轉基(jī)因植物Bar基因(yīn)核酸檢測試劑盒(hé)應用案例(lì)：
樣品 DNA 的製備
1.用自(zì)選(xuǎn)方法純(chún)化樣(yàng)品(pǐn)的 DNA，本(běn)試(shì)劑盒跟(gēn)市場(cháng)上(shàng)大(dà)多(duō)數病毒 DNA 提取試劑盒(hé)兼(jiān) 容(róng)。。也可(kě)以選(xuǎn)購(gòu)本公司的(dí)一管(guǎn)式病毒(dú) DNAout 或其(qí)升級版柱(zhù)式病毒 DNAout。 本(běn)試(shì)劑(jì)盒免費贈(zèng)送 15 次 DNA 病(bìng)毒(dú)裂解液試(shì)用(yòng)裝(zhuāng)（一管式(shì)病(bìng)毒 DNAout 的成分）。
稀釋陽(yáng)性對照（以 10E2-10E7 這 6 個(gè) 10 倍(bèi)稀釋(shì)度(dù)為例。由(yóu)於標準(zhǔn)品濃度非(fēi)常(cháng)高(gāo)，因此下列(liè)稀釋操作(zuò)一(yī)定(dìng)要在獨(dú)立的區域(yù)進行(háng)，千萬不能(néng)汙(wū)染樣品(pǐn)或(huò)本試(shì)劑盒(hé)的其(qí)他成分(fēn)）。為(wéi)增(zēng)加產品穩(wěn)定性和(hé)避免(miǎn)擴散傳染(rǎn)性病原，本產品不提供活(huó)體樣品做(zuò)陽(yáng)性對(duì)照(zhào)，隻提供可以(yǐ)直接(jiē)使用的長為 86bp 的(dí) DNA 片段作為陽性對照。
2.標(biāo)記(jì) 6 個(gè)離心管，分別(bié)為 7，6，5，4，3，2。
3.用帶芯(xīn)槍頭分(fēn)別加入 45 μL 模板稀(xī)釋(shì)液（用(yòng)帶芯槍頭，下(xià)同）。
4.在(zài) 7 號管中(zhōng)加入 5 μL 1×10E8 拷貝(bèi)/μL 的陽性對(duì)照(zhào)，充(chōng)分(fēn)震蕩(dàng) 1 分鐘(zhōng)，得1×10E7 拷(kǎo)貝/μL 的(dí)陽性(xìng)對(duì)照。放(fàng)冰上(shàng)待(dài)用(yòng)。5.換槍(qiāng)頭(tóu)，在(zài) 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上(shàng)步(bù)稀釋所得)，充分震(zhèn)蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷(kǎo)貝(bèi)/μL 的(dí)陽性對照。放冰上(shàng)待用。
6.換槍頭(tóu)，在 5 號(hào)管中加入(rù) 5 μL 1×10E6 拷(kǎo)貝(bèi)/μL 的陽性對(duì)照到(dào) 5 號(hào)管(guǎn)中(zhōng)，充分(fēn)震(zhèn)蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放(fàng)冰(bīng)上待用。
7.換(huàn)槍(qiāng)頭，在(zài) 4 號管(guǎn)中加(jiā) 5 μL 1×10E5 拷貝(bèi)/μL 的陽性對照到 4 號管(guǎn)中(zhōng)，得(dé)1×10E4 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放(fàng)冰(bīng)上待(dài)用。
8.重復(fù)上(shàng)麵的(dí)操作(zuò)直到得到 6 個稀釋(shì)度(dù)的(dí)陽性對照(zhào)。放冰上待(dài)用。設(shè)置 qPCR 反(fǎn)應(yīng)（20  μL 體係(xì)，在(zài)樣(yàng)品製備室進(jìn)行(háng)）
9.在(zài) PCR 管中(zhōng)加入下(xià)列(liè)成(chéng)分。