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PCR檢測試(shì)劑盒
商品屬(shǔ)性
| 產品名(míng)稱 | 英文名稱 | 貨號 |
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副溶(róng)血嗜血杆菌PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé) |
Haemophilus parahemolyticusPCR |
YS-P014256 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避光(guāng)保存，避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍融。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一年(nián)
貨期：現貨(huò)PCR試劑盒的有(yǒu)效期一(yī)般為(wéi)1年(nián)，這(zhè)是(shì)指在適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫度下。核酸擴增部(bù)分的試劑(jì)一般要貯存於(yú)-20℃下，產(chǎn)物檢測(cè)部(bù)分試劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免(miǎn)反復凍融(róng)。
【結果(guǒ)分析條件設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值綫設(shè)定在剛好(hǎo)超過正(zhèng)常陰性質(zhì)控品擴增曲(qū)綫(xiàn)的最(zuì)高(gāo)點。
【質(zhì)控標(biāo)準】
2. 陽性質(zhì)控品(pǐn)的檢測(cè)結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性，有明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增期，Ct值應(yīng)小於(yú)等(děng)於35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需在(zài)一次實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿足(zú)，否則(zé)該次(cì)實驗視(shì)為無(wú)效。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本(běn)為可(kě)疑(yí)樣本；對(duì)於可(kě)疑樣(yàng)本建議(yì)復核(hé)一次(cì)，若(ruò)復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指數擴增(zēng)期(qī)，則判(pàn)定為陽性，否則判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判(pàn)定為陰性樣本(běn)。
【對(duì)檢驗結(jié)果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗室環(huán)境汙(wū)染(rǎn)，試劑(jì)汙染，樣(yàng)品(pǐn)交叉(chā)汙染會出現假陽(yáng)性結(jié)果；
2. 試(shì)劑運輸，保存不當或(huò)試劑配製(zhì)不(bù)準確引起(qǐ)的試劑(jì)檢測(cè)效能下(xià)降，可(kě)能會導致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的(dí)特(tè)異(yì)性：
②鹼基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成反應的忠實性(xìng)；
④靶基(jī)因(yīn)的特異性與保守性(xìng)。
副溶血(xiě)嗜(shì)血杆菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)其中引(yǐn)物與模板的正確結合(hé)是(shì)關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模(mó)板的(dí)結(jié)合及(jí)引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸是遵循鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則的。聚合酶(méi)合成反應的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫性，使反應(yīng)中模(mó)板與(yǔ)引物(wù)的結(jié)合(復性(xìng))可以(yǐ)在較高的(dí)溫度(dù)下進(jìn)行，結合(hé)的(dí)特異(yì)性大(dà)大(dà)增(zēng)加，被擴(kuò)增(zēng)的靶基(jī)因片段(duàn)也(yě)就能(néng)保持很(hěn)高(gāo)的正確度(dù)。再通過(guò)選擇特異(yì)性和(hé)保守性高(gāo)的(dí)靶基(jī)因(yīn)區(qū)，其特異性(xìng)程度就更(gēng)高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物的生(shēng)成量(liáng)是(shì)以指數(shù)方式(shì)增加的，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始(shǐ)待(dài)測模(mó)板擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬(wàn)個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒(dú)的檢測中，PCR的靈敏(mǐn)度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌(jūn)學中zui小檢出率為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐(nài)高溫的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一次性(xìng)地將反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴增液和(hé)水浴(yù)鍋上進(jìn)行變性-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應，一般在(zài)2～4 小時(shí)完成(chéng)擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電(diàn)泳(yǒng)分析，不一定(dìng)要(yào)用同(tóng)位素(sù)，無放(fàng)射性(xìng)汙染，易(yì)推廣。
(4) 對標本(běn)的純度(dù)要(yào)求低
不需(xū)要(yào)分離(lí)病毒或細(xì)菌(jūn)及(jí)培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗(cū)製品及總RNA均(jūn)可作為擴增模板。可直(zhí)接用(yòng)臨床(chuáng)標本(běn)如血液，體(tǐ)腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發(fā)，細胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術概論(lùn)。
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