蝙(biān)蝠(fú)皮(pí)質(zhì)酮;腎上腺(xiàn)酮ELISA檢(jiǎn)測試劑(jì)盒的優(yōu)勢：
1，專(zhuān)業的(dí)elisa試(shì)劑(jì)盒生(shēng)產(chǎn)企業(yè)(Elisa檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒廠家(jiā))
2，原裝進口(kǒu)抗體－－－－高(gāo)效，靈(líng)敏(mǐn)，特(tè)異
3，規範包被操(cāo)作－－－－吸附均匀，吸附性好，空白值低(dī)，孔底透明度高
4，先進的(dí)優(yōu)化方案－－－－重復性高，可靠性(xìng)強(qiáng)
5，購(gòu)買(mǎi)本公(gōng)司(sī)的ELISA試劑(jì)盒，免費代檢測，北京地區(qū)免(miǎn)費上(shàng)門(mén)取樣(yàng)
6，技術(shù)服(fú)務(wù)要求(qiú)：專(zhuān)業(yè)，規範，高(gāo)效(xiào)
7，適(shì)用(yòng)於血漿，血清(qīng)，組織(zhī)匀(yún)漿液，細胞培(péi)養(yǎng)上(shàng)清液，尿液等多種(zhǒng)類型的樣(yàng)本(běn)
樣(yàng)本處(chǔ)理及要求：
 
1. 血清：室溫血(xiě)液自然凝固10-20分鐘(zhōng)，離(lí)心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔(zī)細收集(jí)上清，保存過(guò)程中(zhōng)如(rú)出(chū)現(xiàn)沉(chén)澱(diàn)，應再次離心。
2. 血漿：應根據標本(běn)的要求(qiú)選擇EDTA或(huò)檸檬酸鈉(nà)作為抗(kàng)凝劑(jì)，混合10-20分鐘後(hòu)，離(lí)心20分鐘(zhōng)左右(yòu)（2000-3000轉/分(fēn)）。仔細(xì)收集(jí)上(shàng)清，保(bǎo)存(cún)過程(chéng)中如(rú)有沉(chén)澱形(xíng)成，應(yīng)該(gāi)再(zài)次(cì)離(lí)心。
 
3. 尿(niào)液(yè)：用無菌管收集，離心(xīn)20分鐘(zhōng)左右(yòu)（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集(jí)上清(qīng)，保(bǎo)存過程中(zhōng)如有(yǒu)沉(chén)澱形(xíng)成，應再次離(lí)心(xīn)。胸腹(fù)水，腦脊(jǐ)液參(cān)照(zhào)實(shí)行(háng)。
 
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上(shàng)清：檢(jiǎn)測分(fēn)泌性的成份時，用無菌管(guǎn)收集(jí)。離心20分鐘左(zuǒ)右（2000-3000轉/分）。仔(zī)細(xì)收(shōu)集上(shàng)清(qīng)。檢測(cè)細胞內的(dí)成(chéng)份(fèn)時，用(yòng)PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞(bāo)懸液，細(xì)胞濃度達到
 
100萬/ml左右(yòu)。通過(guò)反復凍融(róng)，以使細(xì)胞(bāo)破壞並放出細(xì)胞(bāo)內成份(fèn)。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔(zī)細(xì)收(shōu)集上清。保(bǎo)存過程(chéng)中(zhōng)如有沉(chén)澱形(xíng)成(chéng)，應(yīng)再次(cì)離心(xīn)。
 
5. 組織(zhī)標本：切割標本後(hòu)，稱取(qǔ)重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液(yè)氮(dàn)迅速(sù)冷凍保存備用(yòng)。標(biāo)本融化後仍然(rán)保(bǎo)持(chí)2-8℃的(dí)溫(wēn)度。加(jiā)入(rù)一(yī)定(dìng)量的PBS（PH7.4），用手(shǒu)工或匀漿器將(jiāng)標(biāo)本匀漿(jiāng)充分(fēn)。離心(xīn)20分鐘(zhōng)左(zuǒ)右（2000-3000轉/分）。仔細(xì)收(shōu)集(jí)上清。分(fēn)裝(zhuāng)後(hòu)一份待(dài)檢測(cè)，其餘冷(lěng)凍(dòng)備用。
 
6. 標(biāo)本(běn)采(cǎi)集後(hòu)盡早進行提(tí)取，提取(qǔ)按相(xiāng)關文獻進(jìn)行(háng)，提取(qǔ)後應盡快進(jìn)行(háng)實驗。若不能馬上(shàng)進(jìn)行試驗(yàn)，可(kě)將(jiāng)標本(běn)放於(yú)-20℃保存，但(dàn)應避免(miǎn)反(fǎn)復凍融.
 
