小(xiǎo)鼠心(xīn)肌成纖維細(xì)胞

小(xiǎo)鼠(shǔ)心(xīn)肌(jī)成(chéng)纖維細胞分離自(zì)心(xīn)髒組(zǔ)織；心髒由心(xīn)肌細(xì)胞(bāo)和非心肌細胞組成(chéng)，非(fēi)心肌(jī)細(xì)胞占細胞總(zǒng)數量的(dí)約70%，其(qí)中約(yuē)90%以(yǐ)上的(dí)非心肌(jī)細胞(bāo)由心(xīn)肌(jī)成(chéng)纖維(wéi)細胞(bāo)組成，在不(bù)同物種(zhǒng)（如(rú)小鼠(shǔ)，大鼠和人類(lèi)）中(zhōng)可能略(lüè)有差異。“成纖維細(xì)胞” 指(zhǐ)一類存(cún)在於間質(zhì)中的(dí)異(yì)質性(xìng)高遷移基(jī)質細胞(bāo)，其功(gōng)能和(hé)表型(xíng)具(jù)有(yǒu)組(zǔ)織特異(yì)性。在心髒(zàng)中，心(xīn)髒成(chéng)纖維(wéi)細胞負責維持組(zǔ)織(zhī)穩態並(bìng)調控細胞(bāo)外基質(zhì)（ECM）的更新(xīn)。目前(qián)尚無(wú)完(wán)全特(tè)異性(xìng)的心髒(zàng)成纖維(wéi)細胞分子標誌物，但(dàn)這類(lèi)細(xì)胞通(tōng)常表達轉錄(lù)因子 21（TCF21），波(bō)形蛋白(bái)（vimentin）及(jí) CD90（或 Thy-1）。心肌成纖維細(xì)胞(bāo)在生物學(xué)特(tè)性上(shàng)與(yǔ)肝星狀(zhuàng)細胞(bāo)存(cún)在顯(xiǎn)著共性，二者均以“靜息(xī)-激活”的(dí)功能狀(zhuàng)態轉換為核心特征(zhēng)，且狀(zhuàng)態(tài)轉換緊密關聯細胞的增殖活性(xìng)與功能實現。當受到(dào)應激(jī)或損(sǔn)傷時，成纖維細(xì)胞(bāo)會(huì)失去(qù)正常表(biǎo)型並活(huó)化成(chéng)為(wéi)肌成纖維(wéi)細(xì)胞(bāo)。靜息(xī)心(xīn)肌成纖維細胞的(dí)細胞(bāo)骨(gǔ)架(jià)中(zhōng)不(bù)含 α- 平滑肌(jī)肌動(dòng)蛋(dàn)白(bái)（α-SMA）。與靜(jìng)息(xī)成纖維細(xì)胞不同(tóng)，肌(jī)成(chéng)纖維細胞收(shōu)縮能力(lì)強(qiáng)，其細(xì)胞(bāo)骨(gǔ)架(jià)排(pái)列(liè)特殊(shū)，含有(yǒu)α-SMA陽(yáng)性(xìng)應(yīng)力纖(xiān)維 ，成(chéng)熟黏(nián)著(zhuó)斑(bān)，並(bìng)會增(zēng)加骨(gǔ)膜蛋白（periostin）和纖維(wéi)狀(zhuàng)膠(jiāo)原蛋(dàn)白(bái)的(dí)合(hé)成。有研(yán)究(jiū)表明(míng)，在(zài)模(mó)擬(nǐ)天(tiān)然組織(zhī)特性的(dí)彈性表麵培(péi)養(yǎng)原代成(chéng)纖(xiān)維細胞(bāo)有助於減輕肌成(chéng)纖(xiān)維細胞的活(huó)化。對於心(xīn)肌(jī)組織而(ér)言，彈性模(mó)量(liáng)（E）約為(wéi)7 kPa的培養表麵模(mó)擬(nǐ)健(jiàn)康組織，而(ér)E>10 kPa的(dí)表(biǎo)麵則(zé)被(bèi)視(shì)為(wéi)纖維化(huà)組(zǔ)織。這構成(chéng)了一個(gè)顯(xiǎn)著挑戰(zhàn)，因(yīn)為傳統聚苯乙烯組(zǔ)織培養(yǎng)板的硬度要(yào)高得(dé)多，通常可達E=3 GPa。此(cǐ)外(wài)，雖然傳代(dài)原(yuán)代細胞(bāo)以(yǐ)提(tí)高培(péi)養群體均(jūn)一(yī)性是(shì)常規操作(zuò)，但傳代會進一(yī)步驅動(dòng)肌成纖維細胞活化。原代(dài)心肌成纖維(wéi)細(xì)胞(bāo)在(zài)傳(chuán)統(tǒng)細(xì)胞培(péi)養(yǎng)中(zhōng)接種數(shù)小時內就(jiù)會自發呈現促(cù)纖維化的(dí)活(huó)化(huà)肌(jī)成纖維細胞表(biǎo)型(xíng)。有(yǒu)研究表明，在(zài)低營(yíng)養，低血清(qīng)，細胞(bāo)接(jiē)種(zhǒng)在低生(shēng)物力學(xué)刺(cì)激(jī)的彈(dàn)性(xìng)基質(zhì)（而(ér)非堅硬塑(sù)料）上，可使(shǐ)未(wèi)傳(chuán)代（P0）原(yuán)代心肌成(chéng)纖(xiān)維細胞(bāo)在(zài)體(tǐ)外維持超(chāo)過(guò)72小時，且不會顯(xiǎn)著活(huó)化肌成(chéng)纖維細胞表型(xíng)，但(dàn)其維(wéi)持(chí)效(xiào)果(guǒ)仍(réng)然有限。實驗室(shì)分離的心(xīn)肌成纖維細胞，經(jīng)實驗(yàn)測(cè)試，剛分(fēn)離後(hòu)即立(lì)刻接種在培(péi)養板/爬片，培養24 h約70-90%占比細胞表(biǎo)達Vimentin處於靜(jìng)息態(tài)（其他(tā)處於(yú)激(jī)活態），培(péi)養48 h約>70%轉(zhuǎn)變為(wéi)激活態(tài)，α-SMA表(biǎo)達上升。傳(chuán)代(dài)操(cāo)作(zuò)後大部(bù)分處(chǔ)於(yú)激活態(tài)。該細(xì)胞鑒定(dìng)為接(jiē)種(zhǒng)24 h內靜息態(tài)時刻鑒(jiàn)定（Vimentin/α-SMA），細胞經培(péi)養(yǎng)，運輸(shū)後(hòu)已處於激活(huó)態。

