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PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
胎兒彎曲(qū)杆菌(jūn)性(xìng)病(bìng)亞種PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
| 產(chǎn)品名稱 | 英(yīng)文名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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胎兒(ér)彎曲杆菌(jūn)性病亞(yà)種PCR檢測(cè)試劑盒 |
Campylobacter fetus subsp. VenerealisPCR |
YS-P013975 |
分(fēn)類(lèi):PCR檢測試劑盒
儲存條(tiáo)件(jiàn):-20℃避(bì)光(guāng)保存,避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
運(yùn)輸:低溫(wēn),避(bì)光。
有效期:一(yī)年
貨(huò)期(qī):現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的(dí)有效(xiào)期(qī)一般(bān)為(wéi)1年,這是(shì)指(zhǐ)在適當的(dí)儲存溫度下。核酸(suān)擴(kuò)增部(bù)分的(dí)試劑(jì)一(yī)般(bān)要貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下(xià),產物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分試劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡量避免(miǎn)反復凍融。
u 閾值(zhí)(Threshold)設定:將閾(yù)值綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在剛好超過(guò)正常(cháng)陰性質控(kòng)品擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最(zuì)高點(diǎn)。
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的檢(jiǎn)測結果應為陽性(xìng),有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期,Ct值(zhí)應小於等於(yú)35;
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求需(xū)在一次(cì)實(shí)驗中(zhōng)同(tóng)時滿(mǎn)足(zú),否則該次(cì)實驗視(shì)為無效。
2.可疑:有明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增(zēng)期,且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為可(kě)疑樣本(běn);對於可疑(yí)樣(yàng)本建議復核(hé)一次(cì),若(ruò)復(fù)核(hé)結果Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴增期,則(zé)判定為陽性,否則判定為陰性(xìng);
3. 陰(yīn)性:無指(zhǐ)數擴增(zēng)期,Ct=40或無Ct值均判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果的(dí)解釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙染,試(shì)劑汙染(rǎn),樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染(rǎn)會出現假陽性(xìng)結(jié)果;
2. 試(shì)劑運(yùn)輸,保(bǎo)存不當或試(shì)劑(jì)配製不準(zhǔn)確(què)引起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢測(cè)效能(néng)下降,可能會導致出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰性結(jié)果。
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原則;
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反應(yīng)的忠(zhōng)實性;
④靶基因的(dí)特異(yì)性(xìng)與保(bǎo)守性(xìng)。
胎兒(ér)彎曲(qū)杆菌性病亞種(zhǒng)PCR檢測試劑盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板的正確結合是關(guān)鍵(jiàn)。引物與模板的結合及引(yǐn)物(wù)鏈的(dí)延(yán)伸(shēn)是(shì)遵循鹼基(jī)配對原(yuán)則的(dí)。聚(jù)合酶(méi)合成反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高(gāo)溫性(xìng),使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板與引物(wù)的結合(復(fù)性(xìng))可(kě)以(yǐ)在較高的(dí)溫度(dù)下(xià)進(jìn)行,結(jié)合(hé)的特異性(xìng)大大(dà)增(zēng)加,被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的靶基因片段也就能保持(chí)很(hěn)高的(dí)正確度。再(zài)通過選擇特(tè)異性和保守(shǒu)性高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區,其(qí)特(tè)異性程度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是以指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式(shì)增加的,能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待(dài)測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一(yī)個(gè)靶細胞;在(zài)病毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中,PCR的靈敏度(dù)可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位(wèi));在(zài)細(xì)菌學中zui小(xiǎo)檢出(chū)率為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡便,快速(sù)
PCR反應(yīng)用(yòng)耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶,一次性地將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好後,即(jí)在DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴鍋(guō)上進行(háng)變性(xìng)-退火(huǒ)-延伸反應,一般(bān)在(zài)2~4 小時完(wán)成擴(kuò)增(zēng)反應。擴(kuò)增產物一般用(yòng)電泳分(fēn)析(xī),不一定(dìng)要用同位(wèi)素,無放射性汙染,易推廣。
(4) 對標本的純度要求(qiú)低
不需(xū)要(yào)分離病毒或細(xì)菌(jūn)及培養(yǎng)細(xì)胞(bāo),DNA 粗(cū)製(zhì)品及總(zǒng)RNA均(jūn)可作為擴增(zēng)模(mó)板。可直接用(yòng)臨床(chuáng)標本如血液,體(tǐ)腔液,洗(xǐ)嗽液,毛發,細胞(bāo),活PCR技(jì)術(shù)概(gài)論。
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