7. 不(bù)能(néng)檢測(cè)含NaN3的樣(yàng)品，因NaN3抑(yì)製辣根過(guò)氧(yǎng)化(huà)物(wù)酶的（HRP）活性。
操作步(bù)驟
 
1. 標(biāo)準品的稀釋與(yǔ)加樣(yàng)：在(zài)酶(méi)標包被板上設標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔(kǒng)，在(zài)di一，第二孔中分(fēn)別(bié)加標準品100μl，然後(hòu)在di一，第二孔(kǒng)中加(jiā)標準品(pǐn)稀(xī)釋液50μl，混匀；然後(hòu)從di一孔(kǒng)，第(dì)二孔中各取100μl分(fēn)別加(jiā)到(dào)第三孔(kǒng)和(hé)第(dì)四孔，再在第三，第(dì)四孔分(fēn)別(bié)加標準品稀釋(shì)液(yè)50μl，混匀；然後在第三(sān)孔和第(dì)四(sì)孔中(zhōng)先(xiān)各取50μl棄掉(diào)，再各取(qǔ)50μl分別加(jiā)到第(dì)五，第(dì)六孔中，再在(zài)第五，第六(liù)孔中分別加(jiā)標準(zhǔn)品稀釋(shì)液(yè)50ul，混匀(yún)；混匀(yún)後(hòu)從第五(wǔ)，第六(liù)孔中(zhōng)各取(qǔ)50μl分(fēn)別(bié)加(jiā)到(dào)第七(qī)，第(dì)八(bā)孔中(zhōng)，再在(zài)第(dì)七(qī)，第(dì)八孔中(zhōng)分(fēn)別(bié)加(jiā)標(biāo)準品稀釋(shì)液(yè)50μl，混(hùn)匀後從第七，第八孔中(zhōng)分(fēn)別取(qǔ)50μl加到第九(jiǔ)，第十孔(kǒng)中(zhōng)，再(zài)在第九第(dì)十(shí)孔分別加標準品(pǐn)稀(xī)釋(shì)液50μl，混(hùn)匀(yún)後從第九第十(shí)孔(kǒng)中(zhōng)各取50μl棄掉。（稀(xī)釋(shì)後各孔加樣量都為(wéi)50μl，濃度分別為(wéi)180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。
2. 加樣(yàng)：分別設空白(bái)孔（空(kōng)白(bái)對照孔不加樣品及(jí)酶(méi)標試劑，其餘(yú)各步(bù)操作(zuò)相同），待測樣品孔。在酶(méi)標包(bāo)被板上(shàng)待測(cè)樣(yàng)品(pǐn)孔中(zhōng)先加樣(yàng)品(pǐn)稀釋液40μl，然(rán)後再(zài)加(jiā)待(dài)測樣(yàng)品10μl（樣(yàng)品最(zuì)終(zhōng)稀釋度(dù)為5倍）。加(jiā)樣(yàng)將(jiāng)樣品加於酶(méi)標(biāo)板(bǎn)孔底(dǐ)部(bù)，盡(jìn)量不(bù)觸(chù)及孔(kǒng)壁，輕(qīng)輕晃動(dòng)混(hùn)匀(yún)。
3. 溫育：用(yòng)封板(bǎn)膜封(fēng)板後置(zhì)37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30（48T的(dí)20倍(bèi)）倍(bèi)濃(nóng)縮洗滌(dí)液用蒸餾水30（48T的(dí)20倍）倍(bèi)稀釋後(hòu)備用(yòng)。
5. 洗(xǐ)滌：小心揭掉封板(bǎn)膜，棄去(qù)液體，甩幹，每孔(kǒng)加(jiā)滿(mǎn)洗滌液，靜置(zhì)30秒後棄去(qù)，如此(cǐ)重復5次(cì)，拍幹。
6. 加(jiā)酶(méi)：每孔加入酶(méi)標(biāo)試(shì)劑(jì)50μl，空(kōng)白(bái)孔(kǒng)除外(wài)。
7. 溫育：操(cāo)作同3。
8. 洗(xǐ)滌：操(cāo)作同(tóng)5。
9. 顯(xiǎn)色：每孔(kǒng)先加入顯色(sè)劑(jì)A50μl，再(zài)加入(rù)顯色劑B50μl，輕(qīng)輕(qīng)震(zhèn)蕩混(hùn)匀，37℃避(bì)光(guāng)顯色15分(fēn)鐘(zhōng).
10. 終止(zhǐ)：每(měi)孔(kǒng)加終(zhōng)止液50μl，終(zhōng)止(zhǐ)反應（此(cǐ)時藍(lán)色(sè)立(lì)轉黃色(sè)）。
11. 測定(dìng)：以空白(bái)空(kōng)調(tiáo)零，450nm波長依序(xù)測量各(gè)孔(kǒng)的(dí)吸光度(dù)（OD值）。 測定(dìng)應在加終止液後(hòu)15分鐘。
注意事(shì)項
 
