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PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
馬(mǎ)腺疫鏈球菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)
| 產品名稱 | 規格 | 貨號(hào) |
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馬(mǎ)腺疫(yì)鏈球菌(jūn)PCR檢測試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015128 |
儲(chǔ)存條(tiáo)件:-20℃避光保存(cún),避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運(yùn)輸:低(dī)溫(wēn),避(bì)光(guāng)。
有效(xiào)期(qī):一年(nián)
貨(huò)期:現貨PCR試劑(jì)盒的有效期一般為(wéi)1年,這是指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的儲(chǔ)存溫度(dù)下(xià)。核酸擴(kuò)增部分(fēn)的(dí)試劑一(yī)般要貯存於(yú)-20℃下,產(chǎn)物(wù)檢測部分(fēn)試劑則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量避免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。

u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng):將閾值綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超過(guò)正常陰(yīn)性(xìng)質控品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最高(gāo)點(diǎn)。
2. 陽性質控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果(guǒ)應為陽性(xìng),有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī),Ct值應小(xiǎo)於等於(yú)35;
3. 以上(shàng)要求(qiú)需(xū)在(zài)一次(cì)實驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足(zú),否則該(gāi)次(cì)實(shí)驗視(shì)為無效。
2.可(kě)疑(yí):有明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴增期(qī),且38≤Ct<40,此時樣本(běn)為可疑樣本;對於可疑(yí)樣本(běn)建議復(fù)核一次,若復(fù)核結果Ct<40且有指(zhǐ)數擴增期,則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng),否則(zé)判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng);
3. 陰性:無(wú)指(zhǐ)數擴增期,Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定為陰(yīn)性樣本。
【對檢驗結果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗室(shì)環境(jìng)汙(wū)染(rǎn),試劑(jì)汙染,樣品(pǐn)交叉(chā)汙染(rǎn)會出(chū)現假陽性(xìng)結果;
2. 試劑運輸,保存不當或(huò)試(shì)劑(jì)配製不準確(què)引(yǐn)起的試劑(jì)檢(jiǎn)測效能下(xià)降,可(kě)能會導致(zhì)出現假陰性(xìng)結(jié)果(guǒ)。

②鹼(jiǎn)基配對(duì)原(yuán)則(zé);
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性;
④靶(bǎ)基因(yīn)的特異性與保守性(xìng)。
馬(mǎ)腺疫(yì)鏈球菌PCR檢測試(shì)劑(jì)盒其中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板的正確結合(hé)是關鍵(jiàn)。引物與模板(bǎn)的結合(hé)及(jí)引物鏈(liàn)的延伸(shēn)是(shì)遵循(xún)鹼基(jī)配對(duì)原則的。聚(jù)合酶合成反應(yīng)的忠實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫(wēn)性,使(shǐ)反應中模板(bǎn)與引(yǐn)物的(dí)結合(復性(xìng))可(kě)以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的溫度下進(jìn)行(háng),結(jié)合的特(tè)異(yì)性大(dà)大增(zēng)加,被(bèi)擴增(zēng)的(dí)靶基因片段也就能保持很高的(dí)正確(què)度(dù)。再通過選(xuǎn)擇特異性(xìng)和保(bǎo)守性高的靶(bǎ)基因(yīn)區,其(qí)特異性程度就更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物的(dí)生成量是(shì)以指數(shù)方式增加的(dí),能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待測模板(bǎn)擴(kuò)增到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬(wàn)個細胞中(zhōng)檢出(chū)一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞;在病毒(dú)的檢測(cè)中,PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單位(wèi));在細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢出(chū)率為(wéi)3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便,快(kuài)速
PCR反應用耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶(méi),一次(cì)性地(dì)將(jiāng)反應液加好(hǎo)後,即(jí)在DNA擴增液和水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變性-退(tuì)火(huǒ)-延伸反應,一般在2~4 小(xiǎo)時完成擴(kuò)增反應。擴(kuò)增(zēng)產物一(yī)般(bān)用電泳分析,不(bù)一(yī)定要用同(tóng)位素(sù),無(wú)放(fàng)射(shè)性汙染,易推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純(chún)度要(yào)求低
不(bù)需(xū)要(yào)分(fēn)離病(bìng)毒或細菌及培養(yǎng)細胞(bāo),DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可(kě)直接(jiē)用(yòng)臨床標(biāo)本如血液(yè),體腔(qiāng)液(yè),洗(xǐ)嗽液,毛發,細胞,活PCR技(jì)術概論。
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