ér)來，細(xì)胞總量(liáng)約(yuē)為(wéi)5×10⁵ cells/瓶(píng)
。

質(zhì)量檢(jiǎn)測 實(shí)驗(yàn)室分(fēn)離(lí)的兔棕色脂肪(fáng)細(xì)胞(bāo)經油(yóu)紅(hóng)O定(dìng)性(xìng)檢測陽(yáng)性，成脂染色(sè)數(shù)占比>60%，且不(bù)含(hán)有HIV-1，HBV，HCV，支原體(tǐ)，細(xì)菌，酵(jiào)母和真(zhēn)菌(jūn)等(děng)
。