產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
商品屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 英文名(míng)稱 | 貨(huò)號(hào) |
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巴氏阿米巴原(yuán)蟲(chóng)PCR檢測試劑(jì)盒(hé) |
Balamuthia mandrillarisPCR |
YS-P013886 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲存(cún)條件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避(bì)免(miǎn)反復凍(dòng)融。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光。
有(yǒu)效期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般(bān)為(wéi)1年(nián)，這(zhè)是指(zhǐ)在適(shì)當(dāng)的儲存溫(wēn)度(dù)下。核酸(suān)擴(kuò)增部分的(dí)試劑一般要(yào)貯存於-20℃下，產物(wù)檢測部分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結果分析條件設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設定(dìng)在剛(gāng)好超(chāo)過正(zhèng)常陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性(xìng)質控品(pǐn)的(dí)檢測結果應(yīng)為(wéi)陽性，有明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應小於等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求(qiú)需在一次實(shí)驗中(zhōng)同時滿足(zú)，否則該次實(shí)驗視為無(wú)效。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可疑(yí)樣本(běn)；對(duì)於可疑樣本(běn)建議(yì)復核(hé)一次，若(ruò)復(fù)核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則判定為陽性(xìng)，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定為陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均判定(dìng)為(wéi)陰性樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗室環境汙(wū)染，試(shì)劑(jì)汙染，樣(yàng)品交(jiāo)叉(chā)汙染會(huì)出現假(jiǎ)陽(yáng)性結果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保(bǎo)存不(bù)當(dāng)或試劑配製不準確引(yǐn)起的試劑(jì)檢測效(xiào)能(néng)下降，可(kě)能會導(dǎo)致(zhì)出(chū)現假陰性結(jié)果。
PCR反(fǎn)應的特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基配對原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠實性；
④靶基(jī)因的特(tè)異(yì)性(xìng)與保(bǎo)守性。
巴(bā)氏阿米巴(bā)原蟲(chóng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)其中引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板的正(zhèng)確(què)結合(hé)是關鍵。引物(wù)與模(mó)板的結合(hé)及引(yǐn)物鏈的延(yán)伸(shēn)是遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則的。聚(jù)合酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高溫性(xìng)，使反應中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與引物的結合(hé)(復(fù)性)可以(yǐ)在較高的(dí)溫度(dù)下進行(háng)，結合(hé)的(dí)特異性大大(dà)增加(jiā)，被擴(kuò)增的(dí)靶(bǎ)基因片(piàn)段也就能保(bǎo)持(chí)很高的正確(què)度(dù)。再通(tōng)過選(xuǎn)擇特異性和保(bǎo)守(shǒu)性高的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)區，其(qí)特異性程(chéng)度就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的生(shēng)成(chéng)量是以(yǐ)指數方式增加的，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模板擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個細胞中(zhōng)檢出(chū)一個靶(bǎ)細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可達3個RFU(空斑形(xíng)成單位)；在細菌(jūn)學中zui小檢出率為(wéi)3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶(méi)，一次性地將(jiāng)反應(yīng)液(yè)加好(hǎo)後，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增液和水浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行變性(xìng)-退(tuì)火-延(yán)伸反(fǎn)應(yīng)，一般(bān)在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴(kuò)增反(fǎn)應。擴增(zēng)產物一(yī)般(bān)用電(diàn)泳分(fēn)析，不一(yī)定(dìng)要用(yòng)同(tóng)位素(sù)，無放射(shè)性汙染，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的純(chún)度要(yào)求低(dī)
不需要分離病毒(dú)或(huò)細(xì)菌及(jí)培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總RNA均(jūn)可作為(wéi)擴增(zēng)模板。可直接(jiē)用臨(lín)床標本(běn)如血(xiě)液，體(tǐ)腔液，洗嗽(sòu)液，毛發，細胞(bāo)，活PCR技術(shù)概論。