1. 試劑盒(hé)從冷(lěng)藏環(huán)境(jìng)中取(qǔ)出(chū)應(yīng)在室(shì)溫平(píng)衡(héng)15-30 分(fēn)鐘(zhōng)後(hòu)方可使(shǐ)用，酶標包被(bèi)板開(kāi)封(fēng)後如(rú)未用(yòng)完，板條(tiáo)應裝入密(mì)封(fēng)袋(dài)中(zhōng)保(bǎo)存。
 
2. 濃洗滌液可(kě)能(néng)會(huì)有(yǒu)結晶析出，稀釋時(shí)可在(zài)水(shuǐ)浴中加溫助溶，洗(xǐ)滌(dí)時不(bù)影(yǐng)響(xiǎng)結(jié)果(guǒ)。
 
3. 各步加樣均(jūn)應(yīng)使用加樣器，並(bìng)經常(cháng)校對其(qí)準確性，以避(bì)免試驗誤差。一(yī)次(cì)加樣時(shí)間zui好控(kòng)製在(zài)5 分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦(jiàn)使(shǐ)用(yòng)排槍(qiāng)加(jiā)樣(yàng)。
 
4. 封板膜隻(zhī)限一次(cì)性使用(yòng)，以(yǐ)避免(miǎn)交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染。
 
5. 底物(wù)請避光(guāng)保存(cún)。
 
6. 嚴格按照(zhào)說明書的(dí)操作進(jìn)行，試(shì)驗結果(guǒ)判定(dìng)必須以(yǐ)酶標儀讀數(shù)為準.
 
7. 所有樣品(pǐn)，洗滌液(yè)和(hé)各(gè)種(zhǒng)廢棄物(wù)都(dū)應按(àn)傳染物處(chǔ)理(lǐ)。
 
8. 本試(shì)劑(jì)不(bù)同(tóng)批(pī)號(hào)組(zǔ)分(fēn)不得(dé)混用。
 
9.如需代測或者(zhě)樣本暫時不測(cè)定(dìng)，可立(lì)即(jí)低溫(wēn)凍(dòng)存，溫度(dù)越低(dī)越(yuè)好(hǎo)，中間避免反(fǎn)復凍融，-20℃以下(xià)可(kě)保(bǎo)存三個月(yuè),-70℃以(yǐ)下可(kě)保(bǎo)存六(liù)個月(yuè)。
10.試(shì)劑(jì)使用(yòng)須(xū)知(zhī)：
11.（1）請(qǐng)參(cān)照相(xiāng)關法(fǎ)規(guī)，文獻，MSDS等信息，理解並掌握好試(shì)劑的特性，再(zài)進(jìn)行安(ān)全操(cāo)作。
12.（2）通常(cháng)購買試(shì)劑時一定(dìng)要想到(dào)一次(cì)性用完(wán)。若(ruò)估(gū)算不(bù)足有(yǒu)剩餘的(dí)話(huà)，更(gēng)加(jiā)注意(yì)其他(tā)保管(guǎn)和管理(lǐ)。
13.（3）萬(wàn)一試(shì)劑(jì)操作(zuò)者並非專業技術(shù)人員。必(bì)須(xū)在專業人(rén)士的指導(dǎo)監(jiān)督下(xià)進行操作。對(duì)於使用(yòng)後(hòu)的廢棄物(wù)，不(bù)要(yào)或者(zhě)舊(jiù)的試(shì)劑，應按照(zhào)相關法律(lǜ)法(fǎ)規正當處理。
14.（4）購(gòu)買後(hòu)，請(qǐng)務必(bì)確(què)認(rèn)標簽(qiān)上的注意事(shì)項(xiàng)；做好預(yù)防(fáng)顛(diān)倒，摔壞(huài)的措施和管(guǎn)理(lǐ)體製；在(zài)使用前再(zài)次(cì)確認標(biāo)簽(qiān)上的注意事(shì)項(xiàng)，做(zuò)好必要的安全對策；對沒有標(biāo)明其危(wēi)害特性(xìng)，有害特性的(dí)，也要慎重地(dì)進行操作(zuò)；必須帶(dài)好(hǎo)防護(hù)用(yòng)具，小心翼翼進行(háng)操(cāo)作。