中(zhōng)文(wén)名(míng)稱：大鼠(shǔ)內(nèi)皮(pí)型一氧(yǎng)化氮合成酶(méi)(eNOS)ELISA試(shì)劑盒
編(biān)號  ：  Y-E1342 
英(yīng)文簡(jiǎn)稱：eNOS ELISA Kit
規(guī)格(gé)：48T／96T 

A
，液體(tǐ)類標本

B
，組(zǔ)織(zhī)匀(yún)漿

 液體類(lèi)標本:  包(bāo)括血(xiě)清(qīng)
，血漿(jiāng)
，尿(niào)液(yè)
，胸(xiōng)腹水(shuǐ)
，腦脊液
，細(xì)胞(bāo)培養(yǎng)上(shàng)清等

組(zǔ)織(zhī)匀漿標本(běn)： 包括動植(zhí)組織收(shōu)集(jí)上(shàng)清

       1.高效
，靈(líng)敏
，特異的抗體(tǐ)；

　　2.穩(wěn)定的(dí)重復性和可靠(kào)性(xìng)；

　　3.吸(xī)附性(xìng)能(néng)好(hǎo)，空白值(zhí)低，孔底透(tòu)明度高的(dí)固相載體(tǐ)；

 樣(yàng)本(běn)實驗準備

1. 血清：

室溫血(xiě)液自然凝固10-20分鐘後，離心20分鐘(zhōng)左右(2000-3000轉/分)
。仔細收(shōu)集上清
。保(bǎo)存(cún)過(guò)程中(zhōng)如有(yǒu)沉澱形成，應(yīng)再(zài)次(cì)離心(xīn)
。

2. 血漿：

應根據標本的要求(qiú)選(xuǎn)擇(zé)EDTA
，檸檬酸鈉或(huò)肝素作為(wéi)抗(kàng)凝劑，混合10-20分鐘(zhōng)後，離心(xīn)20分(fēn)鐘(zhōng)左右(2000-3000轉/分)
。仔(zī)細收集上(shàng)清
。保(bǎo)存過程中如(rú)有(yǒu)沉澱(diàn)形成，應再次離(lí)心(xīn)
。

3. 尿液：

用無菌管(guǎn)收集
。離心20分鐘左(zuǒ)右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)
。仔(zī)細(xì)收集上清
。保存過程中如有(yǒu)沉(chén)澱(diàn)形成，應再次離心
。胸腹水(shuǐ)
，腦(nǎo)脊液參照此實(shí)行
。

4. 細(xì)胞培(péi)養(yǎng)上(shàng)清：

檢測(cè)分泌性的(dí)成份(fèn)時，用(yòng)無菌(jūn)管收集
。離心20分鐘左(zuǒ)右(yòu)(2000-3000轉/分(fēn))
。仔(zī)細(xì)收(shōu)集(jí)上(shàng)清
。

5. 培養(yǎng)細(xì)胞(bāo)

   檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋(shì)細胞(bāo)懸(xuán)液，細胞(bāo)濃度達到100萬/ml左右(yòu)
。通過(guò)反復(fù)凍融或(huò)加(jiā)入組(zǔ)織蛋(dàn)白萃取試劑，以(yǐ)使(shǐ)細胞破壞並(bìng)放出細胞(bāo)內成(chéng)份(fèn)
。離(lí)心20分鐘左右(yòu)(2000-3000轉/分(fēn))
。仔(zī)細收集上清
。保存(cún)過(guò)程中(zhōng)如(rú)有沉澱(diàn)形成(chéng)，應(yīng)再次(cì)離(lí)心(xīn)
。

6. 組(zǔ)織(zhī)標(biāo)本(běn)

   切割標(biāo)本(běn)後(hòu)，稱取重量(liáng)
。加入(rù)一定量(liáng)的PBS，PH7.4
。用液氮迅(xùn)速冷(lěng)凍保存備用
。標(biāo)本(běn)融化(huà)後仍然保持2-8℃的溫度
。加入(rù)一定(dìng)量的PBS(PH7.4)，或(huò)組織(zhī)蛋白萃(cuì)取試劑, 用(yòng)手工或匀漿器將標本(běn)匀(yún)漿化(huà)
。離(lí)心20分鐘(zhōng)左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分(fēn))
。仔(zī)細收(shōu)集上(shàng)清
。分裝後一(yī)份待(dài)檢測，其(qí)餘(yú)冷(lěng)凍備用
。