布(bù)魯氏菌病(bìng)（brucellosis）又(yòu)稱(chēng)地中海弛張(zhāng)熱(rè)，馬(mǎ)耳(ěr)他熱(rè)，波(bō)浪(làng)熱或波
狀熱，是(shì)由(yóu)布(bù)魯氏(shì)菌(Brucellae)引(yǐn)起(qǐ)的(dí)人畜共患性全身(shēn)傳(chuán)染病。布(bù)魯氏菌為(wéi)革
蘭(lán)氏(shì)陰性短小(xiǎo)杆(gān)菌，初次(cì)分離(lí)時(shí)多呈(chéng)球狀(zhuàng)，球(qiú)杆狀和(hé)卵圓形(xíng)，故名。根據宿(sù)主
的不同(tóng)，布(bù)魯氏菌(jūn)分為 10 個種(zhǒng)。目前已知有(yǒu) 60 多種家畜(xù)，家(jiā)禽(qín)，野(yě)生(shēng)動(dòng)物(wù)
是布魯氏(shì)菌的宿主(zhǔ)。與人(rén)類(lèi)有關(guān)的(dí)傳(chuán)染(rǎn)源(yuán)主要是(shì)牛布(bù)魯氏(shì)菌（Brucella
abortus），羊布魯氏(shì)菌(jūn)（Brucella melitensis）及豬布(bù)魯氏菌（Brucella
suis）。臨(lín)床(chuáng)上以羊(yáng)，牛(niú)，豬三種意(yì)義(yì)最大，羊種致病(bìng)力最強。因(yīn)此基於(yú) PCR
的(dí)快速(sù)檢(jiǎn)測(cè)羊(yáng)，牛(niú)，豬(zhū)種(zhǒng)布魯(lǔ)氏(shì)菌(jūn)病具有重要的應用(yòng)價值(zhí)。本(běn)產(chǎn)品就(jiù)是專(zhuān)門用
於(yú)檢測羊(yáng)，牛，豬種(zhǒng)布魯(lǔ)氏(shì)菌病的 PCR 試劑盒，它具(jù)有(yǒu)下(xià)列特點(diǎn)：
1. BA，BM 和 BS 分別用於(yú)定(dìng)性檢(jiǎn)測牛，羊，豬布魯(lǔ)氏菌病，靈敏度遠高於
ELISA 檢測法(fǎ)。
2. 專一性(xìng)強(qiáng)，能(néng)分(fēn)別檢測到各(gè)菌的幾乎(hū)所(suǒ)有(yǒu)亞(yà)型。
3. 引物根據(jù)全基因序列設(shè)計(jì)，特異性高。
4. 使(shǐ)用即用型 PCR 試劑盒，減(jiǎn)少了(liǎo)操作步(bù)驟(zhòu)，降低(dī)了操(cāo)作(zuò)誤差(chà)。

運輸及(jí)保存(cún):

使(shǐ)用方(fāng)法:

一，樣品(pǐn) DNA 的製(zhì)備
用自選方法純化待測樣品(pǐn)的(dí) DNA，也可以(yǐ)另購本(běn)公(gōng)司(sī)的細菌 DNAout 或(huò)
柱式細菌 DNAout，上(shàng)述兩款產(chǎn)品跟本試(shì)劑盒兼容(róng)。
二(èr)，陽(yáng)性對照
1. 為增加產品(pǐn)穩定性和(hé)避(bì)免(miǎn)擴散(sàn)傳(chuán)染性(xìng)病原(yuán)，本產(chǎn)品不(bù)提供活體(tǐ)細(xì)菌做(zuò)陽性
對(duì)照，隻(zhī)提供(gōng)沒(méi)有(yǒu)傳染(rǎn)性(xìng)的，可以(yǐ)直(zhí)接(jiē)使(shǐ)用的(dí) DNA 片段作(zuò)為陽性(xìng)對(duì)照。
2. 使用本陽(yáng)性對照(zhào)時，由(yóu)於其濃度(dù)較高，一定(dìng)要(yào)注意(yì)不要汙(wū)染其(qí)他試(shì)劑和成
分(fēn)。最好(hǎo)在專(zhuān)門的(dí)區域操作(zuò)。
三，設置 PCR 反應（60 uL 體(tǐ)係）
3. 在(zài) PCR 管中加入下(xià)列成分(fēn)：
成(chéng) 份 樣品 陽性對照 陰性(xìng)對照(zhào)
牛，羊，豬(zhū)布(bù)魯(lǔ)氏菌專(zhuān)一性(xìng)引(yǐn)物(wù)對
（三種之(zhī)一） 2 uL 2 uL 2 uL
樣品(pǐn) DNA 1-5 uL 無(wú) 無
牛(niú)，羊，豬布(bù)魯氏菌(jūn)陽性對照
（三種(zhǒng)之一(yī)） 無 2 uL 無(wú)
補(bǔ)超純水到 30 uL 30 uL 30uL
即用型(xíng) PCR Mix 3.0 30 uL 30 uL 30 uL
4. 輕柔混匀後上(shàng)機，按(àn)下麵參數(shù)進行 PCR。
過程(chéng) 溫度(dù) 時(shí)間
預(yù)變(biàn)性 95℃ 5 min
PCR 反應
（40 個(gè)循環）
95℃ 1 min
55℃ 1 min
72℃ 3 min
延(yán)伸(shēn) 72℃ 10 min
5. 電泳檢(jiǎn)測 PCR 產物。BA 預期(qī)的(dí) PCR 產(chǎn)物長(cháng)度為 783 bp；BM 預期(qī)的(dí)
PCR 產(chǎn)物長度(dù)為 162 bp；BS 預期(qī)的(dí) PCR 產物長(cháng)度為 393 bp。