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PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
| 產(chǎn)品名稱 | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱 | 貨號 |
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淋(lín)病奈(nài)瑟菌PCR檢測(cè)試(shì)劑盒 |
Neisseria gonorrhoeaePCR |
YS-P014498 |
分類(lèi):PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
儲存條(tiáo)件:-20℃避(bì)光保(bǎo)存(cún),避免反(fǎn)復凍融(róng)。
運輸:低(dī)溫(wēn),避(bì)光。
有效(xiào)期:一年
貨(huò)期(qī):現貨(huò)PCR試劑盒的有效(xiào)期一般(bān)為(wéi)1年(nián),這是指(zhǐ)在適(shì)當的儲(chǔ)存溫度下(xià)。核(hé)酸(suān)擴增部(bù)分(fēn)的試劑一(yī)般(bān)要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià),產(chǎn)物檢測(cè)部(bù)分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯存於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反復凍(dòng)融(róng)。
u 閾(yù)值(Threshold)設定:將(jiāng)閾值綫設定在剛好(hǎo)超過正常陰(yīn)性質控(kòng)品(pǐn)擴增(zēng)曲綫的最高點。
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果應為陽性,有(yǒu)明顯的(dí)指數擴增期(qī),Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於35;
3. 以上要(yào)求(qiú)需(xū)在一次(cì)實(shí)驗中同時滿足,否(fǒu)則該次(cì)實(shí)驗視(shì)為無(wú)效。
2.可疑:有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期,且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本(běn)為(wéi)可(kě)疑(yí)樣本;對(duì)於可疑樣本建(jiàn)議復(fù)核一次(cì),若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數擴增期(qī),則判定為(wéi)陽性,否則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性(xìng);
3. 陰性:無指數擴增(zēng)期(qī),Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢驗結(jié)果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境汙(wū)染,試(shì)劑汙(wū)染(rǎn),樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染會(huì)出現假陽性(xìng)結果;
2. 試劑(jì)運輸(shū),保存不當或試劑配(pèi)製不(bù)準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試(shì)劑(jì)檢測(cè)效(xiào)能下(xià)降(jiàng),可能會導(dǎo)致出現假(jiǎ)陰(yīn)性結果(guǒ)。
②鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則;
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反(fǎn)應的忠實(shí)性;
④靶基因的(dí)特異(yì)性(xìng)與保守性。
淋病奈(nài)瑟(sè)菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)其中引物與模板的正確結合是關鍵。引(yǐn)物(wù)與模(mó)板(bǎn)的結合(hé)及(jí)引物鏈的延(yán)伸(shēn)是遵循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配對原則的。聚合酶合成反應的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性,使反應(yīng)中模(mó)板與引物的結合(復性)可以(yǐ)在較(jiào)高(gāo)的(dí)溫度(dù)下(xià)進(jìn)行,結(jié)合(hé)的特(tè)異(yì)性(xìng)大大(dà)增加,被擴增的靶基因片(piàn)段也(yě)就能保持很(hěn)高的正確(què)度。再通過選(xuǎn)擇特異性和保守性高(gāo)的(dí)靶基(jī)因區,其(qí)特異性(xìng)程(chéng)度(dù)就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的生成量(liáng)是以指數方式增加的,能(néng)將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬個細(xì)胞中檢出一(yī)個(gè)靶細(xì)胞;在病(bìng)毒的(dí)檢測(cè)中(zhōng),PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單位);在(zài)細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便,快速(sù)
PCR反應用(yòng)耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi),一(yī)次性地將(jiāng)反應液加(jiā)好(hǎo)後,即在DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火(huǒ)-延伸(shēn)反應,一般在2~4 小時完成(chéng)擴增反應。擴增產物一(yī)般(bān)用(yòng)電泳(yǒng)分(fēn)析,不一定(dìng)要(yào)用(yòng)同位素,無(wú)放射(shè)性汙(wū)染,易推(tuī)廣。
(4) 對標本的(dí)純度要(yào)求(qiú)低
不(bù)需要分離(lí)病毒或細菌(jūn)及培養(yǎng)細胞,DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及總RNA均可作為擴增(zēng)模板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本如(rú)血(xiě)液(yè),體腔液(yè),洗嗽液(yè),毛發,細(xì)胞,活PCR技(jì)術概(gài)論。
