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PCR檢(jiǎn)測試劑盒
流(liú)行(háng)性(xìng)腮腺炎病(bìng)毒(dú)PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
商品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名(míng)稱 | 規格(gé) | 貨(huò)號 |
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流(liú)行(háng)性腮(sāi)腺(xiàn)炎病(bìng)毒PCR檢測試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015113 |
儲存條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保存(cún)，避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效期(qī)：一(yī)年(nián)
貨期：現貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有效期一般(bān)為1年，這(zhè)是(shì)指在適當的(dí)儲(chǔ)存溫(wēn)度下。核酸擴(kuò)增部(bù)分的試劑一般(bān)要(yào)貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測部(bù)分試(shì)劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
【結果分析條件(jiàn)設(shè)定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾(yù)值綫設定在剛好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常陰(yīn)性(xìng)質控品擴增曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控品的(dí)檢測(cè)結果應(yīng)為陽(yáng)性(xìng)，有明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數擴增期，Ct值(zhí)應(yīng)小於等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需在一次(cì)實驗中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足(zú)，否則該次實(shí)驗(yàn)視為(wéi)無效(xiào)。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑(yí)：有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可(kě)疑樣(yàng)本；對於可(kě)疑樣(yàng)本建(jiàn)議復(fù)核一次，若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且有(yǒu)指數擴(kuò)增期，則判定(dìng)為(wéi)陽性(xìng)，否(fǒu)則判定(dìng)為陰(yīn)性；
3. 陰性：無指數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判定為(wéi)陰性(xìng)樣本。
【對檢驗結果的解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室環境汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙染，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染(rǎn)會出現(xiàn)假陽性結果；
2. 試劑運輸，保存(cún)不(bù)當或(huò)試劑配製不準(zhǔn)確引(yǐn)起的(dí)試劑檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下(xià)降，可(kě)能會導(dǎo)致出現假陰性結果(guǒ)。
PCR反應的特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性；
④靶基(jī)因的特異性(xìng)與保(bǎo)守性(xìng)。
流行(háng)性(xìng)腮腺炎(yán)病毒(dú)PCR檢測試(shì)劑盒(hé)其中引物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確結合是關(guān)鍵。引(yǐn)物(wù)與模(mó)板(bǎn)的結合(hé)及引物鏈的延伸是(shì)遵(zūn)循鹼(jiǎn)基(jī)配對原則的。聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高溫性(xìng)，使反(fǎn)應中模(mó)板與引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(復性)可以在較高的(dí)溫度下(xià)進行，結(jié)合的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)大(dà)大增加(jiā)，被(bèi)擴(kuò)增的靶(bǎ)基因(yīn)片段也(yě)就能保持(chí)很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確(què)度。再通過選擇特(tè)異性(xìng)和保(bǎo)守性高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區(qū)，其(qí)特異性(xìng)程度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產物的生成(chéng)量是以(yǐ)指數方式(shì)增加(jiā)的，能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待測(cè)模板擴(kuò)增(zēng)到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細胞中(zhōng)檢出(chū)一(yī)個靶細胞；在病毒(dú)的檢測中，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可達3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單(dān)位)；在(zài)細(xì)菌學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為(wéi)3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反應用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚合酶，一(yī)次性地將反應液(yè)加好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴增(zēng)液和水浴(yù)鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退火(huǒ)-延(yán)伸反應，一般在2～4 小時(shí)完(wán)成(chéng)擴增反應。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析(xī)，不(bù)一(yī)定(dìng)要用同(tóng)位(wèi)素，無(wú)放射(shè)性汙(wū)染(rǎn)，易推廣。
(4) 對標本的(dí)純(chún)度要求低(dī)
不(bù)需(xū)要分(fēn)離病毒(dú)或細菌(jūn)及培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品及(jí)總RNA均(jūn)可作為(wéi)擴增(zēng)模(mó)板。可直接用臨(lín)床標本如(rú)血液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技(jì)術(shù)概(gài)論。
