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PCR檢測試劑盒(hé)
商品(pǐn)屬性
| 產品名稱 | 英文名稱 | 貨(huò)號 |
|
枝孢黴通用(yòng)PCR檢測試(shì)劑盒 |
Cladosporium spp.PCR |
YS-P014021 |
分類：PCR檢測試劑盒(hé)
儲存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存，避(bì)免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫，避光。
有效(xiào)期：一(yī)年(nián)
貨期：現貨PCR試劑盒的有效期(qī)一般(bān)為1年(nián)，這(zhè)是指(zhǐ)在適當(dāng)的儲存溫度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴增部分的試劑(jì)一般要(yào)貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產物檢測部分(fēn)試劑則(zé)貯存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結果分(fēn)析條(tiáo)件設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好(hǎo)超過正(zhèng)常(cháng)陰性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增曲綫的最(zuì)高點。
【質控(kòng)標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控(kòng)品的檢(jiǎn)測結果應(yīng)為(wéi)陽性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值應小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需在一次實驗中同(tóng)時滿足(zú)，否則該次實(shí)驗視(shì)為無效。
【結果判斷】
2.可(kě)疑：有明顯的(dí)指數擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時樣本為可疑樣(yàng)本(běn)；對於(yú)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復核一次，若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴增期，則判定(dìng)為(wéi)陽性，否則判定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無指數擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值均判定為陰性樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的解釋】
1. 實驗室環(huán)境汙(wū)染，試劑(jì)汙染，樣品交(jiāo)叉(chā)汙染會出現(xiàn)假陽性結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保(bǎo)存不當(dāng)或試劑配製(zhì)不準確引起的(dí)試劑檢(jiǎn)測(cè)效能下(xià)降，可(kě)能(néng)會導致(zhì)出(chū)現假陰性結果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特異(yì)性：
②鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠實性(xìng)；
④靶基(jī)因的特(tè)異(yì)性與保守(shǒu)性(xìng)。
枝孢(bāo)黴通(tōng)用(yòng)PCR檢測試劑盒其中引(yǐn)物與模(mó)板的正確結合是(shì)關鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)結(jié)合(hé)及引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的延伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則的。聚合酶(méi)合成反應的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高(gāo)溫性，使(shǐ)反應中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與引物的結合(復(fù)性)可以在較(jiào)高(gāo)的(dí)溫(wēn)度下進行(háng)，結合的特(tè)異(yì)性大(dà)大增(zēng)加，被擴(kuò)增的靶(bǎ)基因(yīn)片段(duàn)也就能保持很(hěn)高的正確度。再通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異性(xìng)和保(bǎo)守性高的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)區，其特異性程(chéng)度就(jiù)更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是(shì)以指數方(fāng)式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始待測(cè)模(mó)板擴增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細胞(bāo)中檢出一(yī)個靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在病(bìng)毒的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的靈敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空斑(bān)形成(chéng)單(dān)位)；在細菌學(xué)中(zhōng)zui小檢出(chū)率為3個細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反應(yīng)用耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶，一次(cì)性地(dì)將反應液(yè)加好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴(kuò)增液和水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進行變性-退火-延(yán)伸(shēn)反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完(wán)成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴增產物一(yī)般用電泳(yǒng)分析，不一定要(yào)用(yòng)同位素，無(wú)放射(shè)性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度(dù)要(yào)求低
不(bù)需(xū)要分(fēn)離病毒或(huò)細(xì)菌及培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總RNA均(jūn)可(kě)作為擴(kuò)增模板。可直(zhí)接(jiē)用臨床標本(běn)如(rú)血(xiě)液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛(máo)發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
- 上(shàng)一(yī)條(tiáo)：毛(máo)樣枝孢(bāo)黴PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
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