產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
商品屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
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河蟹顫抖病病毒(dú)PCR檢測試劑盒 |
Chinese Mitten Crabs Trembling Disease VirusRTPCR |
YS-P014007 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保(bǎo)存，避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸：低溫(wēn)，避(bì)光。
有效期：一年(nián)
貨期：現貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效期一般(bān)為1年，這是(shì)指在(zài)適當(dāng)的儲存溫度下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部分的試劑一(yī)般要貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產物檢測(cè)部分試(shì)劑則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結果分(fēn)析條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫設定在剛(gāng)好(hǎo)超過正(zhèng)常陰(yīn)性質控(kòng)品擴(kuò)增曲綫(xiàn)的(dí)最高點(diǎn)。
【質控標準】
2. 陽性質(zhì)控品(pǐn)的檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽性，有明顯的指數擴增期，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等於35；
3. 以上要求需在(zài)一(yī)次(cì)實(shí)驗中同(tóng)時滿(mǎn)足，否則該(gāi)次實驗(yàn)視為無效(xiào)。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本(běn)為(wéi)可疑(yí)樣(yàng)本；對(duì)於可疑(yí)樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復核(hé)一(yī)次，若復核(hé)結果Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，則判定為陽性，否(fǒu)則判定為陰性；
3. 陰性：無指數(shù)擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗(yàn)結果的(dí)解釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環(huán)境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試劑汙染，樣品交叉汙染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保存不當或試(shì)劑配製不(bù)準確引(yǐn)起的試(shì)劑檢測效能下降(jiàng)，可(kě)能(néng)會(huì)導(dǎo)致出現假陰性(xìng)結果。
PCR反(fǎn)應的特異性(xìng)：
②鹼基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反(fǎn)應(yīng)的忠實性；
④靶基因(yīn)的特(tè)異性與(yǔ)保守性。
河蟹(xiè)顫抖(dǒu)病病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒其(qí)中引物與模板的正確(què)結(jié)合是(shì)關(guān)鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模板(bǎn)的結合(hé)及引物鏈的延(yán)伸是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基(jī)配對原則(zé)的。聚合酶(méi)合成反(fǎn)應(yīng)的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫性(xìng)，使(shǐ)反應(yīng)中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物的(dí)結合(hé)(復性)可以(yǐ)在較高的溫度下進(jìn)行(háng)，結合的(dí)特異(yì)性大大(dà)增(zēng)加，被(bèi)擴增(zēng)的靶基因片段(duàn)也(yě)就(jiù)能(néng)保(bǎo)持很高的正確(què)度(dù)。再通(tōng)過選擇(zé)特異性和(hé)保守性高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因區，其特(tè)異性程(chéng)度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生成量(liáng)是(shì)以指數(shù)方式增加的(dí)，能將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起(qǐ)始待測模板擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬(wàn)個細胞中(zhōng)檢出一個靶(bǎ)細胞(bāo)；在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測(cè)中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位(wèi))；在(zài)細菌(jūn)學(xué)中zui小檢(jiǎn)出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用耐高溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一次(cì)性地(dì)將反(fǎn)應(yīng)液(yè)加好(hǎo)後，即在(zài)DNA擴(kuò)增液和水浴(yù)鍋上(shàng)進(jìn)行變性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延伸(shēn)反(fǎn)應(yīng)，一般在2～4 小時完成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分(fēn)析，不(bù)一定要用同位(wèi)素，無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙染(rǎn)，易推廣。
(4) 對標本(běn)的純度要求低
不需(xū)要分(fēn)離(lí)病毒或細(xì)菌及培養細胞，DNA 粗(cū)製品及總(zǒng)RNA均可作為擴增模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用臨床標本(běn)如血(xiě)液，體腔液，洗(xǐ)嗽液，毛(máo)發(fā)，細胞，活PCR技術概(gài)論。
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