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產品中(zhōng)心
PCR檢測試劑盒
商品(pǐn)屬性
| 產品名稱 | 英文名稱(chēng) | 貨(huò)號 |
|
牛(niú)型放綫(xiàn)菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒 |
Actinomyces bovisPCR |
YS-P013782 |
分(fēn)類：PCR檢測(cè)試劑盒
儲存(cún)條件：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避(bì)免反復凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸：低(dī)溫(wēn)，避光。
有效期：一(yī)年
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的(dí)有效(xiào)期一般(bān)為(wéi)1年(nián)，這是指在適當(dāng)的(dí)儲存(cún)溫(wēn)度(dù)下(xià)。核酸擴(kuò)增部分(fēn)的(dí)試劑一(yī)般(bān)要貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測部分(fēn)試劑則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反復凍(dòng)融。
【結果分析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 閾值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值綫設定在(zài)剛好超(chāo)過(guò)正(zhèng)常陰(yīn)性質控品擴增曲綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品(pǐn)的檢測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性，有(yǒu)明顯的指數擴增期，Ct值應小於等於35；
3. 以上(shàng)要(yào)求(qiú)需(xū)在一次(cì)實驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否則(zé)該次(cì)實驗視(shì)為無效。
【結果判斷】
2.可疑(yí)：有明顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對於可疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議(yì)復(fù)核(hé)一(yī)次，若復核結(jié)果Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴增期，則判(pàn)定為(wéi)陽性(xìng)，否則(zé)判定(dìng)為陰性；
3. 陰性：無指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無Ct值均判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對(duì)檢驗結果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環(huán)境汙(wū)染，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染會出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保存不當或試(shì)劑(jì)配製不準確引起的試(shì)劑檢測效(xiào)能(néng)下降(jiàng)，可(kě)能會導致出(chū)現假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結(jié)果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特(tè)異(yì)性：
②鹼基(jī)配對原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實性；
④靶基因的特異性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守性(xìng)。
牛(niú)型放綫菌PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé)其中引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的(dí)正(zhèng)確結合(hé)是(shì)關鍵。引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的結合(hé)及引物鏈(liàn)的延伸是遵(zūn)循鹼基配對原則的。聚合酶合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高溫(wēn)性(xìng)，使(shǐ)反應(yīng)中模板與引物(wù)的結(jié)合(復(fù)性)可以在(zài)較(jiào)高的(dí)溫(wēn)度下進行，結合(hé)的特異性大大(dà)增加，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的靶(bǎ)基因片段也(yě)就能(néng)保持很高的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再通過選(xuǎn)擇特異(yì)性和保守性(xìng)高的(dí)靶基因(yīn)區，其特(tè)異(yì)性(xìng)程度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的生(shēng)成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指數方(fāng)式增加(jiā)的，能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始待測模(mó)板擴(kuò)增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶細(xì)胞(bāo)；在病毒的(dí)檢測中，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可達(dá)3個RFU(空斑(bān)形成單位)；在細(xì)菌(jūn)學中zui小檢出率為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反應用耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶，一次性(xìng)地將(jiāng)反應液加(jiā)好(hǎo)後，即在(zài)DNA擴增液和(hé)水浴鍋上進行(háng)變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火-延伸反應，一(yī)般在(zài)2～4 小時完(wán)成(chéng)擴增反應。擴增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般用(yòng)電泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不一定(dìng)要用同位素(sù)，無放射(shè)性汙(wū)染，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純度要求低
不需要(yào)分(fēn)離病毒(dú)或細(xì)菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總RNA均可作(zuò)為(wéi)擴增模板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床標(biāo)本如(rú)血液，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發(fā)，細胞，活PCR技術概論(lùn)。
