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技術文獻(xiàn)

人血漿纖維連接蛋(dàn)白(bái)(pFN)ELISA試劑(jì)盒操作步(bù)驟

文(wén)字:[大][中][小] 2021-7-8    瀏覽次數:890    

人血漿纖維(wéi)連(lián)接蛋(dàn)白(bái)(pFN)ELISA試劑(jì)盒操作(zuò)步驟:


1. 標(biāo)準品的(dí)稀(xī)釋(shì)與加(jiā)樣(yàng):在酶標包被(bèi)板(bǎn)上設標(biāo)準(zhǔn)品(pǐn)孔(kǒng)10孔,在di一,第二孔中分別加標準(zhǔn)品100μl,然後在di一(yī),第二孔中加(jiā)標準品稀(xī)釋液50μl,混(hùn)匀(yún);然(rán)後從(cóng)di一(yī)孔,第(dì)二(èr)孔(kǒng)中(zhōng)各(gè)取(qǔ)100μl分(fēn)別(bié)加到(dào)第(dì)三(sān)孔和(hé)第四(sì)孔(kǒng),再在第(dì)三,第四孔分(fēn)別(bié)加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混匀(yún);然後在(zài)第三孔和第(dì)四孔中先各取50μl棄(qì)掉(diào),再各取(qǔ)50μl分別(bié)加(jiā)到第(dì)五(wǔ),第(dì)六(liù)孔中(zhōng),再(zài)在(zài)第五,第六孔中(zhōng)分(fēn)別加(jiā)標(biāo)準品稀(xī)釋(shì)液(yè)50ul,混匀;混(hùn)匀後從(cóng)第五,第六(liù)孔中(zhōng)各(gè)取(qǔ)50μl分別加(jiā)到第七,第八孔(kǒng)中,再(zài)在第七(qī),第八孔(kǒng)中(zhōng)分別(bié)加(jiā)標準(zhǔn)品稀釋液50μl,混匀後(hòu)從(cóng)第七(qī),第八孔(kǒng)中分別(bié)取50μl加(jiā)到第(dì)九(jiǔ),第(dì)十(shí)孔(kǒng)中(zhōng),再(zài)在(zài)第九第(dì)十(shí)孔分別(bié)加(jiā)標(biāo)準品稀釋(shì)液50μl,混匀後從第(dì)九(jiǔ)第十孔中(zhōng)各取50μl棄掉。(稀釋(shì)後各孔(kǒng)加(jiā)樣量(liáng)都為50μl,濃度(dù)分(fēn)別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加(jiā)樣:分別設(shè)空(kōng)白(bái)孔(空(kōng)白對照(zhào)孔不加(jiā)樣(yàng)品(pǐn)及(jí)酶標試(shì)劑(jì),其餘各步(bù)操(cāo)作相同(tóng)),待測樣(yàng)品孔(kǒng)。在(zài)酶標(biāo)包被(bèi)板(bǎn)上(shàng)待測樣(yàng)品孔中先(xiān)加(jiā)樣品稀釋(shì)液40μl,然(rán)後再加待(dài)測樣品(pǐn)10μl(樣品最終稀釋(shì)度為(wéi)5倍)。加(jiā)樣將樣品(pǐn)加(jiā)於酶(méi)標(biāo)板孔(kǒng)底(dǐ)部,盡(jìn)量不觸(chù)及孔(kǒng)壁(bì),輕(qīng)輕晃動混匀(yún)。

3. 溫(wēn)育(yù):用(yòng)封(fēng)板(bǎn)膜(mó)封板後置37℃溫育30分鐘(zhōng)。

4. 配液:將(jiāng)30(48T的(dí)20倍(bèi))倍濃(nóng)縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍(bèi)稀釋(shì)後(hòu)備用。

