技術文獻
技術(shù)文獻
凍存(cún)細(xì)胞係以(yǐ)備將(jiāng)來之用(yòng)時,必須遵守以下(xià)原則。與(yǔ)其他(tā)細(xì)胞培養操(cāo)作一樣,我(wǒ)們(mén)建(jiàn)議(yì)您嚴格遵守(shǒu)您所用細胞係(xì)附(fù)帶(dài)的(dí)操作說明,以便獲(huò)得(dé)最佳結(jié)果(guǒ)。
1)在(zài)高細胞濃度情(qíng)況下進行(háng)培養細胞(bāo)的凍(dòng)存(cún),並(bìng)且細(xì)胞(bāo)傳代次數盡(jìn)可(kě)能少。確保(bǎo)凍(dòng)存前活細胞百分比至(zhì)少為90%。請注意(yì)最佳凍(dòng)存(cún)條(tiáo)件(jiàn)取決(jué)於所用(yòng)細(xì)胞係。
2)細胞應(yīng)緩慢冷凍,可使(shǐ)用可控(kòng)製降溫速(sù)度(dù)的低溫(wēn)冰箱或(huò)者低(dī)溫冷凍容器使溫(wēn)度每(měi)分鐘大(dà)約降(jiàng)低1°C。
3)必須(xū)使用(yòng)推薦(jiàn)的凍(dòng)存培養(yǎng)基(jī)。凍存(cún)培養(yǎng)基中應(yīng)含(hán)有 DMSO 或者甘油等冷(lěng)凍(dòng)保(bǎo)護劑
4)將冷(lěng)凍的細胞於 -70°C 以下溫(wēn)度(dù)儲(chǔ)存(cún);溫(wēn)度(dù)高於 -50°C 時,冷凍(dòng)的細(xì)胞將(jiāng)開始變(biàn)質(zhì)。
5)必須使(shǐ)用無(wú)菌(jūn)凍(dòng)存管儲存(cún)冷凍(dòng)的細胞。裝(zhuāng)有冷凍(dòng)細(xì)胞(bāo)的(dí)凍存(cún)管可(kě)浸(jìn)於(yú)液(yè)氮(dàn)或(huò)者在液氮(dàn)上方(fāng)的氣相空間內保存
6)必須穿(chuān)戴個人防護設(shè)備。
7)所(suǒ)有與(yǔ)細(xì)胞(bāo)接觸的(dí)溶(róng)液和設(shè)備均應(yīng)為無菌狀(zhuàng)態。必(bì)須采(cǎi)用正確的無菌技術(shù),並(bìng)且(qiě)在(zài)層流通風櫥內(nèi)進行。
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