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PCR檢測試劑盒
商品(pǐn)屬性
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 英文名稱(chēng) | 貨(huò)號(hào) |
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鐮刀(dāo)菌(jūn)通用PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Fusarium spp.PCR |
YS-P014221 |
分類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保(bǎo)存(cún)，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū)：低(dī)溫，避光。
有效期(qī)：一(yī)年(nián)
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑盒的有效(xiào)期(qī)一般為(wéi)1年，這是指在適當的儲存溫(wēn)度(dù)下(xià)。核酸擴增部(bù)分的(dí)試劑一(yī)般(bān)要貯存於-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分試(shì)劑(jì)則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結果分(fēn)析條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值(zhí)綫設定(dìng)在剛(gāng)好超過(guò)正(zhèng)常陰(yīn)性質(zhì)控品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲綫的(dí)最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性質控品的(dí)檢測結果應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增期(qī)，Ct值應小(xiǎo)於(yú)等於35；
3. 以上要求(qiú)需(xū)在(zài)一(yī)次(cì)實(shí)驗(yàn)中同時(shí)滿足(zú)，否則該次實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本為可疑(yí)樣本；對(duì)於可(kě)疑樣本建(jiàn)議(yì)復(fù)核一次，若(ruò)復(fù)核結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，則判(pàn)定為陽性，否則(zé)判定為陰性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數擴增期，Ct=40或無Ct值均判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實驗室(shì)環境汙(wū)染(rǎn)，試劑汙(wū)染，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉汙染會出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試劑運(yùn)輸，保存(cún)不當或試劑配(pèi)製(zhì)不準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的試(shì)劑檢(jiǎn)測效能下降(jiàng)，可(kě)能(néng)會導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性結果。
PCR反(fǎn)應的特異性：
②鹼基(jī)配對原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成反(fǎn)應(yīng)的忠實性(xìng)；
④靶基(jī)因(yīn)的特(tè)異性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
鐮(lián)刀菌通用(yòng)PCR檢(jiǎn)測試劑盒其中(zhōng)引(yǐn)物與模板(bǎn)的(dí)正確(què)結(jié)合(hé)是(shì)關鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)結(jié)合及引物鏈的延伸是(shì)遵(zūn)循鹼基配(pèi)對(duì)原則(zé)的(dí)。聚合酶(méi)合成(chéng)反應的忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高溫性，使反應中模板(bǎn)與引物的結(jié)合(復(fù)性(xìng))可以(yǐ)在較高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行(háng)，結合的(dí)特(tè)異性大大增加，被擴增的(dí)靶基(jī)因片段也(yě)就能(néng)保持(chí)很(hěn)高(gāo)的正確度。再通過(guò)選(xuǎn)擇特異(yì)性和(hé)保守(shǒu)性(xìng)高的靶基因區，其特(tè)異性(xìng)程(chéng)度就更(gēng)高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生成量是(shì)以(yǐ)指數(shù)方(fāng)式(shì)增(zēng)加的(dí)，能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待測(cè)模板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬(wàn)個細胞中(zhōng)檢出(chū)一(yī)個靶細胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒的檢(jiǎn)測中，PCR的靈敏度(dù)可達3個RFU(空斑形成(chéng)單位)；在細菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出(chū)率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快速(sù)
PCR反應用(yòng)耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一次性(xìng)地將反應液(yè)加好後(hòu)，即在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和水(shuǐ)浴鍋(guō)上(shàng)進行變(biàn)性(xìng)-退火-延伸反應(yīng)，一般在(zài)2～4 小時(shí)完成擴增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴增產物(wù)一般用電泳(yǒng)分析，不一定要用同位素，無放(fàng)射性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的(dí)純(chún)度(dù)要(yào)求(qiú)低
不(bù)需要(yào)分離(lí)病(bìng)毒或(huò)細菌及培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均可(kě)作為擴(kuò)增模板。可(kě)直(zhí)接用臨(lín)床標(biāo)本如血(xiě)液，體(tǐ)腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛發(fā)，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術(shù)概論。