5. 洗滌:小(xiǎo)心(xīn)揭(jiē)掉封板(bǎn)膜(mó),棄(qì)去(qù)液體(tǐ),甩幹,每(měi)孔加(jiā)滿(mǎn)洗(xǐ)滌(dí)液(yè),靜置30秒後棄去(qù),如(rú)此重(zhòng)復5次,拍幹(gān)。

6. 加酶:每孔(kǒng)加(jiā)入(rù)酶標(biāo)試劑50μl,空白(bái)孔除外。

7. 溫(wēn)育(yù):操(cāo)作同3。

8. 洗(xǐ)滌:操作(zuò)同(tóng)5。

9. 顯(xiǎn)色(sè):每孔先加(jiā)入(rù)顯色劑A50μl,再(zài)加(jiā)入顯(xiǎn)色劑(jì)B50μl,輕(qīng)輕震蕩混匀,37℃避(bì)光(guāng)顯(xiǎn)色15分(fēn)鐘(zhōng).

10. 終止:每孔(kǒng)加(jiā)終止(zhǐ)液(yè)50μl,終止(zhǐ)反(fǎn)應(此時(shí)藍(lán)色(sè)立轉(zhuǎn)黃(huáng)色)。

11. 測定:以空白(bái)空調零,450nm波長依序(xù)測(cè)量各(gè)孔(kǒng)的(dí)吸(xī)光度(dù)(OD值(zhí))。 測(cè)定應(yīng)在加終止液(yè)後(hòu)15分鐘。

小(xiǎo)鼠(shǔ)淋巴細胞功(gōng)能相關抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試(shì)劑盒

小鼠亮(liàng)氨酸腦啡肽(tài)(Leu-ENK)ELISA試劑(jì)盒

小(xiǎo)鼠(shǔ)粒細(xì)胞巨(jù)噬細(xì)胞集(jí)落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑(jì)盒(hé)

小鼠粒(lì)細胞集(jí)落(là)刺(cì)激因(yīn)子(zǐ)(G-CSF)ELISA試劑(jì)盒(hé)

小鼠酪氨酸羥化酶(TH)ELISA試(shì)劑盒

小鼠跨膜(mó)蛋白97(TMEM97/MAC30)ELISA試劑盒

小(xiǎo)鼠(shǔ)克(kè)拉拉細(xì)胞蛋白(bái)(CC16)ELISA試劑盒

小(xiǎo)鼠可溶(róng)性(xìng)腫瘤壞(huài)死(sǐ)因子相(xiāng)關凋亡誘導(dǎo)配體(tǐ)(sTRAIL)ELISA試劑盒(hé)

小鼠(shǔ)可(kě)溶性(xìng)血小(xiǎo)板(bǎn)內皮(pí)細胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑(jì)盒(hé)

小(xiǎo)鼠可溶性(xìng)血(xiě)栓調(tiáo)節蛋(dàn)白(sTM)ELISA試劑盒

小(xiǎo)鼠可溶性(xìng)血凝(níng)素樣氧(yǎng)化低密度(dù)脂蛋(dàn)白受體(tǐ)1(sLOX-1)ELISA試(shì)劑盒(hé)

小鼠可(kě)溶性血(xiě)管內(nèi)皮(pí)細(xì)胞(bāo)蛋白C受體(sEPCR)ELISA試(shì)劑(jì)盒(hé)

小鼠(shǔ)可(kě)溶性血管內皮(pí)生長(cháng)因(yīn)子受體1(sVEGF R1/sFlt1)ELISA試(shì)劑(jì)盒

小鼠(shǔ)可溶(róng)性(xìng)細胞(bāo)間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒(hé)

小(xiǎo)鼠可(kě)溶(róng)性髓(suǐ)係細胞(bāo)觸(chù)發受(shòu)體(tǐ)-1(sTREM-1)ELISA試(shì)劑(jì)盒

小鼠(shǔ)可溶(róng)性(xìng)瘦素(sù)受(shòu)體(sLR)ELISA試(shì)劑(jì)盒(hé)


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