小鼠外周血單(dān)核(hé)細胞

小鼠外(wài)周(zhōu)血單核細胞分(fēn)離(lí)自外周(zhōu)血(xiě)；外(wài)周血(xiě)是除骨髓(suǐ)之(zhī)外的血液(yè)
，臨床上常用(yòng)一些(xiē)方法(fǎ)把(bǎ)骨(gǔ)髓中的造(zào)血幹細(xì)胞(bāo)釋(shì)放到血(xiě)液中
，再在(zài)從(cóng)血液(yè)中(zhōng)提(tí)取分(fēn)離得到造血幹細(xì)胞
，我(wǒ)們把這(zhè)樣(yàng)得(dé)到的(dí)幹(gān)細(xì)胞稱為外周血幹細(xì)胞(bāo)
，在二(èr)十一(yī)世(shì)紀初(chū)人類開始的生命(mìng)方舟計(jì)劃中首(shǒu)次提(tí)出外(wài)周(zhōu)血(xiě)這一新概(gài)念。單(dān)核(hé)細(xì)胞起(qǐ)源(yuán)於骨髓中的(dí)造血(xiě)幹(gān)細胞(bāo)
，並在骨(gǔ)髓中發育。當它們從(cóng)骨(gǔ)髓(suǐ)進(jìn)入(rù)血(xiě)液時仍(réng)然是(shì)尚未成(chéng)熟(shú)的細胞(bāo)。與其他血細(xì)胞比較
，單(dān)核(hé)細胞內(nèi)含有(yǒu)更(gēng)多的非特異性(xìng)脂酶(méi)
，並且具有(yǒu)更強的吞噬(shì)作(zuò)用(yòng)。單核細胞(bāo)在(zài)血(xiě)液中(zhōng)停留2-3天後遷移到(dào)周(zhōu)圍(wéi)組織中
，細(xì)胞體積(jī)繼續增(zēng)大(dà)
，直徑可(kě)達50-80 μm
，細胞(bāo)內(nèi)所含的(dí)溶酶(méi)體顆(kē)粒和(hé)綫粒體(tǐ)的(dí)數(shù)目(mù)也(yě)增(zēng)多
，成(chéng)為成熟的(dí)細(xì)胞。固(gù)定(dìng)在組織(zhī)中的(dí)單核細(xì)胞(bāo)稱為組織巨噬(shì)細胞(bāo)
，它們經常大(dà)量(liáng)存(cún)在於(yú)淋巴結(jié)
，肺泡壁
，骨髓(suǐ)
，肝和脾(pí)等器(qì)官。激(jī)活了的單(dān)核細胞和(hé)組織巨(jù)噬細胞能生成(chéng)並釋(shì)放多種(zhǒng)細(xì)胞(bāo)毒(dú)
，幹(gān)擾(rǎo)素和(hé)白(bái)細(xì)胞介素
，參(cān)與(yǔ)機(jī)體防衛機(jī)製
，還(huán)產(chǎn)生(shēng)一些(xiē)能促進內皮(pí)細胞(bāo)和(hé)平(píng)滑(huá)肌細胞生長的因(yīn)子。在(zài)炎(yán)症周圍單核(hé)細胞能進行(háng)細(xì)胞分裂
，並包圍異物(wù)。

自備試劑： 0.25%胰(yí)蛋白(bái)酶  
，PBS  
，完(wán)全培養基(jī)

培(péi)養(yǎng)基(jī)： 小鼠外(wài)周(zhōu)血單(dān)核(hé)細(xì)胞完全(quán)培(péi)養基(含FBS
，生長添加(jiā)劑
，Penicillin
，Streptomycin等(děng))

換(huàn)液頻(pín)率： 每2-3天(tiān)換液(yè)一次

生(shēng)長(cháng)特性(xìng)： 半(bàn)貼壁(bì)半懸(xuán)浮(fú)

細(xì)胞形態： 圓形
，巨(jù)噬(shì)細胞樣

傳(chuán)代(dài)比例(lì)： 不傳代(dài)

傳代特(tè)性： 不增殖；不傳(chuán)代

消(xiāo)化液： 0.25%胰蛋(dàn)白酶

小鼠(shǔ)外周(zhōu)血單核細胞(bāo)體外(wài)培養周期有(yǒu)限；建議使用配(pèi)套的(dí)專(zhuān)用(yòng)生長(cháng)培(péi)養基(jī)及正確的操作方法來(lái)培養
，以此保證該細胞的(dí)最佳培養(yǎng)狀(zhuàng)態。

方法簡(jiǎn)介(jiè) 實驗室分(fēn)離的(dí)小鼠(shǔ)外周血(xiě)單(dān)核細胞采用密(mì)度(dù)梯度(dù)離(lí)心法結(jié)合差速(sù)貼(tiē)壁(bì)法製(zhì)備而來
，細胞總量約(yuē)為5×10⁵ cells/瓶(píng)。

質(zhì)量(liáng)檢測(cè) 實(shí)驗室分(fēn)離的小鼠(shǔ)外周血單(dān)核細胞經CD14免疫(yì)熒光鑒(jiàn)定
，純(chún)度(dù)可達90%以(yǐ)上(shàng)
，且(qiě)不含有HIV-1
，HBV
，HCV
，支原(yuán)體
，細菌
，酵母和真菌等。