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PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
商品屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 規格(gé) | 貨(huò)號 |
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口(kǒu)蹄疫病毒(dú)O亞(yà)型(xíng)PCR檢測試劑盒 |
50T |
YS-P015093 |
儲存(cún)條件：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
運輸(shū)：低(dī)溫(wēn)，避光(guāng)。
有效(xiào)期：一年(nián)
貨期：現貨(huò)PCR試(shì)劑盒的有(yǒu)效(xiào)期一般為1年，這是指在適(shì)當(dāng)的(dí)儲存(cún)溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸(suān)擴增部(bù)分的試劑(jì)一般(bān)要(yào)貯(zhù)存(cún)於-20℃下(xià)，產物檢測(cè)部分試劑則(zé)貯存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結(jié)果分(fēn)析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾值綫(xiàn)設定在(zài)剛好超過(guò)正(zhèng)常陰性(xìng)質控品(pǐn)擴(kuò)增曲綫的(dí)最(zuì)高點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽性質控(kòng)品的檢(jiǎn)測結(jié)果應為(wéi)陽性，有明顯的(dí)指數擴(kuò)增期(qī)，Ct值應小(xiǎo)於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需(xū)在一次(cì)實驗中同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實驗視為(wéi)無效(xiào)。
【結果判斷】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為(wéi)可(kě)疑樣本(běn)；對於可(kě)疑樣(yàng)本建議復核一(yī)次(cì)，若復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽性(xìng)，否則判定為陰性；
3. 陰性：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定為陰性(xìng)樣本。
【對檢驗結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗室(shì)環境汙染(rǎn)，試劑(jì)汙染，樣品交叉(chā)汙染(rǎn)會出(chū)現假(jiǎ)陽(yáng)性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運輸，保存不當(dāng)或試劑配(pèi)製(zhì)不(bù)準確引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試(shì)劑檢(jiǎn)測(cè)效能下降(jiàng)，可能(néng)會導致出現假(jiǎ)陰性結(jié)果。
PCR反應(yīng)的特異性：
②鹼基(jī)配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠實性；
④靶基因的特異性與(yǔ)保(bǎo)守性。
口(kǒu)蹄(tí)疫病毒O亞型(xíng)PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)其中引物與模板的(dí)正確結(jié)合是關鍵。引物與(yǔ)模(mó)板的(dí)結(jié)合(hé)及引(yǐn)物鏈的延伸(shēn)是遵循鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則的。聚(jù)合(hé)酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐(nài)高溫性，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與引物的(dí)結合(hé)(復(fù)性(xìng))可以(yǐ)在較高的溫度(dù)下進(jìn)行(háng)，結(jié)合(hé)的特異(yì)性大大(dà)增(zēng)加(jiā)，被擴增的靶(bǎ)基因(yīn)片(piàn)段(duàn)也就能保(bǎo)持很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確(què)度(dù)。再通過選(xuǎn)擇特異性和保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的靶(bǎ)基因(yīn)區，其特(tè)異(yì)性程(chéng)度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是(shì)以指數方式(shì)增(zēng)加(jiā)的，能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始待測(cè)模(mó)板擴增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬(wàn)個細胞中檢(jiǎn)出(chū)一個(gè)靶細胞；在(zài)病(bìng)毒(dú)的檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位(wèi))；在(zài)細(xì)菌學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性(xìng)地(dì)將反應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後，即在(zài)DNA擴(kuò)增液(yè)和(hé)水浴(yù)鍋上進行變(biàn)性-退火-延伸(shēn)反(fǎn)應，一般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴(kuò)增(zēng)反應。擴(kuò)增產(chǎn)物(wù)一(yī)般(bān)用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析，不一定要用同(tóng)位(wèi)素(sù)，無(wú)放射性汙染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的純度(dù)要(yào)求低(dī)
不(bù)需(xū)要分離(lí)病毒或細菌(jūn)及培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可(kě)直接用臨床標本如血液(yè)，體腔液，洗嗽液，毛發，細(xì)胞，活PCR技術概論。
