產品中(zhōng)心
PCR檢測試劑盒(hé)
商品屬性(xìng)
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英(yīng)文名稱(chēng) | 貨(huò)號(hào) |
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犬(quǎn)腺(xiàn)病(bìng)毒(dú)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒 |
Canine Adenovirus (CAV)PCR |
YS-P013983 |
分(fēn)類：PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
儲存條件(jiàn)：-20℃避光保存(cún)，避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
運輸：低溫，避光。
有(yǒu)效(xiào)期：一年(nián)
貨(huò)期：現貨PCR試(shì)劑盒(hé)的有效期(qī)一般為1年，這是(shì)指在(zài)適(shì)當(dāng)的儲存溫度下。核酸(suān)擴增(zēng)部(bù)分的(dí)試劑一般要貯存(cún)於-20℃下(xià)，產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部分試(shì)劑則貯存於2-8℃。盡量避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
【結(jié)果分析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超過正常陰性質控(kòng)品擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最(zuì)高點(diǎn)。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性質控品(pǐn)的檢測結(jié)果應為(wéi)陽(yáng)性，有明顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct值應(yīng)小於(yú)等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需(xū)在一(yī)次(cì)實驗中(zhōng)同時滿足，否則該(gāi)次實驗視(shì)為無效。
【結果判斷】
2.可疑：有明顯的指數擴增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣(yàng)本；對於(yú)可疑(yí)樣本建議(yì)復(fù)核一次，若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽性(xìng)，否(fǒu)則判(pàn)定為陰性；
3. 陰性：無指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均(jūn)判定(dìng)為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結(jié)果(guǒ)的解釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環(huán)境汙(wū)染，試劑汙染，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染會(huì)出現假(jiǎ)陽(yáng)性結果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保存不當(dāng)或試(shì)劑(jì)配(pèi)製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引起(qǐ)的試(shì)劑檢測效(xiào)能(néng)下(xià)降(jiàng)，可(kě)能(néng)會(huì)導致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特(tè)異性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的特異(yì)性與保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
犬腺(xiàn)病毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)其(qí)中引物與模(mó)板(bǎn)的正確結(jié)合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的(dí)結合及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈的(dí)延伸是(shì)遵循鹼(jiǎn)基配對(duì)原則(zé)的。聚合酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐(nài)高溫性，使(shǐ)反應(yīng)中模板與(yǔ)引物的(dí)結合(hé)(復性)可(kě)以在較高的溫度下(xià)進行，結合的特(tè)異性大大增加(jiā)，被(bèi)擴(kuò)增的靶(bǎ)基因(yīn)片(piàn)段也(yě)就(jiù)能保持很高的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再通過(guò)選擇(zé)特異(yì)性和保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高的(dí)靶基因區，其特異(yì)性程度就更(gēng)高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的(dí)生成量是以指數方式增(zēng)加(jiā)的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬個細(xì)胞中檢(jiǎn)出一(yī)個靶細(xì)胞(bāo)；在病毒的(dí)檢測中，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單位)；在細菌學中zui小(xiǎo)檢出率為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次(cì)性地將(jiāng)反應(yīng)液加好後(hòu)，即在(zài)DNA擴增液(yè)和水浴鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變性-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸反(fǎn)應，一般在2～4 小時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增反(fǎn)應。擴增(zēng)產(chǎn)物一般(bān)用(yòng)電泳(yǒng)分析(xī)，不一(yī)定要用同(tóng)位(wèi)素(sù)，無放(fàng)射(shè)性(xìng)汙(wū)染，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本的純(chún)度要求(qiú)低
不需要(yào)分離(lí)病毒(dú)或細菌及培(péi)養(yǎng)細胞，DNA 粗製品及(jí)總RNA均(jūn)可作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增模板。可直接用臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血液，體(tǐ)腔液，洗嗽液，毛發，細胞(bāo)，活PCR技術(shù)概論。
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