產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
商品(pǐn)屬性
| 產品(pǐn)名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
|
枝頂孢(bāo)黴PCR檢(jiǎn)測試劑盒 |
Acremonium strictumPCR |
YS-P013777 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
儲存條件：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運輸(shū)：低溫，避光(guāng)。
有效期(qī)：一(yī)年(nián)
貨(huò)期(qī)：現貨(huò)PCR試(shì)劑盒的有(yǒu)效(xiào)期(qī)一(yī)般為1年(nián)，這是(shì)指在(zài)適當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度下。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增部分(fēn)的(dí)試劑(jì)一般要貯存於(yú)-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測部分試劑(jì)則貯存於2-8℃。盡量避免反復凍融。
【結果分析條(tiáo)件設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾值綫設(shè)定在(zài)剛(gāng)好超過正常陰性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)擴增曲綫(xiàn)的最高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應為陽性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數擴增期，Ct值(zhí)應(yīng)小於等(děng)於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求需在(zài)一次(cì)實驗中(zhōng)同時滿(mǎn)足，否(fǒu)則該次實驗視(shì)為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結果判斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本(běn)為(wéi)可疑(yí)樣本(běn)；對於可疑樣本(běn)建議(yì)復核(hé)一次(cì)，若(ruò)復核結果Ct<40且有指數擴增期，則判定為陽性(xìng)，否則判定(dìng)為陰性；
3. 陰性：無指數擴增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判(pàn)定為陰性樣本。
【對檢驗結(jié)果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環境汙染，試劑汙染，樣品(pǐn)交叉汙染會(huì)出(chū)現假陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試劑(jì)運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存不當或試劑配製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引起(qǐ)的(dí)試劑檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下(xià)降，可(kě)能會導致(zhì)出現假陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反應的特異(yì)性(xìng)：
②鹼基配對原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的特(tè)異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性。
枝頂(dǐng)孢黴PCR檢測試劑(jì)盒其中引物與(yǔ)模(mó)板的(dí)正確結(jié)合是(shì)關鍵。引物(wù)與模板的結(jié)合及引物鏈的(dí)延伸是(shì)遵循鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則的。聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高溫(wēn)性，使反(fǎn)應(yīng)中模板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的(dí)結合(hé)(復(fù)性)可以在較高(gāo)的(dí)溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行，結合的特異性(xìng)大大增加，被擴增的靶基因片段也(yě)就能保持很(hěn)高的正確(què)度(dù)。再通過(guò)選(xuǎn)擇特異(yì)性和(hé)保守性高的靶基因(yīn)區(qū)，其特異性程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高
PCR產(chǎn)物的(dí)生成量是(shì)以指數方式增(zēng)加(jiā)的，能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始待測模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中(zhōng)檢出一(yī)個靶細胞；在病毒的檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑形成(chéng)單位)；在(zài)細菌學中zui小(xiǎo)檢出(chū)率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次(cì)性地將反應(yīng)液加(jiā)好後，即(jí)在DNA擴(kuò)增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋上進行變性(xìng)-退(tuì)火-延(yán)伸反(fǎn)應，一般在(zài)2～4 小時完成(chéng)擴增(zēng)反應(yīng)。擴增產物一(yī)般(bān)用(yòng)電泳(yǒng)分(fēn)析，不(bù)一定要用同位素，無(wú)放射(shè)性汙染(rǎn)，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純(chún)度要求低
不(bù)需(xū)要(yào)分(fēn)離病(bìng)毒或(huò)細(xì)菌及(jí)培養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製品及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為擴增模(mó)板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床標本如(rú)血(xiě)液，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛發，細(xì)胞(bāo)，活PCR技(jì)術(shù)概論。
