產品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產品名稱(chēng) | 英(yīng)文名(míng)稱 | 貨號 |
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毛細綫蟲(chóng)通用PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒 |
Capillaria spp.PCR |
YS-P013991 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避(bì)光保存(cún)，避(bì)免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸：低溫，避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期：一年(nián)
貨(huò)期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒(hé)的有效(xiào)期(qī)一般為(wéi)1年，這是(shì)指(zhǐ)在適當的儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴(kuò)增部分(fēn)的(dí)試劑一般要貯存於(yú)-20℃下，產物(wù)檢測(cè)部分(fēn)試劑(jì)則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡量避免反復凍(dòng)融。
【結果分析(xī)條件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設定(dìng)在剛好超過(guò)正(zhèng)常陰性質(zhì)控品擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的最高點。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測結果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽性，有明(míng)顯的指數擴增期(qī)，Ct值應小於等於35；
3. 以上(shàng)要求需(xū)在(zài)一次(cì)實驗中(zhōng)同(tóng)時滿(mǎn)足(zú)，否則(zé)該(gāi)次(cì)實(shí)驗視為無效。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑：有明(míng)顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為(wéi)可疑樣本；對於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議(yì)復(fù)核(hé)一(yī)次，若(ruò)復核結果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性，否則判定為陰性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗室(shì)環(huán)境汙染，試劑(jì)汙染(rǎn)，樣品交(jiāo)叉(chā)汙染(rǎn)會出(chū)現(xiàn)假陽性結果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保(bǎo)存不(bù)當或試劑配製不準(zhǔn)確引(yǐn)起的(dí)試(shì)劑檢測(cè)效(xiào)能(néng)下降，可能會導致出現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性結果(guǒ)。
PCR反應的特異性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反(fǎn)應的忠實性(xìng)；
④靶基(jī)因的特異(yì)性與保守性。
毛細綫(xiàn)蟲(chóng)通(tōng)用PCR檢測試劑盒(hé)其中(zhōng)引物(wù)與模(mó)板的正(zhèng)確(què)結合(hé)是(shì)關(guān)鍵。引(yǐn)物與模(mó)板的結(jié)合及引物鏈的延(yán)伸是遵循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原(yuán)則的。聚合(hé)酶合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫(wēn)性(xìng)，使(shǐ)反應中(zhōng)模(mó)板與引(yǐn)物的結合(復(fù)性)可(kě)以(yǐ)在較高的溫度下(xià)進(jìn)行，結合的特異性(xìng)大大增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴增的靶基因(yīn)片段(duàn)也(yě)就(jiù)能保持(chí)很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再通(tōng)過選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異性和保守性高(gāo)的(dí)靶基(jī)因區，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的生(shēng)成量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式增加的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待(dài)測(cè)模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細胞中檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個靶細胞；在病(bìng)毒(dú)的檢測(cè)中，PCR的靈(líng)敏度可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形成單位(wèi))；在細菌(jūn)學(xué)中zui小(xiǎo)檢出(chū)率為(wéi)3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次性地(dì)將反應液加(jiā)好(hǎo)後，即在DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進行變(biàn)性-退(tuì)火-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應，一(yī)般在(zài)2～4 小時完(wán)成擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增(zēng)產(chǎn)物(wù)一(yī)般(bān)用(yòng)電泳分析(xī)，不一(yī)定要(yào)用(yòng)同位素，無(wú)放射(shè)性汙(wū)染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本的(dí)純度(dù)要(yào)求低
不(bù)需要(yào)分(fēn)離病(bìng)毒或細菌及(jí)培(péi)養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總(zǒng)RNA均可作為(wéi)擴增模(mó)板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床標本(běn)如血液(yè)，體(tǐ)腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛(máo)發，細(xì)胞，活(huó)PCR技術概(gài)論。
