產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
商品(pǐn)屬性
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱 | 貨(huò)號 |
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鼻疽伯(bó)克(kè)霍爾德氏菌PCR檢測(cè)試(shì)劑盒 |
Burkholderia malleiPCR |
YS-P013968 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒
儲存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
運(yùn)輸：低(dī)溫，避(bì)光(guāng)。
有效期：一年
貨(huò)期：現貨(huò)PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一般為1年(nián)，這(zhè)是(shì)指在適當(dāng)的儲存溫度下(xià)。核酸擴增部(bù)分(fēn)的試劑一般要貯存於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部分試劑(jì)則(zé)貯存於2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反復凍(dòng)融(róng)。
【結果(guǒ)分析(xī)條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值綫設定在(zài)剛好超過(guò)正常陰(yīn)性(xìng)質控品(pǐn)擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結果(guǒ)應為陽性，有(yǒu)明顯的指數擴增(zēng)期，Ct值應小(xiǎo)於等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需(xū)在(zài)一次實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時滿足，否則該次(cì)實(shí)驗(yàn)視(shì)為無(wú)效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷】
2.可疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為(wéi)可疑(yí)樣本(běn)；對於可(kě)疑樣(yàng)本建議(yì)復核一次，若復核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴增期，則判定為陽(yáng)性，否則(zé)判定為陰性(xìng)；
3. 陰性：無指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢驗(yàn)結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙染，試(shì)劑(jì)汙(wū)染，樣品交叉(chā)汙染(rǎn)會出現假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保存不當或試劑配製不準確引起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能(néng)下(xià)降，可(kě)能(néng)會導致(zhì)出(chū)現假陰性(xìng)結果。
PCR反應(yīng)的特異性：
②鹼基(jī)配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的特異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守性。
鼻疽伯(bó)克(kè)霍爾德(dé)氏菌PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒其(qí)中引物與模(mó)板的正確(què)結合(hé)是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與模板的(dí)結合(hé)及(jí)引物鏈的延伸是遵循鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚合(hé)酶合成反應的忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚合酶(méi)耐(nài)高溫(wēn)性(xìng)，使(shǐ)反應中(zhōng)模板(bǎn)與(yǔ)引物的結(jié)合(復性)可(kě)以在較(jiào)高(gāo)的溫度(dù)下進(jìn)行，結合(hé)的(dí)特異(yì)性大大增加，被擴(kuò)增(zēng)的靶(bǎ)基因(yīn)片段(duàn)也就能保持很高的(dí)正(zhèng)確(què)度。再(zài)通(tōng)過選擇(zé)特(tè)異性(xìng)和保守(shǒu)性高的靶(bǎ)基因(yīn)區，其特異性程度(dù)就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生(shēng)成量是以(yǐ)指數方式增加的，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待(dài)測模板擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢出一個靶細胞(bāo)；在病(bìng)毒的檢測中，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單位(wèi))；在細菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢出率為(wéi)3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反應用(yòng)耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一(yī)次性(xìng)地將(jiāng)反應液(yè)加(jiā)好後，即在DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退火-延(yán)伸反應，一(yī)般在2～4 小(xiǎo)時完(wán)成擴增反應。擴(kuò)增(zēng)產物一(yī)般(bān)用電泳(yǒng)分析，不(bù)一定(dìng)要(yào)用同位素(sù)，無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易推廣。
(4) 對(duì)標本的純度要求(qiú)低
不需要(yào)分離病毒(dú)或細(xì)菌及培(péi)養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增模板(bǎn)。可直接用(yòng)臨床(chuáng)標本如血(xiě)液(yè)，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液(yè)，毛(máo)發，細胞，活PCR技術概論。
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