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產品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
商品(pǐn)屬性
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名稱 | 貨號(hào) |
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斑點氣單(dān)胞(bāo)菌PCR檢測(cè)試劑盒(hé) |
Aeromonas punctataPCR |
YS-P013791 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存條件：-20℃避(bì)光保存，避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有效期(qī)：一年
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒的(dí)有(yǒu)效期(qī)一(yī)般為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指(zhǐ)在適當的儲(chǔ)存溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴增部分的試劑(jì)一(yī)般要貯(zhù)存(cún)於-20℃下，產物(wù)檢測部(bù)分試(shì)劑則貯存於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免反復凍融(róng)。
【結(jié)果分析條件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫設(shè)定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超過(guò)正常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)擴增(zēng)曲綫的最高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性質控品(pǐn)的檢測(cè)結果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性，有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期，Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等於35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需在一次實驗中(zhōng)同時滿(mǎn)足，否則該次(cì)實驗視為無效(xiào)。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本(běn)為(wéi)可疑樣本；對於可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議(yì)復核一次，若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且(qiě)有指數擴增(zēng)期，則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽性，否則判定為陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值(zhí)均判定(dìng)為陰性樣(yàng)本。
【對檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境(jìng)汙染，試劑(jì)汙染(rǎn)，樣品(pǐn)交叉汙染(rǎn)會出(chū)現假陽性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸，保存(cún)不當(dāng)或(huò)試劑配製不準確引起的試劑檢(jiǎn)測效(xiào)能下(xià)降(jiàng)，可能會導致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特(tè)異性：
②鹼基配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成(chéng)反應的忠實(shí)性(xìng)；
④靶基因(yīn)的(dí)特異(yì)性(xìng)與(yǔ)保守(shǒu)性(xìng)。
斑點氣(qì)單胞菌PCR檢測(cè)試劑盒(hé)其(qí)中引物與模板(bǎn)的正確結合(hé)是關鍵。引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的結合(hé)及引物(wù)鏈的(dí)延伸(shēn)是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配對(duì)原(yuán)則的。聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫性，使反應(yīng)中(zhōng)模板與引(yǐn)物的結合(復性)可(kě)以在(zài)較高的溫度下(xià)進行，結合的特(tè)異性大(dà)大(dà)增加，被(bèi)擴增的靶基因片(piàn)段(duàn)也就能保持(chí)很高的正確(què)度。再(zài)通(tōng)過選擇特異(yì)性和保守性(xìng)高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因區(qū)，其(qí)特(tè)異性程度就更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的生成(chéng)量是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式(shì)增加的(dí)，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待測(cè)模板擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬個細胞(bāo)中檢出一個(gè)靶細胞；在病毒的檢(jiǎn)測中，PCR的靈敏(mǐn)度可達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成單位(wèi))；在(zài)細(xì)菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小檢出率為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一(yī)次性地將(jiāng)反(fǎn)應液加好後(hòu)，即在(zài)DNA擴增(zēng)液(yè)和水浴鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變性(xìng)-退火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應，一般在2～4 小時完(wán)成擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增(zēng)產物一般用電泳(yǒng)分析，不一定要用(yòng)同位素(sù)，無放(fàng)射性汙染，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本的(dí)純度要(yào)求低(dī)
不需要分離病(bìng)毒或細菌及(jí)培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可作(zuò)為擴(kuò)增模板。可(kě)直接(jiē)用(yòng)臨床標本如(rú)血液(yè)，體(tǐ)腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液，毛(máo)發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術概論(lùn)。
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