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人(rén)抗腎(shèn)小球基底(dǐ)膜(mó)抗(kàng)體elisa檢測試(shì)劑盒樣本(běn)處理(lǐ)及要求
人抗(kàng)腎(shèn)小(xiǎo)球基(jī)底(dǐ)膜抗體elisa檢測試劑盒樣(yàng)本處理(lǐ)及要求(qiú):
1. 血清:室溫血(xiě)液自然凝固10-20分鐘(zhōng),離(lí)心20分鐘左右(yòu)(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清(qīng),保存(cún)過程中如出現沉澱,應再次(cì)離心(xīn)。
2. 血(xiě)漿:應(yīng)根據標本(běn)的(dí)要(yào)求選擇EDTA或(huò)檸(níng)檬酸鈉作(zuò)為抗凝(níng)劑(jì),混(hùn)合(hé)10-20分(fēn)鐘後(hòu),離(lí)心(xīn)20分鐘(zhōng)左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分(fēn))。仔細(xì)收集上(shàng)清,保存過程中如(rú)有沉澱(diàn)形成,應該(gāi)再次離心(xīn)。
3. 尿液(yè):用無菌(jūn)管收(shōu)集,離心(xīn)20分鐘左右(yòu)(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔(zī)細(xì)收集上清,保(bǎo)存(cún)過(guò)程中如有沉澱形成,應(yīng)再次離心(xīn)。胸腹水,腦脊(jǐ)液參(cān)照(zhào)實行(háng)。
4. 細胞(bāo)培養上(shàng)清(qīng):檢(jiǎn)測分泌性的(dí)成(chéng)份(fèn)時,用無菌(jūn)管(guǎn)收(shōu)集。離(lí)心20分(fēn)鐘左右(2000-3000轉/分(fēn))。仔(zī)細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞(bāo)內(nèi)的成(chéng)份時,用(yòng)PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸(xuán)液,細(xì)胞(bāo)濃度(dù)達到
100萬(wàn)/ml左右。通(tōng)過反(fǎn)復凍融,以(yǐ)使細(xì)胞破(pò)壞並(bìng)放出細胞(bāo)內成份(fèn)。離心20分(fēn)鐘(zhōng)左右(yòu)(2000-3000轉(zhuǎn)/分(fēn))。仔細收集(jí)上(shàng)清。保(bǎo)存過(guò)程中(zhōng)如(rú)有沉澱形成,應再次離(lí)心。
5. 組(zǔ)織標本:切(qiē)割標本(běn)後(hòu),稱(chēng)取重(zhòng)量。加入(rù)一(yī)定量(liáng)的PBS,PH7.4。用(yòng)液(yè)氮(dàn)迅(xùn)速冷(lěng)凍(dòng)保(bǎo)存備用(yòng)。標本融化後(hòu)仍(réng)然(rán)保(bǎo)持2-8℃的溫(wēn)度。加(jiā)入(rù)一定(dìng)量的PBS(PH7.4),用(yòng)手(shǒu)工(gōng)或匀漿(jiāng)器將(jiāng)標本匀漿充分。離心(xīn)20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔(zī)細收(shōu)集上清。分裝後一(yī)份(fèn)待檢(jiǎn)測,其餘冷(lěng)凍備用。
6. 標本采集(jí)後(hòu)盡早進行提(tí)取,提取按(àn)相關(guān)文(wén)獻(xiàn)進行(háng),提(tí)取後(hòu)應(yīng)盡快進行(háng)實驗。若(ruò)不(bù)能(néng)馬(mǎ)上進行(háng)試驗(yàn),可將標本(běn)放於(yú)-20℃保存,但應(yīng)避免反復凍(dòng)融.
7. 不能(néng)檢測(cè)含(hán)NaN3的(dí)樣(yàng)品,因(yīn)NaN3抑(yì)製(zhì)辣根過(guò)氧(yǎng)化物(wù)酶的(dí)(HRP)活(huó)性。
1. 血清:室溫血(xiě)液自然凝固10-20分鐘(zhōng),離(lí)心20分鐘左右(yòu)(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清(qīng),保存(cún)過程中如出現沉澱,應再次(cì)離心(xīn)。
2. 血(xiě)漿:應(yīng)根據標本(běn)的(dí)要(yào)求選擇EDTA或(huò)檸(níng)檬酸鈉作(zuò)為抗凝(níng)劑(jì),混(hùn)合(hé)10-20分(fēn)鐘後(hòu),離(lí)心(xīn)20分鐘(zhōng)左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分(fēn))。仔細(xì)收集上(shàng)清,保存過程中如(rú)有沉澱(diàn)形成,應該(gāi)再次離心(xīn)。
3. 尿液(yè):用無菌(jūn)管收(shōu)集,離心(xīn)20分鐘左右(yòu)(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔(zī)細(xì)收集上清,保(bǎo)存(cún)過(guò)程中如有沉澱形成,應(yīng)再次離心(xīn)。胸腹水,腦脊(jǐ)液參(cān)照(zhào)實行(háng)。
4. 細胞(bāo)培養上(shàng)清(qīng):檢(jiǎn)測分泌性的(dí)成(chéng)份(fèn)時,用無菌(jūn)管(guǎn)收(shōu)集。離(lí)心20分(fēn)鐘左右(2000-3000轉/分(fēn))。仔(zī)細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞(bāo)內(nèi)的成(chéng)份時,用(yòng)PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸(xuán)液,細(xì)胞(bāo)濃度(dù)達到
100萬(wàn)/ml左右。通(tōng)過反(fǎn)復凍融,以(yǐ)使細(xì)胞破(pò)壞並(bìng)放出細胞(bāo)內成份(fèn)。離心20分(fēn)鐘(zhōng)左右(yòu)(2000-3000轉(zhuǎn)/分(fēn))。仔細收集(jí)上(shàng)清。保(bǎo)存過(guò)程中(zhōng)如(rú)有沉澱形成,應再次離(lí)心。
5. 組(zǔ)織標本:切(qiē)割標本(běn)後(hòu),稱(chēng)取重(zhòng)量。加入(rù)一(yī)定量(liáng)的PBS,PH7.4。用(yòng)液(yè)氮(dàn)迅(xùn)速冷(lěng)凍(dòng)保(bǎo)存備用(yòng)。標本融化後(hòu)仍(réng)然(rán)保(bǎo)持2-8℃的溫(wēn)度。加(jiā)入(rù)一定(dìng)量的PBS(PH7.4),用(yòng)手(shǒu)工(gōng)或匀漿(jiāng)器將(jiāng)標本匀漿充分。離心(xīn)20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔(zī)細收(shōu)集上清。分裝後一(yī)份(fèn)待檢(jiǎn)測,其餘冷(lěng)凍備用。
6. 標本采集(jí)後(hòu)盡早進行提(tí)取,提取按(àn)相關(guān)文(wén)獻(xiàn)進行(háng),提(tí)取後(hòu)應(yīng)盡快進行(háng)實驗。若(ruò)不(bù)能(néng)馬(mǎ)上進行(háng)試驗(yàn),可將標本(běn)放於(yú)-20℃保存,但應(yīng)避免反復凍(dòng)融.
7. 不能(néng)檢測(cè)含(hán)NaN3的(dí)樣(yàng)品,因(yīn)NaN3抑(yì)製(zhì)辣根過(guò)氧(yǎng)化物(wù)酶的(dí)(HRP)活(huó)性。
- 上(shàng)一條(tiáo):人(rén)C1q相關蛋白1ELISA試(shì)劑盒(hé)操作(zuò)步驟
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