產品名稱	小鼠心(xīn)肌成纖維細(xì)胞	英(yīng)文(wén)名稱	Mouse Cardiac Fibroblasts
組(zǔ)織來(lái)源	心髒(zàng)組織	產(chǎn)品規格(gé)	5×10^5Cells/T25
種(zhǒng)屬(shǔ)	小鼠	生長(cháng)特性	貼壁
細胞形(xíng)態(tài)	成纖維細胞(bāo)樣	貨(huò)號	YS-01X7270

自(zì)備試劑： 0.25%胰蛋(dàn)白(bái)酶(méi)  ，PBS  ，完全(quán)培(péi)養基

培(péi)養基： 小(xiǎo)鼠(shǔ)心肌成纖(xiān)維(wéi)細胞(bāo)完(wán)全培(péi)養(yǎng)基(含FBS，生(shēng)長(cháng)添加劑(jì)，Penicillin，Streptomycin等)

換(huàn)液(yè)頻率(shuài)： 每(měi)2-3天(tiān)換液(yè)一(yī)次

生長特(tè)性： 貼壁(bì)

細胞(bāo)形(xíng)態(tài)： 成(chéng)纖維(wéi)細(xì)胞(bāo)樣

傳(chuán)代比例： 1:2

傳代(dài)特(tè)性： 可傳(chuán)2代左右(yòu)

消化(huà)液(yè)： 0.25%胰(yí)蛋(dàn)白酶(méi)

小鼠心(xīn)肌成纖維細胞體(tǐ)外(wài)培養周期(qī)有(yǒu)限(xiàn)；建議(yì)使(shǐ)用配套(tào)的(dí)專用(yòng)生長培養(yǎng)基(jī)及(jí)正確(què)的(dí)操(cāo)作方(fāng)法來(lái)培養(yǎng)，以(yǐ)此保證該(gāi)細胞的最(zuì)佳(jiā)培(péi)養狀(zhuàng)態(tài)。

方法簡介(jiè) 實(shí)驗室(shì)分(fēn)離的(dí)小鼠(shǔ)心肌成纖(xiān)維(wéi)細胞采(cǎi)用膠(jiāo)原酶-胰蛋白酶聯合(hé)消(xiāo)化結(jié)合差(chà)速貼壁(bì)法製備(bèi)而來(lái)，細胞總(zǒng)量(liáng)約(yuē)為5×10⁵ cells/瓶。

質量檢測(cè) 實驗室(shì)分(fēn)離的小(xiǎo)鼠(shǔ)心(xīn)肌成纖維細(xì)胞(bāo)經Vimentin/α-SMA免疫(yì)熒光鑒定(dìng)，純度(dù)可達90%以上，且不含有HIV-1，HBV，HCV，支(zhī)原(yuán)體，細菌，酵母和真菌(jūn)等。