產(chǎn)品(pǐn)中心
PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
商品(pǐn)屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱(chēng) | 英文名(míng)稱 | 貨(huò)號(hào) |
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唾液(yè)彎(wān)曲杆(gān)菌PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Campylobacter sputorumPCR |
YS-P013978 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測試(shì)劑盒
儲存條(tiáo)件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫，避光。
有效期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑(jì)盒(hé)的有效(xiào)期(qī)一般(bān)為1年，這是指在適當的(dí)儲存(cún)溫(wēn)度(dù)下。核(hé)酸(suān)擴增部分(fēn)的試劑一般要貯(zhù)存(cún)於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測(cè)部分(fēn)試(shì)劑則貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免反復凍融(róng)。
【結果(guǒ)分析條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將(jiāng)閾值綫(xiàn)設定在剛好超過正常(cháng)陰性質控(kòng)品擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的最高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽性，有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期(qī)，Ct值(zhí)應(yīng)小於等於35；
3. 以上要(yào)求需在一次(cì)實驗(yàn)中同(tóng)時滿足(zú)，否則(zé)該次實驗(yàn)視為(wéi)無效。
【結果(guǒ)判斷】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對(duì)於可(kě)疑樣(yàng)本建議(yì)復核一次(cì)，若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有指數擴增(zēng)期，則(zé)判定為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，否(fǒu)則判定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均判定為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的(dí)解釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環(huán)境汙染，試(shì)劑汙(wū)染，樣品(pǐn)交叉(chā)汙(wū)染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結(jié)果；
2. 試(shì)劑運輸，保(bǎo)存(cún)不當或試劑(jì)配製(zhì)不準確引(yǐn)起的試劑檢測(cè)效能下(xià)降(jiàng)，可(kě)能會(huì)導致出現(xiàn)假陰(yīn)性結(jié)果。
PCR反應(yīng)的(dí)特異(yì)性：
②鹼基配(pèi)對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成(chéng)反應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶基(jī)因的特異性(xìng)與保守性。
唾(tuò)液彎曲杆菌(jūn)PCR檢測(cè)試劑盒(hé)其中(zhōng)引物與模板的(dí)正(zhèng)確結(jié)合是關鍵(jiàn)。引物與模板的結合及引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸(shēn)是(shì)遵循(xún)鹼(jiǎn)基配對(duì)原則的。聚(jù)合酶合成反應的忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐高(gāo)溫(wēn)性，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模板(bǎn)與引物(wù)的結合(復性(xìng))可(kě)以(yǐ)在較高的溫度下進(jìn)行，結合(hé)的特異性大(dà)大(dà)增加，被擴(kuò)增的(dí)靶基(jī)因(yīn)片段也(yě)就能(néng)保持(chí)很高的(dí)正確度。再(zài)通(tōng)過選擇特(tè)異性和保守(shǒu)性(xìng)高的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)區(qū)，其特(tè)異性(xìng)程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成(chéng)量是以指數(shù)方(fāng)式(shì)增(zēng)加的，能(néng)將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始(shǐ)待測(cè)模(mó)板擴增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個(gè)靶細胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒的檢測中，PCR的靈敏(mǐn)度可達3個RFU(空(kōng)斑形成單位)；在(zài)細(xì)菌(jūn)學中zui小檢出(chū)率(shuài)為3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反應(yīng)用耐(nài)高溫的Taq DNA聚合酶(méi)，一(yī)次性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應液加(jiā)好後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上(shàng)進行變(biàn)性(xìng)-退火-延伸反應，一般(bān)在2～4 小時完(wán)成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用(yòng)電泳分(fēn)析，不一定要用同(tóng)位素，無(wú)放(fàng)射(shè)性汙(wū)染，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的純度要(yào)求(qiú)低(dī)
不需(xū)要(yào)分離病毒或(huò)細(xì)菌(jūn)及(jí)培養細胞(bāo)，DNA 粗製品及(jí)總RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增模板。可直接用臨(lín)床標本如血液，體腔液(yè)，洗嗽液，毛發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術概論。
