產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢測試劑盒
商(shāng)品屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英文名稱 | 貨(huò)號 |
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鴨肝炎(yán)病毒(dú)通(tōng)用PCR檢測試(shì)劑(jì)盒 |
Duck Hepatitis Virus(DHV)PCR |
YS-P014107 |
分類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
儲存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避免反復凍融。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期：一(yī)年
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效(xiào)期(qī)一(yī)般為(wéi)1年，這(zhè)是指(zhǐ)在適當的儲存溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增部(bù)分(fēn)的(dí)試(shì)劑一(yī)般要(yào)貯存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測部分(fēn)試劑則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結果分析條件設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值(zhí)綫設定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰性質控品擴增曲綫的最(zuì)高點。
【質(zhì)控標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的檢測(cè)結果應為(wéi)陽性(xìng)，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct值應小於等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求(qiú)需(xū)在一次實驗中同時(shí)滿足(zú)，否則該(gāi)次(cì)實(shí)驗視(shì)為(wéi)無效(xiào)。
【結(jié)果判斷】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為可(kě)疑(yí)樣(yàng)本；對於可疑樣本(běn)建(jiàn)議復(fù)核一次，若復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數(shù)擴增期，則判定為(wéi)陽(yáng)性，否(fǒu)則(zé)判定為陰性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無Ct值(zhí)均判定為(wéi)陰性樣(yàng)本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環境汙染，試劑汙(wū)染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染(rǎn)會出現假陽(yáng)性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸，保存(cún)不當或試(shì)劑配(pèi)製(zhì)不準(zhǔn)確引(yǐn)起(qǐ)的試劑檢測效能下降(jiàng)，可能會導致(zhì)出現假陰性結(jié)果。
PCR反應(yīng)的特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼基(jī)配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實(shí)性；
④靶(bǎ)基(jī)因的(dí)特異性與保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
鴨肝炎(yán)病毒通(tōng)用PCR檢測試(shì)劑盒(hé)其(qí)中引(yǐn)物與模板(bǎn)的正(zhèng)確結(jié)合是關(guān)鍵(jiàn)。引物(wù)與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循鹼基(jī)配對(duì)原則的(dí)。聚合(hé)酶合成反應的忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫性，使(shǐ)反應(yīng)中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(復性)可以(yǐ)在較(jiào)高(gāo)的溫(wēn)度下進(jìn)行(háng)，結合的(dí)特(tè)異性大大增加(jiā)，被(bèi)擴(kuò)增的靶基因片段也(yě)就能保持很高(gāo)的(dí)正(zhèng)確度。再(zài)通過(guò)選擇特異性和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性高的(dí)靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的生成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式增(zēng)加(jiā)的，能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起(qǐ)始待測模(mó)板擴增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢出一(yī)個靶(bǎ)細胞；在(zài)病毒(dú)的檢測(cè)中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度(dù)可達(dá)3個(gè)RFU(空斑(bān)形成(chéng)單位)；在細(xì)菌學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反應(yīng)用耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一(yī)次(cì)性地(dì)將反(fǎn)應液加(jiā)好後(hòu)，即在DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水浴(yù)鍋上(shàng)進行(háng)變(biàn)性-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳分析，不(bù)一(yī)定(dìng)要用同位素(sù)，無(wú)放(fàng)射(shè)性(xìng)汙染(rǎn)，易推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純度要求(qiú)低
不需要分(fēn)離(lí)病毒或細菌及(jí)培養細胞，DNA 粗(cū)製品及總(zǒng)RNA均可(kě)作為擴(kuò)增(zēng)模板(bǎn)。可直(zhí)接用臨床標本如血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗嗽液(yè)，毛發(fā)，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術概(gài)論(lùn)。
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