產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試劑盒(hé)
商(shāng)品屬性
| 產品名稱 | 英文(wén)名稱(chēng) | 貨(huò)號 |
|
鮑球狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
Abalone Spherical VirusPCR |
YS-P013768 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避光保存(cún)，避(bì)免(miǎn)反復凍融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有效期(qī)：一年
貨期(qī)：現貨PCR試劑盒(hé)的有效期一(yī)般為1年(nián)，這(zhè)是指在(zài)適當的儲存(cún)溫(wēn)度下(xià)。核酸擴增(zēng)部分的試劑一般(bān)要貯存於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分(fēn)試(shì)劑(jì)則(zé)貯存於2-8℃。盡量避免(miǎn)反復凍融(róng)。
【結(jié)果分析條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾值(zhí)綫(xiàn)設定在(zài)剛好(hǎo)超過正(zhèng)常(cháng)陰性質(zhì)控品擴增曲綫的(dí)最高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品的檢測結果(guǒ)應為陽性(xìng)，有明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等於35；
3. 以上要求(qiú)需(xū)在一次實驗(yàn)中同時(shí)滿足(zú)，否則該次實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本(běn)為可(kě)疑樣(yàng)本；對於可疑(yí)樣(yàng)本建議(yì)復(fù)核一(yī)次，若復(fù)核結果Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，則判(pàn)定為陽(yáng)性，否(fǒu)則判定為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均判定(dìng)為陰性樣本。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗室環境(jìng)汙(wū)染，試(shì)劑汙(wū)染，樣品交(jiāo)叉汙染會(huì)出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試劑運(yùn)輸(shū)，保存不(bù)當(dāng)或(huò)試劑(jì)配(pèi)製(zhì)不準(zhǔn)確引起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢(jiǎn)測效能(néng)下降(jiàng)，可(kě)能會(huì)導致出現(xiàn)假陰性結果。
PCR反(fǎn)應的特異性(xìng)：
②鹼基(jī)配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性；
④靶基因(yīn)的特異性與保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
鮑(bào)球(qiú)狀病毒PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé)其中引(yǐn)物與(yǔ)模板的(dí)正(zhèng)確(què)結(jié)合是關鍵。引物與(yǔ)模板的(dí)結(jié)合及引(yǐn)物(wù)鏈的延(yán)伸是遵循鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則的。聚合酶(méi)合成反應(yīng)的忠實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶耐高(gāo)溫性，使(shǐ)反應(yīng)中模板與引物(wù)的(dí)結合(hé)(復性)可(kě)以在較高(gāo)的溫度下(xià)進(jìn)行，結合的特異性大(dà)大(dà)增加，被擴增(zēng)的靶(bǎ)基因片段也就能保(bǎo)持很(hěn)高(gāo)的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再通過(guò)選擇(zé)特異(yì)性和(hé)保(bǎo)守性高的(dí)靶基(jī)因(yīn)區(qū)，其(qí)特(tè)異(yì)性程度就(jiù)更高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產(chǎn)物(wù)的生成量(liáng)是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式增(zēng)加(jiā)的，能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始(shǐ)待(dài)測(cè)模(mó)板擴增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬個(gè)細胞中檢出一個靶(bǎ)細胞；在(zài)病毒的檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏度(dù)可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成單(dān)位(wèi))；在細菌學中zui小檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反應用耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一次性地(dì)將反(fǎn)應液(yè)加好後(hòu)，即在DNA擴增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋上進(jìn)行(háng)變性(xìng)-退火(huǒ)-延伸(shēn)反應(yīng)，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴(kuò)增反應。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分析(xī)，不一(yī)定要用同位素，無(wú)放射(shè)性汙染(rǎn)，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的純度(dù)要求低
不需要(yào)分離病毒或細菌及(jí)培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增模(mó)板。可直(zhí)接用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本如血(xiě)液，體(tǐ)腔液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛發，細(xì)胞，活(huó)PCR技(jì)術概論。
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