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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)
商品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英文(wén)名稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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溶(róng)組(zǔ)織(zhī)梭(suō)狀芽(yá)孢杆菌PCR檢測試(shì)劑盒 |
Clostridium histolyticumPCR |
YS-P014032 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光(guāng)保存，避免反復凍(dòng)融。
運(yùn)輸(shū)：低溫(wēn)，避(bì)光。
有效期：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試劑(jì)盒的(dí)有(yǒu)效期一般(bān)為(wéi)1年，這是指在適當的儲(chǔ)存溫(wēn)度(dù)下。核(hé)酸(suān)擴增部分的(dí)試(shì)劑(jì)一(yī)般要貯存於(yú)-20℃下(xià)，產物(wù)檢測(cè)部(bù)分試劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反(fǎn)復(fù)凍融。
【結果分(fēn)析(xī)條(tiáo)件設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定：將閾值綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好超過(guò)正(zhèng)常陰性(xìng)質控(kòng)品擴(kuò)增曲綫的(dí)最高點。
【質(zhì)控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽性質控品的(dí)檢測(cè)結果應為陽性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯的指數擴(kuò)增期，Ct值應小於(yú)等(děng)於35；
3. 以上要求(qiú)需(xū)在(zài)一次實驗中同(tóng)時滿足，否則該(gāi)次實(shí)驗視為無效。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為可疑(yí)樣(yàng)本；對於可疑樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復(fù)核(hé)一次，若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且有(yǒu)指數擴增期，則判(pàn)定為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，否則判定為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣本。
【對(duì)檢驗結(jié)果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗室(shì)環(huán)境(jìng)汙染，試劑汙(wū)染，樣品交(jiāo)叉汙染(rǎn)會出現(xiàn)假陽性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū)，保(bǎo)存不當或(huò)試劑配(pèi)製(zhì)不準確引起(qǐ)的(dí)試(shì)劑檢測效能下降(jiàng)，可能會導致出(chū)現假(jiǎ)陰性(xìng)結果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成(chéng)反應的(dí)忠實(shí)性(xìng)；
④靶基因的(dí)特異性(xìng)與保守性。
溶組織梭狀(zhuàng)芽孢杆菌(jūn)PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物(wù)與模(mó)板的(dí)正(zhèng)確(què)結合(hé)是(shì)關鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模板的(dí)結合(hé)及(jí)引(yǐn)物鏈(liàn)的(dí)延伸是遵循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé)的(dí)。聚合酶合成(chéng)反應的忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫性，使反(fǎn)應中(zhōng)模板與(yǔ)引物(wù)的(dí)結合(hé)(復性(xìng))可以在較高的溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行(háng)，結(jié)合(hé)的(dí)特(tè)異性大大(dà)增加，被擴增的靶(bǎ)基因片(piàn)段(duàn)也就能(néng)保持很高的正確(què)度。再通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異性(xìng)和(hé)保守(shǒu)性高的(dí)靶基因(yīn)區，其(qí)特(tè)異(yì)性程(chéng)度就更高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物的生(shēng)成量(liáng)是以指數方(fāng)式增加(jiā)的，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待測(cè)模板(bǎn)擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬(wàn)個細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個靶(bǎ)細胞(bāo)；在病毒的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度可達3個RFU(空斑(bān)形成單(dān)位(wèi))；在(zài)細(xì)菌學(xué)中zui小檢(jiǎn)出率為3個細菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一(yī)次性地將反(fǎn)應液加好後(hòu)，即在DNA擴增(zēng)液和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進行(háng)變性(xìng)-退火-延伸(shēn)反應，一般(bān)在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應。擴增產物(wù)一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分析，不一定要用(yòng)同(tóng)位(wèi)素，無(wú)放射(shè)性(xìng)汙(wū)染，易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的純度(dù)要求低
不需要分(fēn)離病毒(dú)或細(xì)菌(jūn)及(jí)培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總(zǒng)RNA均可(kě)作(zuò)為(wéi)擴增模板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨(lín)床(chuáng)標本如血液，體(tǐ)腔液(yè)，洗嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發，細胞，活PCR技術概論(lùn)。
