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PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
商品屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨號 |
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類誌賀鄰單(dān)胞菌PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé) |
Plesiomonas shigelloidesPCR |
YS-P014601 |
分(fēn)類：PCR檢測(cè)試劑盒
儲存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保存(cún)，避(bì)免反復凍(dòng)融。
運輸(shū)：低溫，避光。
有效(xiào)期：一年
貨期(qī)：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒的有(yǒu)效期一(yī)般為1年，這是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當的儲(chǔ)存溫度下。核(hé)酸擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的(dí)試(shì)劑(jì)一般要(yào)貯(zhù)存(cún)於-20℃下，產物檢(jiǎn)測部分(fēn)試劑(jì)則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反復(fù)凍融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析條(tiáo)件設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾(yù)值綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛好(hǎo)超過正(zhèng)常陰(yīn)性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫的(dí)最高(gāo)點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽性質控(kòng)品的(dí)檢(jiǎn)測結(jié)果應為(wéi)陽(yáng)性，有明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等(děng)於35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需在一(yī)次實(shí)驗中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則該(gāi)次實驗視(shì)為無效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本；對(duì)於(yú)可疑樣(yàng)本建議復(fù)核一次，若復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數擴(kuò)增期(qī)，則(zé)判定為陽性(xìng)，否(fǒu)則判定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判(pàn)定為陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果的解(jiě)釋】
1. 實驗室(shì)環境(jìng)汙(wū)染，試劑汙染(rǎn)，樣品交叉汙(wū)染(rǎn)會出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸，保存不當或(huò)試劑配製不準確(què)引起的(dí)試劑檢測(cè)效(xiào)能(néng)下降，可(kě)能會導(dǎo)致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰性結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的(dí)特(tè)異性：
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反(fǎn)應的忠實性；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特(tè)異(yì)性與(yǔ)保守(shǒu)性。
類(lèi)誌賀鄰(lín)單胞菌PCR檢測試劑盒(hé)其中引物與模(mó)板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確結合是關鍵。引(yǐn)物與模板(bǎn)的結合(hé)及引物(wù)鏈的延(yán)伸是遵循鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合(hé)酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應中模板與引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(復性)可以在(zài)較高的溫(wēn)度(dù)下(xià)進行，結合的特異性(xìng)大大(dà)增(zēng)加，被(bèi)擴增的靶基因片(piàn)段也就能保持(chí)很高的正確度(dù)。再通(tōng)過(guò)選擇特異性(xìng)和保守性高的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)區(qū)，其特異(yì)性(xìng)程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方式(shì)增加的，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始(shǐ)待測模(mó)板擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個細胞(bāo)中檢出(chū)一個(gè)靶細(xì)胞；在(zài)病毒(dú)的檢測中(zhōng)，PCR的靈敏度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑(bān)形(xíng)成單位)；在(zài)細菌學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應(yīng)用耐(nài)高溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一次性地將反應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後，即在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和(hé)水浴鍋上進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退火-延(yán)伸反應，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增(zēng)反應(yīng)。擴增產物(wù)一般(bān)用(yòng)電泳分析，不一(yī)定要用同位(wèi)素(sù)，無放(fàng)射性汙染，易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純度(dù)要(yào)求低
不需要分離病(bìng)毒(dú)或(huò)細(xì)菌(jūn)及培養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液(yè)，體(tǐ)腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛發，細胞(bāo)，活PCR技術(shù)概論。
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